Đề tài: Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên GP 120 của virus HIV phân type B lưu hành tại Việt Nam

Triomune-30( or -40);Mỗi viên nén chứa: Stavudine 30 mg(or 40 mg); Lamivudine 150 mg; Nevirapine 200 mg.Cả hai stavudine và lamivudine hoạt động bằng cách chấm dứt sự tăng trưởng của các chuỗi DNA và sao chép các ức chế ngược của HIV.Nevirapine là một non-nucleoside ức chế sao chép ngược.Nó hoạt động bằng cách sao chép ngược trực tiếp ức chế.Amantadine: Tác dụng ở giai đoạn 1, tức là ức chế sự hòa nhập virus vào bên trong tế bào ký chủ.Ribavirin: Tác dụng ở giai đoạn 2, tức là ức chế virus (đặc biệt virus cúm) tổng...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đề tài: Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên GP 120 của virus HIV phân type B lưu hành tại Việt NamKHÓA LUẬN TỐT NGHIỆPĐề tài: Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóakháng nguyên GP 120 của virus HIV phân type B lưu hành tại Việt Nam Người hướng dẫn : PGS.TS Đinh Duy Kháng Sinh viên : Phạm Thu TrangTình hình HIV trên thế giới 2009• Ước tính đến năm 2011, Việt Nam có khoảng 311.500 người bị nhiễm bệnh.• Tại Việt Nam tính đến ngày 31/12/2010• 183.938 người• 44.938 người• 49.477 ngườiPhân bố các phân type HIV-1 M theo vùng địa lý (2008)Glycoprotein gp 120Glycoprotein vỏ gp 120 của virus HIVPhức hợp gp120-CD4-đồng thụ thểVẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu• Plasmid mang gen gp120 của virus HIV phân type B lưu hành ở Việt Nam (mẫu số 6, Quảng Ninh) được tách dòng thành công tại Phòng Vi sinh vật học phân tử - Viện CNSH - Viện KH&CN VN.• Các hóa chất, sinh phẩm và trang thiết bị tại Phòng Vi sinh vật học phân tử - Viện CNSH - Viện KH&CN VN. Phương pháp nghiên cứu• Nhân bản gen mã hóa protein gp120B của virus HIV bằng phương pháp PCR.• Gắn sản phẩm PCR vào vector.• Biến nạp DNA plasmid vào tế bào E.coli.• Cắt DNA bằng enzyme giới hạn.• Xác định trình tự gen bằng máy giải trình tự gen tự động• Biểu hiện gen trong tế bào E.coli tái tổ hợp.• Tinh sạch protein tái tổ hợp bằng cột ái lực Ni2+ .KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬNThiết kế vector biểu hiện pET32a(+) mang gen gp120BKhuếch đại gen gp120B_EX bằng cặp mồi biểu hiện Tạo vector tái tổ hợp pET32a(+) mang gen gp120B_EX • ĐC1: Thang DNA chuẩn 1 kb.• ĐC 1: Plasmid gốc • ĐC2-6: Các dòng plasmid 3, 4, 8, 10, 12 cắt bằng BamH I và Xho I vector pET32a(+) • ĐC7: Đối chứng (đoạn gen• gp120B_EX) Tinh sạch DNA plasmidĐC1-3: Tương ứng với dòng plasmid tái tổ hợp số 4, 10, 12Gen gp120B_EX trong vector biểu hiện pET32a(+) đã được giải trình tựKiểm tra khung đọc của gen gp120B trong vector pET32a(+)Biểu hiện gen gp120B trong vi khuẩn E.coli chủng BL21 StarTM (DE3) ĐC 1: Thang Protein chuẩn ĐC 2,4: Mẫu không cảm ứng ĐC 3,5: Mẫu cảm ứng bằng IPTG 1mM