Báo cáo Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi In Vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.

Bài báo trình bày kết quả nghiên cứu nhân nhanh chồi in vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. Môi trường phù hợp nhất để nhân nhanh chồi Lan kim tuyến in vitro là Knud*. Thể chồi 8 tuần tuổi từ phôi hạt chín và chồi từ thể chồi cao từ 2-3 cm là phù hợp nhất để nhân nhanh trong môi trường thích hợp Knud* bổ sung 0,5 mg/l BAP + 0,3 mg/l Kinetin + 0,3 mg/l
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Báo cáo " Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi In Vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. "Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ 26 (2010) 248-253 Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi In Vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. Phùng Văn Phê1, Nguyễn Thị Hồng Gấm1, Nguyễn Trung Thành2,* 1 Khoa Lâm học, Trường Đại học Lâm nghiệp, Xuân Mai, Chương Mỹ, Hà Nội 2 Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN, 334 Nguyễn Trãi, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 15 tháng 11 năm 2010 Tóm tắt. Bài báo trình bày kết quả nghiên cứu nhân nhanh chồi in vitro loài Lan kim tuyến - Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. Môi trường phù hợp nhất để nhân nhanh chồi Lan kim tuyến in vitro là Knud*. Thể ch ồi 8 tuần tuổi từ phôi hạt chín và chồi từ thể ch ồi cao từ 2 -3 cm là phù hợp nhất để nhân nhanh trong môi trường thích hợp Knud* bổ sung 0,5 mg/l BAP + 0,3 mg/l Kinetin + 0,3 mg/l NAA + 100 ml/l ND + 100 g/l dịch chiết khoai tây + 20 g/l sucrose + 7 g/l agar + 0,5 g/l AC. Từ khóa: Chồi, Lan kim tuyến, in vitro, nhân nhanh.1. Đặt vấn đề∗ nhanh chồi In vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.. Lan kim tuyến - Anoectochilus roxburghii(Wall.) Lindl. thuộc họ Lan - Orchidaceae, cóphân bố rộng ở hầu hết các tỉnh Việt Nam [1-11]. 2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứuLà một loại thảo dược có giá trị và tiềm năng 2.1. Vật liệu nghiên cứurất lớn, đồng thời cũng được dùng làm cảnh nênLan kim tuyến đã bị thu hái nhiều đ ến mức cạn Thể chồi đ ược tạo ra từ phôi hạt chín vàkiệt ngoài tự nhiên [2]. Hiện nay, Lan kim chồi được tái sinh từ thân ngầm, thân khí sinhtuyến được cấp báo thuộc nhóm IA của Nghị của cây Lan kim tuyến - Anoectochilusđịnh 32/2006/CP, nghiêm cấm khai thác vì mụ c roxburghii (thu thập trong năm 2008, 2009 tạiđích thương mại và nhóm thực vật rừng đang Vườn Quốc gia Ba Vì, Hà Nội) đ ược tạo ra tạinguy cấp EN A1a,c,d, trong sách đ ỏ Việt Nam Trung tâm Giống & Công nghệ sinh học,[3,4]. Vì vậy, nghiên cứu kỹ thuật nhân giống Trường Đại học Lâm nghiệp.loài Lan kim tuyến - Anoectochilus roxburghiiđược triển khai sẽ cung cấp những cơ sở khoa 2.2. Phương pháp nghiên cứuhọc và thực ti ễn nhằm bảo tồn và phát triển loàidược liệu nguy cấp, quí hiếm này. Bài báo này - Bố trí thí nghiệm: Nghiên cứu nhân nhanhgiới thiệu kết quả nghiên cứu k ỹ thuật nhân chồi/thể chồi In vitro loài Lan kim tuyến trong_______ các đi ều ki ện khác nhau về đ ộ tuổi thể chồi,∗ Tác giả liên hệ. ĐT: 84-4-38582178. nguồn gốc chồi, chiều cao chồi và môi trường E-mail: thanhntsh@gmail.com 248 P.V. Phê và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ 26 (2010) 248-253 249nuôi cấy. Môi trường nuôi cấ y được sử dụng tăng thêm theo các phương pháp thống kê sinhcho các thí nghiệm này bao gồm MS, Knudson, học, phân tích phương sai một, hai nhân tố.Knud* và Hyponex đ ược b ổ sung một số chấtđiều hòa sinh trưởng và phụ gia khác. Thí 3. Kết quả nghiên cứunghiệm đ ược bố trí theo khối ngẫu nhiên đầy đ ủ(RCB), lặp lại 3 lần. Khi nghiên cứu ảnh hưởng 3.1. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy và tuổicủa một yếu t ố nào đó thì khống chế các yếu tố thể chồi đến khả năng nhân nhanh thể chồikhác là đ ồng nhất. Dung lượng mẫu quan sát là30 cho mỗi công thức thí nghiệm. - Ảnh hưởng của môi tr ường nuôi cấy đến - Thu thập số liệu: xác định số bình thể chồi khả năng nhân nhanh thể chồi: Thể chồi 8 tuầntạo đ ược sau mỗi lần cấy chuyển, số chồi tạo tuổi được chọn đ ể cấ y vào các môi trường nuôithành, đặc đi ểm của chồi/thể chồi (chiều cao cấ y là Knudson, Knud* và Hyponex bổ sungchồi, số lá/chồi, màu sắc, độ mập, chi ều dài, thêm: 0,5 mg/l BAP + 0,3 mg/l Kinetin + 0,3 mg/l NAA + 100 ml/l ND + 100 g/l dịch chiếtv.v.) khoai tây + 20 g/l sucrose + 7 g/l agar. Kết quả - Xử lý số liệu: xác định hệ số nhân nhanh thu được sau 4 tuần được thể hiện qua Bảng 1.thể chồi, hệ số nhân nhanh chồi, chiều dài chồi Bảng 1. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến khả năng nhân nhanh thể chồi Môi trường Hệ số nhân nhanh thể chồi (l ần) Đặc điểm thể chồi ...