CÔNG NGHỆ GIÁM SÁT VI SINH VẬT VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG MÔI TRƯỜNG

Real-time PCR là một phương pháp pcr mới. nó kiểm soát lượng huỳnh quang giải phóng ra trong phản ứng từ đó có thể biết được lượng sản phẩm PCR trong từng thời điểm (chu kỳ) của quá trình khuếch đại, trái ngược vơí PCR truyền thống chỉ biết được lượng sản phẩm được khuếch đại ở thời điểm cuối cùng của phản ứng khuếch đại
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
CÔNG NGHỆ GIÁM SÁT VI SINH VẬT VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG MÔI TRƯỜNG CHƯƠNG XIII CHCÔNG NGHỆ GIÁM SÁT VI SINH VẬT VÀĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG MÔI TRƯỜNG Kỹ thuật kiểm tra vi sinh vật ở mức phân tử Kỹ thuật PCR  Kỹ thuật kiểm tra enzyme vi sinh vật  Kỹ thuật kiểm tra vi sinh vật ở mức tế bào Kỹ thuật kiểm tra vi sinh vật phát quang  Kỹ thuật kiểm tra vi khuẩn đánh giá chất lượng  nướcNguyên tắcDựa trên sự khuếch đại một trình tự gene đích Nguyên lý của real-time PCR Real-time PCR là một phương pháp pcr mới. nó kiểm soát lượng huỳnh quang giải phóng ra trong phản ứng từ đó có thể biết được lượng sản phẩm PCR trong từng thời điểm (chu kỳ) của quá trình khuếch đại, trái ngược vơí PCR truyền thống chỉ biết được lượng sản phẩm được khuếch đại ở thời điểm cuối cùng của phản ứng khuếch đại Dựa trên nguyên tắc kháng thể - kháng nguyênNguyên tắc:Dựa vào sự phát hiện ATP thông qua enzyme luciferase  sự phát sáng Phát hiện nhanh- Nhạy vì có thể phát hiện 1 pg ATP tương ứng- với 1000 tế bào vi khuẩn Dễ bị dương tính giả Chi phí cao Kỹ thuật MPN Kỹ thuật màng lọc- Viết tắt: Most Probably Number- Dựa trên nguyên tắc pha loãng tới hạn Mẫu được pha thành một dãy thập phân liên tiếp và mẫu được đưa vào môi trường thích hợp Ủ và đọc số ống dương tính Tra bảng Mac – crady  tính toán số lượngMẪU PHA LOÃNG LSB Coliforms 370C/24h BGBL Coliform 440C/24h EC broth chịu nhiệt 440C/24h Feacal EMB Trypton Coliform Kovac’s IMViC E.Coli