Ảnh hưởng của ba và NAA đến khả năng nhân chồi in vitro hoa Hồng lửa (Rosa sp.)

Bài viết này trình bày kết quả nhân chồi hoa Hồng Lửa trong ống nghiệm. Khúc cắt thân xử lý với HgCl2 0,3% trong 15 phút là phù hợp tạo nguồn mẫu sạch ban đầu. Các chồi gần ngọn cho kết quả tạo chồi và tăng trưởng chồi tốt hơn so với các vị trí chồi gần gốc.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ảnh hưởng của ba và NAA đến khả năng nhân chồi in vitro hoa Hồng lửa (Rosa sp.) 443 ẢNH HƯỞNG CỦA BA VÀ NAA ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN CHỒI IN VITRO HOA HỒNG LỬA (Rosa sp.) SV. Đỗ Thị Mộng Thu ThS. Nguyễn Kim Búp Tóm tắt. Bài báo này trình bày kết quả nhân chồi hoa Hồng Lửa trong ốngnghiệm. Khúc cắt thân xử lý với HgCl2 0,3% trong 15 phút là phù hợp tạo nguồn mẫusạch ban đầu. Các chồi gần ngọn cho kết quả tạo chồi và tăng trưởng chồi tốt hơn sovới các vị trí chồi gần gốc. Môi trường MS bổ sung BA 1,5 mg/l riêng rẻ hay kết hợp vớiNAA 0,1 mg/l là môi trường phù hợp cho việc nhân chồi và sự tăng trưởng từ chồi ngủ. Từ khóa: chồi ngủ, chất khử trùng, chất điều hòa sinh trưởng, hoa Hồng Lửa,nhân giống.1. Mở đầu Hoa Hồng Lửa (Hình 1) là giống hoa hồng được người tiêu dùng ưa chuộng vàđược đánh giá là loài hoa có triển vọng của Sa Đéc nhờ đặc tính ra hoa nhiều, hoa đẹprực rỡ và lâu tàn, cây khỏe mạnh và dễ chăm sóc. Để đáp ứng nhu cầu cây con giống đạt chất lượng cao, đồng đều với số lượnglớn cho việc mở rộng diện tích trồng loài hoa này, phương pháp chiết cành truyềnthống gặp nhiều khó khăn. Do số lượng cây con phụ thuộc vào cành chiết của cây mẹ.Hơn nữa, cây con được chiết từ các cây mẹ khác nhau có khả năng sinh trưởng khônggiống nhau dẫn đến khó chăm sóc và chất lượng hoa khi thu hoạch cũng không đồngđều. Việc ứng dụng công nghệ sinh học trong nhân giống cây hoa Hồng Lửa bằngphương pháp nuôi cấy mô sẽ khắc phục được những nhược điểm trên và tạo ra câygiống sạch bệnh có chất lượng cao, ổn định, đồng nhất về mặt di truyền và đặc biệt cóthể sản xuất ra lượng lớn cây con trong thời gian ngắn. Trong phạm vi bài viết này, chúng tôi trình bày kết quả khảo sát ảnh hưởng củacác chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả năng nhân chồi in vitro, một giai đoạnquan trọng quyết định trong việc xây dựng quy trình nhân giống trong ống nghiệm củacây hoa Hồng Lửa. Hình 1. Hoa Hồng Lửa 4442. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.1. Vật liệu Khúc cắt thân mang chồi ngủ ở các vị trí từ 1- 4 (tính từ ngọn) của hoa HồngLửa được thu nhận từ cây mẹ khỏe mạnh, không sâu bệnh ở các vườn hoa hồng tạiThành phố Sa Đéc. Chọn những chồi non được 3 tuần tuổi để bố trí thí nghiệm. 2.2. Phương pháp nghiên cứu 2.2.1. Khảo sát ảnh hưởng của HgCl2 ở các nồng độ và thời gian khác nhau lênkhả năng khử trùng chồi ngủ hoa Hồng Lửa Các đoạn thân hoa Hồng Lửa cắt từ cây mẹ được đem vào phòng thí nghiệmkhử trùng và làm mẫu cấy. Mẫu cấy được bỏ hết lá, cắt thành các đoạn khoảng 2-3cm mang một chồi ngủ ở giữa để khử trùng. Mẫu được khử trùng với xà phòng loãng1% trong 3 phút, sau đó rửa sạch dưới vòi nước máy. Tiếp tục ngâm mẫu trong xàphòng loãng 1% trong 5 phút, rồi rửa sạch dưới vòi nước máy. Tiến hành rửa nhanhbằng cồn 70o trong 30 giây. Cuối cùng, lần lượt cho vào các bình tam giác xử lý vớiHgCl2 ở 0,1%, 0,3% và 0,5% trong 10 phút và 15 phút. Khi xử lý xong, mẫu cấyđược rửa sạch bằng nước cất vô trùng 3 - 4 lần. Các thao tác được thực hiện bêntrong tủ cấy. Mẫu cấy sau khi khử trùng được đặt nuôi trên môi trường MS ở điềukiện nhiệt độ 25 ± 2 0C, chiếu sáng 2000 – 3000 lux, thời gian chiếu sáng 16giờ/ngày, độ ẩm 60 – 70%. Xác định tỷ lệ mẫu nhiễm, tỷ lệ mẫu chết và tỷ lệ mẫusống 1 tuần sau khi cấy (TSKC). 2.2.2. Khảo sát ảnh hưởng của vị trí các chồi ngủ của hoa Hồng Lửa đến khảnăng tạo chồi Mẫu cấy là những khúc cắt thân có mang chồi ngủ ở các vị trí 1, 2, 3, 4 tính từngọn, sau khi khử trùng được cấy vào môi trường MS và đặt ở điều kiện nhiệt độ 25 ±20C, chiếu sáng 2000 – 3000 lux, thời gian chiếu sáng 16 giờ/ngày, độ ẩm 60 – 70%.Xác định số chồi, chiều cao chồi và số lá hình thành từ các chồi ngủ của hoa Hồng Lửaở các nghiệm thức 2 TSKC. 2.2.3. Khảo sát ảnh hưởng của BA riêng rẽ ở các nồng độ khác nhau hay kếthợp với NAA 0,1mg/l trên sự tạo chồi Mẫu cấy là những khúc cắt thân có mang chồi ngủ ở vị trí 1-3 (tính từ ngọn),sau khi khử trùng được cấy vào môi trường MS hay MS bổ sung BA (0,5; 1,0 và 1,5mg/l), hay MS bổ sung BA (0,5; 0,7 và 1,0 mg/l) và NAA 0,1 mg/l và đặt nuôi ở điềukiện nhiệt độ 25 ± 2 0C, chiếu sáng 2000 – 3000 lux, thời gian chiếu sáng 16 giờ/ngày,độ ẩm 60 – 70%. Xác định số chồi, chiều cao chồi và số lá hình thành từ các chồi ngủcủa hoa Hồng Lửa ở các nghiệm thức 2 TSKC. 2.2.4. Phân tích số liệu Các số liệu được xử lý thống kê bằng phần mềm SPSS phiên bản 22.0. 4453. Kết quả và thảo luận 3.1. Hiệu quả khử trùng khúc cắt thân mang chồi ngủ hoa Hồng Lửa. Khử trùng mẫu cấy là việc làm khó vì mẫu sống không thể khử bằng nhiệt độcao mà phải giữ đ ...