Luận án tiến sĩ Y học: Nghiên cứu các dạng đột biến gen gây bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thiếu 21- Hydroxylase

Mục đích nghiên cứu của luận án "Nghiên cứu các dạng đột biến gen gây bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thiếu 21- Hydroxylase" nhằm Phát hiện các đột biến của gen CYP21A2 và mô tả bản đồ đột biến gen CYP21A2 ở các bệnh nhân mắc TSTTBS thể thiếu 21-OH.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận án tiến sĩ Y học: Nghiên cứu các dạng đột biến gen gây bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thiếu 21- Hydroxylase LỜI CAM ĐOANTôi là Vũ Chí Dũng, nghiên cứu sinh khóa 29 Trường Đại học Y Hà Nội,chuyên ngành Nhi, xin cam đoan: 1. Đây là luận án do bản thân tôi trực tiếp thực hiện dưới sự hướng dẫn của các Thầy: Giáo sư. Tiến sĩ. Tạ Thành Văn Giáo sư. Tiến sĩ. Nguyễn Thanh Liêm 2. Công trình này không trùng lặp với bất kỳ nghiên cứu nào khác đã được công bố tại Việt Nam. 3. Các số liệu và thông tin nghiên cứu là hoàn toàn chính xác, trung thực và khách quan, đã được xác nhận và chấp thuận của cơ sở nơi nghiên cứu.Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước pháp luật về những cam kết này. Hà nội, ngày 25/3/2017 Vũ Chí Dũng MỤC LỤCLỜI CẢM ƠNLỜI CAM ĐOANMỤC LỤCDANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮTDANH MỤC BẢNG, HÌNH VÀ BIỂU ĐỒĐẶT VẤN ĐỀ .................................................................................................. 1Chương 1 TỔNG QUAN ................................................................................ 4 1.1. Lịch sử mô tả bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh ............................... 4 1.2. Định nghĩa, cơ sở hóa sinh, sinh lý bệnh học của tăng sản thượng thận bẩm sinh thiếu 21-OH .................................................................................... 5 1.2.1. Định nghĩa TSTTBS và các enzym tham gia tổng hợp cortisol ...... 5 1.2.2. Cơ sở hóa sinh của TSTTBS ............................................................ 5 1.2.3. Sinh lý bệnh của TSTTBS do thiếu 21-OH ..................................... 7 1.3. Kiểu hình lâm sàng và tỷ lệ mới mắc của TSTTBS do thiếu 21-OH ... 11 1.3.1. Kiểu hình lâm sàng của TSTTBS do thiếu 21-OH ........................ 11 1.3.2. Tỷ lệ mới mắc của thiếu 21-OH ..................................................... 14 1.4. Cơ sở di truyền phân tử của bệnh TSTTBS do thiếu 21-OH ............... 15 1.4.1. Gen CYP21A2 và cấu trúc RCCX (RP-C4-CYP21-TNX) ............ 15 1.4.2. Lịch sử nghiên cứu về di truyền phân tử của bệnh TSTTBS trên thế giới ............................................................................................................ 16 1.5. Các đột biến của gen CYP21A2 gây thiếu 21-OH ................................ 19 1.5.1. Các đột biến xóa đoạn và hoán vị lớn của gen............................... 21 1.5.2. Các đột biến vô nghĩa và đột biến gây lệch khung dịch mã (nonsense và frameshift mutations) ......................................................... 23 1.5.3. Các đột biến điểm phổ biến khác ................................................... 24 1.5.4. Các đột biến hiếm gặp .................................................................... 26 1.6. Các tiến bộ kỹ thuật của phân tích phân tử phát hiện các đột biến gen CYP21A2 ...................................................................................................... 26 1.6.1. Phân tích các đột biến xóa đoạn và hoán vị lớn của gen ............... 26 1.6.2. Các tiến bộ về phát hiện các đột biến điểm và các biến đổi nhỏ phổ biến và hiếm gặp của gen CYP21A2 ........................................................ 29 1.7. Nghiên cứu về vai trò của phân tích đột biến gen CYP21A2 ............... 32 1.7.1. Dự báo kiểu hình ............................................................................ 32 1.7.2. Tính phức tạp của tư vấn di truyền đối với thiếu 21-OH ............... 35 1.7.3. Vai trò của di truyền phân tử đối với chương trình sàng lọc sơ sinh TSTTBS.................................................................................................... 36 1.7.4. Chẩn đoán và điều trị trước sinh ở những gia đình có nguy cơ cao thiếu 21-OH .............................................................................................. 37 1.8. Nghiên cứu về di truyền phân tử trên các bệnh nhân TSTTBS ở Việt Nam .............................................................................................................. 39Chương 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .............. 41 2.1. Đối tượng nghiên cứu ........................................................................... 41 2.1.1. Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân............................................................ 41 2.1.2. Tiêu chuẩn loại trừ ......................................................................... 41 2.2. Trang thiết bị, dụng cụ và hóa chất sử dụng cho phát hiện đột biến gen CYP21A2 ...................................................................................................... 42 2.2.1. Trang thiết bị nghiên cứu ............................................................... 42 2.2.2. Dụng cụ nghiên cứu ....................................................................... 42 2.2.3. Hóa chất nghiên cứu ....................................................................... 42 2.3. Phương pháp nghiên cứu ...................................................................... 43 2.3.1. Thu thập và tách chiết mẫu nghiên cứu ......................................... 45 2.3.2. Xác định đột biến gen CYP21A2 .................................................... 47 2.3.3. Nhận định và đánh giá các đột biến của gen CYP21A2 ................. 53 2.3.4. Đánh giá kiểu hình của các bệnh nhân và mối tương quan giữa kiểu gen - kiểu hình ......................................................................................... 54 2.3.5. Xử lý số liệu thống kê .................................................................... 57 2.4. Đạo đức trong nghiên cứu ........................................................ ...