Đánh giá mức độ sao chép mRNA và khả năng biểu hiện protein HIP ở mô ung thư vú

Trong nghiên cứu này tác giả tiến hành đánh giá mức độ sao chép mRNA và biểu hiện protein HIP ở mô ung thư vú, so sánh mối tương quan giữa sao chép mRNA và biểu hiện protein theo các giai đoạn phát triển và thể tế bào học khác nhau của ung thư vú.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đánh giá mức độ sao chép mRNA và khả năng biểu hiện protein HIP ở mô ung thư vú Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Tập 30, Số 2 (2014) 47-54 Đánh giá mức độ sao chép mRNA và khả năng biểu hiện protein HIP ở mô ung thư vú Đặng Thị Tuyết Minh1, Lê Thị Phượng2,* 1 Trường Cao đẳng Y tế Hà Đông 2 Trường Đại học Kỹ thuật Y tế Hải Dương Nhận ngày 15 tháng 4 năm 2014 Chỉnh sửa ngày 28 tháng 4 năm 2014; Chấp nhận đăng ngày 14 tháng 5 năm 2014 Tóm tắt: Nhiều nghiên cứu khoa học đã khẳng định sự tăng cường tổng hợp HIP được biểu hiện ở cả mức độ RNA và protein. Đặc biệt sự tăng cường tổng hợp này còn liên quan chặt chẽ tới giai đoạn phát triển, tình trạng biệt hoá và mức độ ác tính của từng dòng tế bào. Để đánh giá mức độ sao chép mRNA và biểu hiện protein HIP theo các giai đoạn phát triển và các thể tế bào học khác nhau của mô ung thư vú, chúng tôi đã tách chiết RNA tống số từ 62 mẫu mô (47 mẫu ung thư và 15 mấu mô u xơ vú); tổng hợp cDNA bằng kỹ thuật sao chép ngược (reverse transcript-polymerase chain reaction/RT-PCR); sau đó, đánh giá mức độ sao chép mRNA và biểu hiện protein HIP bằng kỹ thuật RT-PCR bán định lượng và kỹ thuật Western blot. Kết quả cho thấy, mức độ biểu hiện mRNA và protein HIP khác biệt một cách rõ rệt giữa mô ung thư và u xơ vú, đặc biệt sự khác nhau này còn phụ thuộc vào các giai đoạn phát triển và các thể loại tế bào học khác nhau của ung thư. Từ khóa: Biểu hiện, HIP/L29, sao chép, RT-PCR, ung thư vú. 1. Mở đầu∗ ung thư vú, bao gồm 2 loại ung thư: 178.480 ca ung vú xâm lấn (invasive breast cancer) và Ung thư vú xuất hiện là do sự phát triển ác 60.030 ca ung thư không lan tỏa (in situ), ước tính của các tế bào biểu mô lót bên trong lòng đoán khoảng 40.460 bệnh nhân đã chết. Ở Việt ống và tiểu thùy của tuyến vú. Đây là loại ung Nam, theo ghi nhận của bệnh viện K năm 2010, thư đứng hàng đầu đối với phụ nữ ở độ tuổi 40- tỷ lệ mắc ung thư vú là 30/100000 phụ nữ tại 60, tuy nhiên những năm gần đây bệnh xuất Hà Nội còn ở thành phố Hồ Chí Minh tỷ lệ này hiện cả ở phụ nữ còn trẻ trong độ tuổi 20-30 với là 20/100000 [1]. Bệnh này, nếu được phát hiện tần số tăng dần. Theo thống kê của Tổ chức sớm và điều trị kịp thời, đúng phương pháp sẽ Ung thư Mỹ (Society, 2008), tỷ lệ mắc là kéo dài thời gian hoặc hoàn toàn khỏi bệnh và 92,04/100000 dân ở châu Âu và 67,48/100000 tiết kiệm chi phí điều trị rất nhiều. dân trên toàn thế giới. Năm 2007, ở Mỹ có Heparan sulfate interacting protein (HIP) là khoảng 238.510 phụ nữ mới được chẩn đoán protein màng tế bào có khả năng gắn đặc hiệu _______ ∗ và chọn lọc với heparin/heparan sulfate, thông Tác giả liên hệ. ĐT: 84-982181195. E-mail: phuongsinh@ymail.com qua đó tham gia vào quá trình tương tác tế bào- tế bào [2, 3]. Quá trình này đóng vai trò quan 47 48 Đ.T.T. Minh, L.T. Phượng /Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Tập 30, Số 2 (2014) 47-54 trọng trong sự phát triển, biệt hoá và di chuyển trong 15 phút, thu phần dịch trong. Làm tủa của tế bào. HIP được tổng hợp nhiều ở dòng tế RNA bằng 0,5 ml isopropanol và ly tâm 15.000 bào biểu mô, nội mạc, không phát hiện được ở vòng/phút ở 4oC trong 5 phút. Giữ lại phần cặn dòng tế bào sợi và tổ chức liên kết. Nhiều ở đáy ống. Rửa tủa bằng ethanol 75%, ly tâm nghiên cứu đã chỉ ra rằng, HIP được tăng cường thu hồi tủa và hòa tan bằng 20 μl nước cất có tổng hợp ở các dòng tế bào và mô ung thư ở cả diethyl-pyrocarbonat (DEPC). mức độ mRNA và protein [2, 4-7]. Trong Kỹ thuật tổng hợp ngược cDNA (RT-PCR) nghiên cứu này chúng tôi tiến hành đánh giá cDNA được tổng hợp từ 2-3 μg RNA tổng mức độ sao chép mRNA và biểu hiện protein ...