Bước đầu tinh sạch Polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ hải miên Aaptos suberitoides Brondsted (1934)

Bài báo tập trung trình bày về kết quả bước đầu tinh sạch polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ loài hải miên Aaptos suberitoides. Kết quả nghiên cứu cho thấy phân đoạn polyphenol trong chloroform có hàm lượng polyphenol cao nhất là 122,645 ± 0,053 mg acid gallic/ml, tương ứng với hoạt tính chống oxy hóa và hoạt tính khử sắt lần lượt là 226,76 mg a.ascorbic/ml và 15,605 mg FeSO4 /ml. Độ tinh sạch của phân đoạn polyphenol trong chloroform cao nhất, tăng 13,778% so với dịch chiết cô đặc. Polyphenol thu nhận từ loài hải miên Aaptos suberitoides có thể được ứng dụng để sản xuất các sản phẩm y dược phẩm và thực phẩm.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bước đầu tinh sạch Polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ hải miên Aaptos suberitoides Brondsted (1934) Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Số 4/2017 THOÂNG BAÙO KHOA HOÏC BƯỚC ĐẦU TINH SẠCH POLYPHENOL CÓ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TỪ HẢI MIÊN Aaptos suberitoides Brøndsted (1934) INITIAL PURIFICATION OF POLYPHENOL WITH ANTIOXIDANT ACTIVITY FROM SPONGE Aaptos suberitoides Brøndsted (1934) Trần Khắc Trí Nhân1, Vũ Ngọc Bội2, Đặng Xuân Cường3 Ngày nhận bài: 15/11/2017; Ngày phản biện thông qua: 22/12/2017; Ngày duyệt đăng: 29/12/2017 TÓM TẮT Bài báo tập trung trình bày về kết quả bước đầu tinh sạch polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ loài hải miên Aaptos suberitoides. Kết quả nghiên cứu cho thấy phân đoạn polyphenol trong chloroform có hàm lượng polyphenol cao nhất là 122,645 ± 0,053 mg acid gallic/ml, tương ứng với hoạt tính chống oxy hóa và hoạt tính khử sắt lần lượt là 226,76 mg a.ascorbic/ml và 15,605 mg FeSO4 /ml. Độ tinh sạch của phân đoạn polyphenol trong chloroform cao nhất, tăng 13,778% so với dịch chiết cô đặc. Polyphenol thu nhận từ loài hải miên Aaptos suberitoides có thể được ứng dụng để sản xuất các sản phẩm y dược phẩm và thực phẩm. Từ khóa: Aaptos suberitoides, chống oxy hóa, hải miên, phân đoạn, polyphenol ABSTRACT The paper focused on initial purification of polyphenol with antioxidant activity from Aaptos suberitoides sponge. The results showed that the polyphenol fraction in chloroform has the highest polyphenol content, 122.645 ± 0.053 mg gallic acid/ml. Total antioxidant and reducing power activity of the polyphenol fraction in chloroform were 226.76 mg ascorbic acid/ml and 15.605 mg FeSO4/ml. Purification degree of polyphenol in the chloroform fraction was also the highest, increased to 13.778%, comparable to concentrated extract. Polyphenol extracted from sponge Aaptos suberitoides can be applied into the production for the product of functional food and medicine. Keywords: Aaptos suberitoides, antioxidant, sponge, fraction, polyphenol I. MỞ ĐẦU Hải miên là động vật biển được cho là có chứa nhiều chất có hoạt tính sinh học, có thể sử dụng để hỗ trợ điều trị bệnh cho con người như: di-isobutyl phthalate [1], di-nbutyl phthalate, acid linoleic [9], β–sitosterol [3], triglyceride [14],... Trong số đó các nhà khoa học đã phát hiện được các loại polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa cao như spongouridine, spongothymidine [10], spongosine [4], crotonoside [13], suberitine A-D [6],.... Nhiều công bố cho thấy, polyphenol hải miên có hoạt tính cao trong việc ức chế tế bào khối u P388 (gây bệnh bạch cầu), ung thư phổi và u tủy ở động vật và polyphenol còn có khả năng giúp hải miên tự bảo vệ chống lại các mối đe dọa từ môi trường như các cuộc tấn công của động vật ăn thịt, vi sinh, sinh vật bám hay chống lại các tác động bất lượi của môi trường [12]. Trần Khắc Trí Nhân. GV. Khoa CNTP, Cao Đẳng nghề Phú Yên. Email: Tran.khac.tri.nhan.1992@gmail.com. SĐT. 01645610389 2 Vũ Ngọc Bội - PGS. TS. Khoa Công nghệ Thực phẩm, Đại học Nha Trang 3 Đặng Xuân Cường – TS. Viện Nghiên cứu và Ứng dụng Công nghệ Nha Trang, VAST 1 64 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Vì thế chúng tôi tiến hành nghiên cứu về polyphenol ở hải miên. Bài báo này đã thể hiện kết quả nghiên cứu ban đầu về quá trình tinh sạch polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ hải miên Aaptos suberitoides nhằm mục đích định hướng quá trình nghiên cứu tinh sạch polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ loài này để ứng dụng trong thực phẩm chức năng cũng như dược phẩm. II. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1. Nguyên liệu Nguyên liệu hải miên Aaptos suberitoides được thu mẫu tại ven biển Hòn Mun, Hòn Một thuộc Nha Trang, Khánh Hòa và được chuyên gia Thái Minh Quang - Viện Hải dương học Nha Trang định danh. Kết quả thu mẫu cho thấy, loài hải miên Aaptos suberitoides có trữ lượng tại vùng thu mẫu vào khoảng 400 gam mẫu/5m2. Sau khi thu mẫu, hải miên được rửa sạch bằng nước biển và ướp đá xay theo tỷ lệ hải miên/đá xay là 1/3 (w/w) và vận chuyển ngay về phòng thí nghiệm tại Viện Nghiên cứu và Ứng dụng Nha Trang ngay sau khi thu mẫu. Tại phòng thí nghiệm, Hải miên được bảo quản ở tủ đông sâu và phá vỡ cấu trúc bằng nitơ lỏng, đồng hóa và bảo quản bột hải miên trong tủ đông. Bột hải miên được sử dụng để chiết polyphenol trong quá trình nghiên cứu. 2. Phương pháp nghiên cứu 2.1. Phương pháp chiết polyphenol từ hải miên Polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa được chiết từ bột hải miên bằng phương pháp ngâm chiết có hỗ trợ sóng siêu âm ở chế độ gián đoạn, dung môi chiết là methanol 99,9%, nhiệt độ chiết 500C, thời gian chiết 75 phút, tỷ lệ DM/NL là 40/1 (v/w), chiết 1 lần. Dịch chiết được lọc qua giấy lọc Whatman No. 4 để loại bỏ tạp chất. Sau đó, dịch lọc được cô đặc bằng thiết bị cô quay chân không ở nhiệt độ 400C và sử dụng dịch cô đặc để nghiên cứu sơ bộ tinh sạch. Sau khi cô đặc, dịch cô đặc (A) Số 4/2017 có một số chỉ tiêu chất lượng: hàm lượng polyphenol là 169,325 mg phloroglucinol/ml dịch chiết cô đặc (chiếm 73,694% trong tổng số chất khô có trong dịch cô đặc) tăng 9,899 lần so với dịch chiết ban đầu (17,106 mg phloroglucinol/ml dịch chiết ban đầu), Hoạt tính chống oxy tổng là 469,839 mg acid ascorbic/ ml dịch chiết cô đặc, tăng 7,306 lần so với dịch chiết ban đầu (64,316 mg acid ascorbic/ml dịch chiết) và hoạt tính khử sắt là 39,136 mg FeSO4/ ml dịch chiết cô đặc, tăng 7,596 lần so với dịch chiết ban đầu (5,153 mg FeSO4/ml dịch chiết). 2.2. Tinh sạch sơ bộ polyphenol từ hải miên bằng kỹ thuật chiết lỏng - lỏng Dịch chiết cô đặc được chiết phân đoạn bằng kỹ thuật chiết lỏng lỏng bằng các dung môi hữu cơ có độ phân cực khác nhau: n-hexan, chlorofrom, ethyl acetat, n-butanol, nhằm phân đoạn các polyphenol có độ phân cực khác nhau và hoạt tính khác nhau. Chiết phân đoạn polyphenol trong n-hexan, sử dụng tỷ lệ n-hexan/dịch methanol cô đặc là 1/1; 4/1; 9/1; 10/1; 11/1 (v/v); Chiết phân đoạn polyphenol trong chloroform, sử dụng tỷ lệ chloroform/ dịch metha ...