Báo cáo Theo dõi tế bào gốc sinh dục trong phát triển phôi sớm ở gà và chim cút

Gà ( Gallus gallus domesticus) có vai trò quan trọng như là nguồn thực phẩm giầu protein. Bên cạnh đó, gà mái nuôi chuyển gen là đối tượng có tiềm năng cao trong s.n xuất có hiệu qu. các protein trị liệu cho công nghiệp dược phẩm, do giá c. chăn nuôi thấp, vòng đời ngắn với tốc độ sinh trưởng cao, môi trường vô trùng tự nhiên của trứng, lượng lớn protein được tạo ra trên một qu. trứng, và lượng lớn trứng được tạo ra trên một con gà mái trên năm [1] Chim cút (Coturnix coturnix japonica)...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Báo cáo " Theo dõi tế bào gốc sinh dục trong phát triển phôi sớm ở gà và chim cút " Theo dâi tÕ bµo gèc sinh dôc trong ph¸t triÓn ph«i sím ë gµ vµ chim cót NguyÔn Méng Hïng1. Më ®Çu Gµ ( Gallus gallus domesticus) cã vai trß quan träng nh− lµ nguån thùc phÈm giÇuprotein. Bªn c¹nh ®ã, gµ m¸i nu«i chuyÓn gen lµ ®èi t−îng cã tiÒm n¨ng cao trong s¶n xuÊtcã hiÖu qu¶ c¸c protein trÞ liÖu cho c«ng nghiÖp d−îc phÈm, do gi¸ c¶ ch¨n nu«i thÊp, vßng®êi ng¾n víi tèc ®é sinh tr−ëng cao, m«i tr−êng v« trïng tù nhiªn cña trøng, l−îng línprotein ®−îc t¹o ra trªn mét qu¶ trøng, vµ l−îng lín trøng ®−îc t¹o ra trªn mét con gµ m¸itrªn n¨m [1] Chim cót (Coturnix coturnix japonica) còng lµ mét ®èi t−îng nu«i quan träng. §· cãnhiÒu thÝ nghiÖm cÊy ghÐp c¸c m« vµ c¬ quan gi÷a gµ vµ chim cót. §iÒu quan träng lµ do®Æc ®iÓm h×nh th¸i ng−êi ta cã thÓ nhËn biÕt ®−îc c¸c tÕ bµo chim cót lÉn trong c¸c tÕ bµogµ. Chóng t«i quan t©m ®Õn ®èi t−îng nµy víi hy väng sö dông ®Æc ®iÓm trªn ®Ó theo dâihµnh vi c¸c tÕ bµo gèc sinh dôc. Trong sè c¸c lo¹i tÕ bµo gèc, tÕ bµo gèc sinh dôc gi÷ mét vai trß quan träng cho c«ngnghÖ chuyÓn gen, v× tÊt c¶ nh÷ng biÕn ®æi kiÓu gen trong c¸c tÕ bµo gèc nµy ®Òu ®−îc truyÒncho thÕ hÖ sau. §· tõ l©u, ng−êi ta biÕt r»ng c¸c tÕ bµo gèc sinh dôc, hay c¸c tÕ bµo sinh dôcnguyªn thuû xuÊt hiÖn rÊt sím trong qu¸ tr×nh ph¸t triÓn ph«i, di chuyÓn theo mét ph−¬ngthøc nhÊt ®Þnh vµ cuèi cïng ®i vµo c− tró trong tuyÕn sinh dôc vµ lµ thuû tæ cña tÊt c¶ c¸ctÕ bµo sinh dôc vµ giao tö cña c¬ thÓ [2]. §Ó cã thÓ tiÕp cËn c«ng nghÖ tÕ bµo gèc gia cÇm nãi chung vµ gµ nãi riªng, viÖc quanträng lµ ph¶i theo dâi ®−îc hµnh vi c¸c tÕ bµo gèc sinh dôc trong qu¸ tr×nh ph¸t triÓn ph«isím. C«ng tr×nh nµy cã môc tiªu sö dông c¸c dÊu hiÖu h×nh th¸i ®Ó nhËn biÕt vµ theo dâic¸c tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû ë ph«i gµ gièng L−¬ng ph−îng vµ chim cót vµo nh÷ng ngµyÊp ®Çu tiªn.2. §èi t−îng vµ ph−¬ng ph¸p §èi t−îng: Chóng t«i sö dông trøng gµ gièng L−¬ng ph−îng, nu«i t¹i Trung t©mNghiªn cøu Gia cÇm Thôy Ph−¬ng, trøng gièng cã tû lÖ thô tinh vµ Êp në cao trªn 95%. Chóng t«i mua trøng chim cót ®· thô tinh tõ mét sè c¬ së nu«i chim cót ë §«ng Anh,Hµ Néi. Trøng gµ vµ chim cót ®−îc Êp trong m¸y Êp mini Octagon pro 20, h·ng Brinsea, Anhquèc, víi mäi th«ng sè vÒ nhiÖt ®é, ®é Èm vµ ®¶o trøng ®−îc ®iÒu chØnh hoµn toµn tù ®éng. Hµng ngµy, tõ ngµy thø nhÊt ®Õn ngµy thø 6, ph«i ®−îc lÊy ra, ®Þnh h×nh trong dungdÞch Bouin. MÉu ®−îc röa n−íc, khö n−íc, ®óc trong parafin vµ c¾t c¸c l¸t c¾t máng 7 µm.C¸c l¸t ®−îc nhuém Hematoxilin Eosin, nghiªn cøu vµ chôp ¶nh trªn kÝnh hiÓn vi OlympusBHS – PM-10AD theo ph−¬ng ph¸p th«ng th−êng Chóng t«i còng lµm c¸c tiªu b¶n quÐt tõ m¸u ph«i 2-3 ngµy Êp. Tiªu b¶n ®−îc nhuémGiem xa vµ nghiªn cøu nh− ®èi víi c¸c tiªu b¶n c¾t l¸t. Trong c¸c tiªu b¶n nµy, chóng t«i theo dâi c¸c tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû theo c¸cdÊu hiÖu h×nh th¸i ®Æc tr−ng nh−: h×nh cÇu, cã kÝch th−íc lín h¬n h¼n c¸c tÕ bµo xungquanh, cã nh©n lín, næi râ mét hoÆc 2 tiÓu h¹ch. [3]3. KÕt qu¶ vµ th¶o luËn3.1. Theo dâi c¸c tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû ë ph«i 1-3 ngµy Êp Theo Nieuwkoop vµ Sataurya [4], tÕ bµo sinh dôc nguyªn thñy xuÊt hiÖn ë l¸ trªnph«i b×, di c− xuèng l¸ d−íi vµ ë ngµy Êp ®Çu tiªn tËp trung ë liÒm mÇm, mét vïng ngoµiph«i ë phÝa ®Çu d¶i nguyªn thuû. Trong 3 ngµy ®Çu tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû di c− theom¹ch m¸u ®Ó ®i vµo gê sinh dôc. Chóng t«i lµm nhiÒu tiªu b¶n ph«i sím, nh−ng do h×nhth¸i ch−a æn ®Þnh nªn ch−a kh¼ng ®Þnh ®−îc sù nhËn biÕt c¸c tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuûë giai ®o¹n nµy. Chóng t«i sÏ nghiªn cøu chi tiÕt b»ng c¸c ph−¬ng ph¸p ho¸ m« vµ sÏ cãth«ng b¸o sau. Trong c¸c tiªu b¶n ph«i 3 ngµy Êp, chóng t«i ph¸t hiÖn thÊy râ c¸c tÕ bµo ®Æc tr−ngcho tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû gÇn c¸c m¹ch m¸u chÝnh. H×nh 1 lµ ¶nh chôp l¸t c¾t quavïng m¸u cña ph«i chim cót 3 ngµy Êp. Nh− trªn h×nh thÊy râ mét sè tÕ bµo cã h×nh th¸i tÕbµo sinh dôc nguyªn thuû. Chóng cã kÝch th−íc lín h¬n h¼n c¸c tÕ bµo xung quanh. NÕu tÕbµo b×nh th−êng chim cót cã mét h¹t chÊt nhiÔm s¾c lín (tµi liÖu cò vÉn gäi lµ tiÓu h¹ch),th× tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû cã nh©n lín vµ cã 2 “tiÓu h¹ch “ râ rÖt . Chóng n»m ë c¸c vÞtrÝ rÊt gÇn víi thµnh m¹ch, cã thÓ chóng võa di c− tõ m¹ch m¸u, trªn ®−êng ®i tíi gê sinhdôc. Quan s¸t c¸c tiªu b¶n quÐt còng ph¸t hiÖn ®−îc mét sè tÕ bµo cã h×nh th¸i gièng víi tÕbµo sinh dôc nguyªn thuû trong m¸u ph«i gµ vµ chim cót. H×nh 1. ¶nh hiÓn vi vïng m« quanh ®éng m¹ch chñ l−ng ph«i chim cót 3 ngµy Êp. 1- C¸c tÕ bµo cã h×nh th¸i tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû. 2- Xoang ®éng m¹ch chñ l−ng. Hemotoxilin – Eosin, TK-10, VK- 1003.2. Theo dâi c¸c tÕ bµo sinh dôc nguyªn thuû ë ph«i 3-5 ngµy Êp H×nh 2 lµ ¶nh chôp hiÓn vi víi ®é phãng ®¹i thÊp l¸t c¾t qua ph«i gµ 5 ngµy Êp ®i quavïng gê sinh dôc. Cã thÓ thÊy ...