Công nghệ ADN tái tổ hợp part 4

Cấu trúc phân tử ADN được cấu thành gồm 2 chuỗi có thành phần bổ sung cho nhau từ đầu đến cuối. Hai chuỗi này được giữ vững cấu trúc bằng những liên kết hoá học. Các liên kết này khi bị cắt sẽ làm phân tử ADN tách rời 2 chuỗi tương tự như khi ta kéo chiếc phéc mơ tuya; Về mặt hoá học, các ADN được cấu thành từ những viên gạch, gọi là nucleotide,viết tắt là Nu. Do các Nu chi khác nhau ở base (1Nu = 1 Desoxyribose + 1 acid photphoric + 1 base nitric),nên...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Công nghệ ADN tái tổ hợp part 4 plasmid Nhãm pUC l nhãm vÐct¬ plasmid thuéc thÕ hÖ thø 3. Chøa c¶ ®iÓm khëi khëi ®Çu sao chÐp cña phage M13 cho phÐp t¸ch dßng nhê vÐct¬ helper. Th−êng mang dÊu chuÈn l Ampr v LacZ. 19 Plasmid pUC 20 Plasmid pUC C¸c plasmid pUC sao chÐp theo kiÓu θ khi kh«ng cã vÐct¬ trî gióp (helper). Khi cã c¸c vÐct¬ helper (vd. M13), c¸c plasmid pUC sao chÐp theo kiÓu vßng l¨n, t¹o m¹ch ®¬n v gi¶i phãng ra ngo i nhê protein vá virut. 21 Plasmid pM13 B¶n chÊt l ph©n tö ADN m¹ch ®¬n. Kh«ng l m ph©n gi¶i tÕ b o chñ khi gi¶i phãng khái tÕ b o nªn t¸ch dßng thuËn tiÖn 22 vÐct¬ plasmid −u ®iÓm CÊu tróc ®¬n gi¶n, kÝch th−íc nhá. DÔ tinh s¹ch, dÔ ph©n tÝch ®o¹n t¸i tæ hîp. Cã thÓ nh©n lªn víi sè l−îng lín, tèc ®é nhanh. Nh−îc ®iÓm §«i khi, hiÖu suÊt biÕn n¹p v o tÕ b o chñ thÊp. Kh«ng hiÖu qu¶ khi biÕn n¹p ë eukaryote. Kh«ng t¸ch dßng ®−îc c¸c ph©n ®o¹n ADN kÝch th−íc lín (> 10 kb). 23 vÐct¬ Phage PhÇn lín xuÊt ph¸t tõ phage λ. KÝch th−íc kho¶ng 48,5 kb. Cã thÓ mang c¸c ®o¹n ADN c i ®Õn ~20 kb. (virut (virut cã thÓ ®ãng gãi ADN ®Õn 40-50 kb) Kh¶ n¨ng x©m nhËp tÕ b o chñ nhanh. Cã thÓ t¸ch dßng ë c¶ prokaryote v eukaryote. 24