Chương 3: Phương pháp nghiên cứu mô học

Một mẫu mô được cố định tốt khi nhữngtế bào cấu tạo nên mô đó vẫn giữnguyên hình dáng, thể hiện được nhiềuchi tiết và cấu trúc, đồng thời giữ đượcmối liên quan tương hỗ trong tế bào vàmô giống như còn sống. Mô có thể được cố định bằng nhiềuphương pháp: Vật lí : nhiệt độ.Hóa học: các loại hóa chất
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Chương 3: Phương pháp nghiên cứu mô học CHƯƠNG 3PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨUMÔHỌC Tạisaophảinghiêncứumôhọc? Vaitròcủamôhọctrongcôngtácnghiên cứuvềthủysảnnhưthếnào? Môhọchiệnnayđãpháttriểnnhưthế nào? Lịch sử nghiên cứu mô học  TKXVII TKXIX Hiệnnay Đượccông Bắtđầu nhận,phát Pháttriểnnghiêncứu triểnmạnh nhiềukĩ môhọc vàocuốitk thuậtmới 19Phương pháp nghiên cứu mô học Quitrìnhcơbảntrongnghiêncứumô học: Cốđịnhmẫu1. Xửlímẫu2. Nhuộmmẫu3. Đọcmẫumô4. Cốđịnhmẫu:1.Tạisaophảicốđịnhmẫu? Mẫumôhaycơquancủacáhoặctômsaukhi táchrakhỏicơthểsẽchếtđivàtrảiquaquá trìnhhoạitửvànhanhchóngtanrã(trumpet al.,1980) Vìvậycầnphảingănchặnsựhoạitửvàtanrã đóbằngviệccốđịnhnhanhvàítgâyrasự thayđổicấutrúcnhất.Mụctiêucốđịnhmẫu: Ngănchặnsựhoạitửvàtanrã Làmcáctổchứcmôgiữvữngcấutrúc trongsuốtquátrìnhxửlývànhuộmmẫu bằngnhiềuloạihóachấtkhácnhau. Mộtmẫumôđượccốđịnhtốtkhinhững tếbàocấutạonênmôđóvẫngiữ nguyênhìnhdáng,thểhiệnđượcnhiều chitiếtvàcấutrúc,đồngthờigiữđược mốiliênquantươnghỗtrongtếbàovà môgiốngnhưcònsống Môcóthểđượccốđịnhbằngnhiều phươngpháp: Vậtlí:nhiệtđộ Hóahọc:cácloạihóachất Cácloạihóachấtcốđịnh Bouin: AFADavidson: Formoltrungtính(10%): Việcchọndungdịchcốđịnhphụthuộc vàomụcđíchnghiêncứuThídụ: Sửdụngbouintrongnghiêncứusựphát triểntuyếnsinhdục SửdụngAFAđểcốđịnhmẫumobệnh họctrêntôm…Phươngphápcốđịnh Kíchthướcmẫucóảnhhưởngđếnhiệu quảcốđịnh Tuynhiên,độdàycủamẫucótínhquyết địnhđếnhiệuquảcốđịnh Đốivớiloạidungdịchcốđịnhcókhả năngngấmkém,chiềudàymẫumô khôngquá12mm Nếudungdịchcókhảnăngngấmmạnh vàsâuthìchiềudàicủanókhôngquá 5mm Thểtíchdungdịchcốđịnh:thểtíchdung dịchcốđịnhcầnlớnhơnnhiềusovớithể tíchmẫumô(ítnhất50lần) Thờigiancốđịnh:thờigiancốđịnhphụ thuộcvàotừngloạidungdịchcốđịnh, thườngdaođộngtừ24h Nhiệtđộcốđịnh:Nhiệtđộcaolàmtăng vàlạnhlàmchậmkhảnăngngấmcủa dungdịchcốđịnh.Đốivớiloạidungdịch cốđịnhdễbayhơinêntiếnhànhởnhiệt độthấp. Quátrìnhphahóachấtcốđịnhnênthực hiệntrongtủhút Saukhicốđịnhthìmẫucầnphảiđược rửa(dungdịchcốđịnhcóthểlàmthay đổitínhbắtmàucủatếbào) Thờigianrửabằngvớithờigiancốđịnh Cóthểrửabằngnướchoặccồn.Cắttỉa,địnhhướngmô Mụcđích:Địnhhướngnhữngmôcần quansát. Mẫumôcóthểđượccắtbỏnhữngphần khôngcầnthiết,giúptiếtkiệmthờigian trongquansátQuitrìnhxửlýmẫu1. Loạinước2. Làmtrongmẫu3. Ngấmparaffin1. Loại Nước Việckhửnướcphảiđảmbảonguyêntắc làloạibỏhếtnướctrongmômàkhông làmtếbàobịbiếndạnghoặckhônglàm vịtrícủathànhphầncấutạotếbàotrong môbịthayđổi Quátrìnhloạinướcđượcthựchiệnbằng cáchnhúngmẫumôquahàngloạtcác dungdịchcồncónồngđộtừthấpđến cao.Thờigiankhửnướctùytheođộdày củamẫumôVídụ:xửlímẫuquacồn507095100 ...