Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết vỏ xoài Mangifera indica L. đối với chủng vi khuẩn gây sâu răng Streptococcus mutans

Bài viết Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết vỏ xoài Mangifera indica L. đối với chủng vi khuẩn gây sâu răng Streptococcus mutans khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất nhằm tìm ra điều kiện chiết cao vỏ xoài (Mangifera indica L.) tối ưu và thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết dược liệu đối với chủng vi khuẩn gây sâu răng Streptococcus mutans.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết vỏ xoài Mangifera indica L. đối với chủng vi khuẩn gây sâu răng Streptococcus mutans KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CAO CHIẾT VỎ XOÀI Mangifera indica L. ĐỐI VỚI CHỦNG VI KHUẨN GÂY SÂU RĂNG Streptococcus mutans Tô Ngọc Mỹ Di, Đào Thị Tuyết Ngân, Trần Thị Diễm Trinh, Phạm Thị Thảo Trâm và Phạm Thùy Hương Khoa Dược, Trường Đại học Công nghệ TP. Hồ Chí Minh GVHD: ThS. Chu Thị Bích Phượng, CN. Nguyễn Thị Thanh Tâm TÓM TẮT Mục tiêu: Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất nhằm tìm ra điều kiện chiết cao vỏ xoài (Mangifera indica L.) tối ưu và thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết dược liệu đối với chủng vi khuẩn gây sâu răng Streptococcus mutans. Phương pháp nghiên cứu: Thu cao chiết: Sử dụng phương pháp chiết xuất có hỗ trợ của sóng siêu âm. Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn: Sử dụng phương pháp khuếch tán giếng thạch. Kết quả: Hiệu suất chiết xuất cao nhất được xác định là 28,14% với điều kiện cụ thể bao gồm sử dụng bột vỏ xoài kích thước 1-3mm với dung môi ethanol 80% ở tỷ lệ bột: dung môi 1:25 bằng phương pháp chiết xuất có hỗ trợ của sóng siêu âm trong 1 giờ. Cao chiết thu được thể hiện khả năng kháng khuẩn trên chủng vi khuẩn gây sâu răng S. mutans. Kết luận: Cao chiết vỏ xoài có tiềm năng trong việc sử dụng để điều trị và phòng ngừa bệnh sâu răng. Từ khóa: chiết xuất dược liệu, khuếch tán giếng thạch, MIC, Streptococcus mutans, vỏ xoài. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Sâu răng được xem như một trong những bệnh phổ biến và tốn kém về mặt chi phí chữa trị. “Nghiên cứu Gánh nặng Bệnh tật Toàn cầu 2017” thống kê bệnh răng miệng làm ảnh hưởng đến 3.5 tỷ người trên thế giới [1]. Tại Việt Nam, Bệnh viện Răng – Hàm – Mặt ghi nhận vào năm 2019 có hơn 90% dân số có bệnh về răng miệng. Nguyên nhân sâu răng chủ yếu thường xoay quanh chế độ ăn giàu carbohydrate, vệ sinh răng miệng không sạch sẽ và sự tồn tại của Streptococcus mutans [2]. S.mutans gây bệnh thông qua sự chuyển hóa liên tục sucrose thành các polymer ngoại bào tạo nên hình màng sinh học song song với sự sản xuất acid lactic tạo môi trường pH thấp kéo dài dẫn đến sự khử khoáng men răng [3]. Đã có rất nhiều bài thuốc dân gian được sử dụng để chữa trị tình trạng sâu răng như xương khô, tất bạt, xương 821 rồng..., trong đó có vỏ xoài. Tuy nhiên, vỏ xoài chỉ là phế phẩm sau chế biến và trở thành một nguồn gây ô nhiễm môi trường mặc dù rất giàu các thành phần dinh dưỡng như vitamin C, E và các hợp chất tự nhiên, đặc biệt là mangiferin – một polyphenol có hoạt tính sinh học cao [4]. ... Tại Việt Nam, việc nghiên cứu và ứng dụng tiềm năng của vỏ xoài vào nhiều lĩnh vực vẫn còn hạn chế. Nhìn nhận được vấn đề đó, chúng tôi thực hiện đề tài nghiên cứu “Khảo sát khả năng kháng khuẩn của cao chiết vỏ xoài Mangifera indica L. lên chủng vi khuẩn gây sâu răng Streptococcus mutans” nhằm đánh giá tiềm năng kháng khuẩn của cao chiết dược liệu này trong điều trị tình trạng sâu răng. 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Xoài thu nhận từ chợ địa phương được tách lấy phần vỏ, độ dày 1mm. Vỏ xoài được sấy khô ở nhiệt độ 50oC đến khối lượng không đổi và xay đến hai loại kích thước: bé hơn 1mm và 1mm-3mm qua hệ thống rây 2mm- 1.5mm-1mm. Bảo quản ở 4oC trong túi PE kín khí. Chủng vi sinh vật thử nghiệm: Streptococcus mutans được phân lập bởi Bộ môn Vi sinh – Kí sinh, khoa Dược – trường Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Phương pháp nghiên cứu Chiết xuất dược liệu Chiết xuất cao vỏ xoài với dung môi là Ethanol bằng phương pháp chiết xuất có hỗ trợ của sóng siêu âm (35Hz, biên độ 100%) ở nhiệt độ 45oC trong một giờ, lọc qua giấy lọc Whatman số 1, cô quay thu cao chiết bằng máy cô quay chân không ở 45oC. Bảo quản cao thu được trong tủ lạnh. Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến chiết xuất cao vỏ xoài Đánh giá các thông số kích thước bột dược liệu, tỷ lệ bột: dung môi, nồng độ dung môi để ghi nhận điều kiện chiết xuất tối ưu. Cao chiết được đánh giá hiệu suất khi khối lượng giữa ít nhất hai lần cân không đổi. Hiệu ????????−???????? suất chiết của từng điều kiện tính toán theo công thức: ???? = ????????ộ???? ????ượ???? ????????ệ???? x 100 (%) Trong đó: m1: khối lượng chén sứ (g) m2: khối lượng chén sứ và cao (g) Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết vỏ xoài đối với vi khuẩn Streptococcus mutans Phương pháp: khuếch tán giếng thạch của Đỗ Trung Đàm [5] và hướng dẫn của Viện Tiêu chuẩn Lâm Sàng và Xét Nghiệm (CLSI) [10] Hoạt hóa vi khuẩn: vi khuẩn tăng sinh 24 giờ trong môi trường BHI lỏng, pha loãng huyền phù 10 lần và tiến hành đo độ đục bằng máy đo quang phổ UV-Vis (Hitachi U-3900) ở bước sóng 600nm. OD từ 0,8-1 tương đương 108 CFU/ml. 822 Pha loãng cao: Cao chiết vỏ xoài chiết bằng Ethanol ở các nồng độ khác nhau pha loãng với DMSO 2% vô trùng thành các nồng độ 300, 200, 100mg/ml. Đối chứng âm sử dụng DMSO 2%. Đối chứng dương sử dụng Amoxicillin nồng độ 100µg/ml. Thử hoạt tính kháng khuẩn: Cho 30µl cao đã pha loãng vào giếng. Mẫu được ủ 30 phút ở nhiệt độ phòng để dịch chiết khuếch tán vào giếng thạch và tiếp tục ủ kỵ khí 24 giờ ở 37oC. Mỗi nghiệm pháp lặp lại ba lần, khả năng kháng khuẩn được xác định bằng đường kính vòng kháng khuẩn tính theo công thức: ĐK (mm) = D – d. Trong đó: ĐK (mm): đường kính vòng vô khuẩn D (mm): đường kính vòng sáng quanh giếng thạch D (mm): đường kính giếng thạch – 6mm 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất Bảng 3. Hiệu suất thu nhận cao chiết với các thô ...