Khả năng sử dụng các nguồn Nitơ của vi khuẩn quang hợp phân lập được ở Việt Nam

Bài viết trình bày các kết quả nghiên cứu về khả năng trao đổi Nitơ vô cơ của một số chủng vi khuẩn quang hợp biểu phân lập được ở Việt Nam. Để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khả năng sử dụng các nguồn Nitơ của vi khuẩn quang hợp phân lập được ở Việt Nam 25(3): 98-104 T¹p chÝ Sinh häc 9-2003 kh¶ n¨ng sö dông c¸c nguån nit¬ v« c¬ cña vi khuÈn quang hîp ph©n lËp ®−îc ë ViÖt nam §ç ThÞ Tè Uyªn, TrÇn V¨n NhÞ, NguyÔn Ngäc Dòng ViÖn C«ng nghÖ sinh häc Diethelm Kleiner Tr−êng ®¹i häc Tæng hîp Bayreuth, CHLB §øc Gièng nh− nhiÒu lo¹i vi khuÈn kh¸c, vi acidophila 24 vµ Rhodobacter capsulatus SL1 khuÈn quang hîp (VKQH) th−êng sö dông nhËn tõ Tr−êng ®¹i häc Thanh §¶o (S¬n §«ng, am«n lµm nguån nit¬ cho sinh tr−ëng vµ mét sè Trung Quèc). Chóng ®−îc nu«i trong m«i loµi cã kh¶ n¨ng sö dông nitrat lµm nguån N tr−êng AT [7] láng hay th¹ch d−íi ¸nh s¸ng ®Ìn [1]. RÊt nhiÒu loµi thuéc nhãm vi khuÈn tÝa sîi ®èt ë nhiÖt ®é 28o-32oC vµ khÝ quyÓn nit¬. kh«ng l−u huúnh cã kh¶ n¨ng cè ®Þnh nit¬ ph©n Sù sinh tr−ëng cña c¸c chñngVKQH ®−îc tö [2]. C¸c nguån nit¬ ®−îc hÊp thô vµo trong tÕ quan s¸t trªn ®Üa th¹ch hay ®¸nh gi¸ b»ng mËt bµo b»ng nhiÒu con ®−êng kh¸c nhau tïy thuéc ®é quang häc dÞch nu«i trªn m¸y quang phæ t¹i hÖ thèng enzym cña tõng loµi vµ sù ®iÒu chØnh b−íc sãng 660 nm. ho¹t ®éng cña c¸c enzym nµy tïy thuéc vµo sù c©n b»ng NH4+ gi÷a bªn trong vµ bªn ngoµi cña Hµm l−îng am«n (NH4+) ®−îc x¸c ®Þnh theo tÕ bµo [3]. Sù ®ång hãa NH4+ x¶y ra trong tÕ bµo ph−¬ng ph¸p microbiuret [8]. nhê hÖ thèng enzym phô thuéc n¨ng l−îng khö Ho¹t ®éng cña hÖ thèng vËn chuyÓn am«n glutamin synthetaza/glutamat synthaza (GS/ (NH4+-transport system) ®−îc ®¸nh gi¸ theo hÊp GOGAT) khi nång ®é am«n trong m«i tr−êng thô 14C-methylamin. Hµm l−îng 14C-methylamin thÊp, cßn khi trong m«i tr−êng d− thõa am«n th× ®−îc x¸c ®Þnh b»ng ph−¬ng ph¸p ®Õm ®ång vÞ enzym glutamat dehydrogenaza (GluDH) ®−îc phãng x¹ theo nguyªn lý nhÊp nh¸y láng [9]. tæng hîp ®Ó thay thÕ hay bæ sung cho hÖ thèng Kh¶ n¨ng cè ®Þnh nit¬ ph©n tö ®−îc x¸c trªn [3]. ®Þnh qua kh¶ n¨ng khö axªtylen thµnh ªtylen. Trong nh÷ng n¨m g©n ®©y, ë n−íc ta VKQH L−îng ªtylen t¹o ra ®−îc x¸c ®Þnh b»ng ph−¬ng ®` ®−îc ph©n lËp vµ nghiªn cøu trong c¸c ph¸p s¾c ký khÝ theo nguyªn lý ion hãa ngän löa ch−¬ng tr×nh nghiªn cøu c¬ b¶n vÒ ®a d¹ng sinh [10]. häc vµ ®Þnh h−íng cho viÖc øng dông chóng [4, Enzym ®−îc t¸ch ra khái tÕ bµo nhê thiÕt bÞ 5, 6]. ph¸ mÉu French Pressure (ViÖn Vi sinh vËt häc, Trong bµi b¸o nµy, chóng t«i tr×nh bµy c¸c Tr−êng ®¹i häc Tæng hîp Bayreuth, CHLB §øc) kÕt qu¶ nghiªn cøu vÒ kh¶ n¨ng trao ®æi nit¬ v« ë ¸p suÊt 16000psi vµ ly t©m ë 13000 v/phót ®Ó c¬ cña mét sè chñng VKQH tiªu biÓu ph©n lËp lo¹i x¸c tÕ bµo. ®−îc. Ho¹t tÝnh cña enzym glutamat synthaza i. ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu GOGAT (EC.2.6.1.53) vµ glutamat dehydro- genaza GluDH (EC1.4.1.3) ®−îc ®¸nh gi¸ theo §èi t−îng nghiªn cøu lµ 10 chñngVKQH tèc ®é oxy hãa NADPH (hoÆc NADH) thµnh ®−îc ph©n lËp tõ c¸c thñy vùc tÝch lòy n−íc th¶i NADP (hoÆc NAD). Hµm l−îng NADPH (hoÆc giµu h÷u c¬ vµ nit¬ liªn kÕt, 2 chñng VKQH cã NADH) ®−îc x¸c ®Þnh theo mËt ®é quang häc ë nguån gèc tõ n−íc biÓn lµ Rhodopseudomonas 340 nm [11]. C«ng tr×nh ®−îc hç trî kinh phÝ cña Ch−¬ng tr×nh nghiªn cøu c¬ b¶n. 98  Ho¹t tÝnh sinh tæng hîp glutamin synthetaza Kh¶ n¨ng nµy ë nhiÒu loµi vi khuÈn tÝa kh«ng GS (EC 6.3.1.2) ®−îc ®¸nh gi¸ th«ng qua ph¶n l−u huúnh còng ®` ®−îc ®Ò cËp tíi trong nhiÒu øng t¹o ra γ-glutamylhydroxamat. Hµm l−îng γ- c«ng tr×nh c«ng bè tr−íc ®©y[1, 13]. glutamylhydroxamat ®−îc x¸c ®Þnh theo hÊp thô KÕt qu¶ cßn cho thÊy tÊt c¶ c¸c chñng ®Òu ¸nh s¸ng t¹i b−íc sãng 500 nm cña phøc hîp cã thÓ sinh tr−ëng ®−îc trªn m«i tr−êng cã bæ mµu ®á(®−îc t¹o thµnh khi kÕt hîp víi ion Fe - sung thªm NO3-. Theo khãa ph©n lo¹i cña III). Ph−¬ng ph¸p x¸c ®Þnh nµy dùa theo ph−¬ng Bergey [1], cã mét sè chñng thuéc c¸c loµi ph¸p cña Shaprio vµ Stadtman [11] cã c¶i biªn. Rhodobacter capsulatus, R. sphaeroides vµ R. Hµm l−îng protein ®−îc x¸c ®Þnh theo Veldkampii cã kh¶ n¨ng ®ång hãa ®−îc nitrat. ph−¬ng ph¸p Lowry [12]. Sù sinh tr−ëng cña c¸c chñng VKQH mµ chóng t«i quan s¸t ®−îc còng c ...