Đánh giá giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng của các phương pháp định tính, định lượng biến đổi gen

Nghiên cứu đã khảo sát các nền mẫu hạt, thức ăn chăn nuôi và thực phẩm có chứa ngô và đậu tương với hai phương pháp định tính, định lượng biến đổi gen trên ngô (NK603) và đậu tương (GTS40-3-2) với các nồng độ 1%; 0,1%; 0,04%; 0,02%; 0,01% bằng Real time PCR.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đánh giá giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng của các phương pháp định tính, định lượng biến đổi genTạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(83)/2017 Sequencing, evaluating the similarity between the transformed sequences and the designed expression sequence of ZmDREB2A in maize Doan Thi Bich Thao, Nguyen Xuan Thang, Le Cong Luc, Nguyen Thi Thu Hoai, Ta Thi Thuy Dung, Le Cong Tung, Bui Manh Cuong, Nong Van HaiAbstractZmDREB2A is a transcription factor belonging to AP2/ERF transcription factor family isolated from maize. Previousstudies pointed out that ZmDREB2A have ability to activate many genes related to the abiotic stress signalingpathway. In this study, the expression structure Ubi :: ZmDREB2A-S :: 35S in two lines of maize (K3 and K7) and theaccuracy were identified. To achieve that goal, PCR and DNA sequencing of the Ubiquitin promoter, ZmDREB2Asequence and 35S terminator was used. Results showed that the similarity between the transformed sequences andthe expression sequence in the vector was higher than 98%. It indicated that the expression of the transformationstructure in transformed maize can occur normally.Keywords: Maize, gene ZmDREB2A, Agrobacterium tumefaciens, drought toleranceNgày nhận bài: 30/8/2017 Người phản biện: TS. Huỳnh Thị HuệNgày phản biện: 9/9/2017 Ngày duyệt đăng: 11/10/2017 ĐÁNH GIÁ GIỚI HẠN PHÁT HIỆN, GIỚI HẠN ĐỊNH LƯỢNG CỦA CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG BIẾN ĐỔI GEN Lưu Minh Cúc1 TÓM TẮT Nghiên cứu đã khảo sát các nền mẫu hạt, thức ăn chăn nuôi và thực phẩm có chứa ngô và đậu tương với haiphương pháp định tính, định lượng biến đổi gen trên ngô (NK603) và đậu tương (GTS40-3-2) với các nồng độ 1%;0,1%; 0,04%; 0,02%; 0,01% bằng Real time PCR. Qua đó, đã chứng minh được với dãy nồng độ đã sử dụng, giớiphát hiện và giới hạn định lượng đối với các nền mẫu chứa đậu tương và ngô đã được xác định: Giới hạn phát hiện:LODđậu tương: 0,04%; LODngô: 0,04%; Giới hạn định lượng: LOQđậu tương: 0,1%; LOQngô: 0,1%. Cách xác định giới hạnphát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) là phương pháp chuẩn có thể áp dụng ở tất cả các phòng thí nghiệmvề phân tích GMO. Từ khóa: Sinh vật biến đổi gen (GMO), đậu tương, giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng, ngôI. ĐẶT VẤN ĐỀ Các quyết định của cơ quan quản lý về việc có cấp Hiện nay, đã có 495 sự kiện chuyển gen được phê phép hay không đối với một số hoạt động liên quanchuẩn, tập trung chủ yếu vào một số cây trồng chính đến sinh vật biến đổi gen được dựa trên quy trìnhnhư ngô (231 sự kiện); bông (59 sự kiện); khoai tây phân tích nguy cơ nghiêm ngặt, trong đó tập trung(47 sự kiện); cải dầu (40 sự kiện); đậu tương (36 sự vào các bằng chứng khoa học và tư vấn sâu rộngkiện) và các cây trồng khác. Các nước sử dụng sản của các chuyên gia (Phạm Văn Toản và Nguyễn Thịphẩm biến đổi gen làm thực phẩm và thức ăn chăn Thanh Thủy, 2015). Các bằng chứng khoa học trênnuôi cũng tăng lên đến 40 nước, trong đó có cả Cộng thế giới đã chứng minh về tính an toàn của các sảnđồng Châu Âu (EU), tính là một nước (ISAAA, phẩm được tạo ra từ các loại cây trồng biến đổi gen2017). Việt Nam đã cấp phép 21 sự kiện ngô, đậu (ISAAA, 2016). Thực phẩm có nguồn gốc từ sinh vậttương biến đổi gen sử dụng làm thực phẩm và thức và sản phẩm biến đổi gen trải qua nhiều thử nghiệmăn chăn nuôi. Đây là một bước tiến quan trọng trong hơn bất cứ thực phẩm nào trong lịch sử.khâu quản lý để đảm bảo an ninh lương thực trong Đối với Việt Nam, việc phát hiện biến đổi gennước và quyền lợi người tiêu dùng khi các thông trong các sản phẩm thực phẩm và thực hiện dántin về sản phẩm trở nên minh bạch, công khai hơn. nhãn không liên quan đến an toàn thực phẩm mà1 Viện Di truyền Nông nghiệp 37Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(83)/2017chính là để đảm bảo quyền lựa chọn của người tiêu II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUdùng. Trong quá trình xây dựng phương pháp định 2.1. Vật liệu nghiên cứutính, định lượng biến đổi gen (Genetically Modified - Vật liệu tham chiếu chuẩn chứng nhận (CertifiedOrganisms - GMO) trong các sản phẩm nông s ...