Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Hoạt tính của protease kim loại (MMP 2, MMP-9) ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng trước và sau phẫu thuật

Mục đích nghiên cứu của luận văn nhằm đánh giá hoạt tính và mức độ biểu hiện hoạt tính của MMP-2, MMP-9 trong mô và huyết tương của bệnh nhân ung thư đại trực tràng trước và sau phẫu thuật. Đánh giá mối liên quan giữa hoạt độ của MMP-2 và MMP-9 với một số đặc điểm bệnh học của bệnh nhân ung thư đại trực tràng.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Hoạt tính của protease kim loại (MMP 2, MMP-9) ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng trước và sau phẫu thuậtĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN---------------------Hoàng Ngọc AnhHOẠT TÍNH CỦA PROTEASE KIM LOẠI (MMP-2, MMP-9)Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ ĐẠI TRỰC TRÀNGTRƯỚC VÀ SAU PHẪU THUẬTLUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌCHà Nội – 2017ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN---------------------Hoàng Ngọc AnhHOẠT TÍNH CỦA PROTEASE KIM LOẠI (MMP-2, MMP-9)Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ ĐẠI TRỰC TRÀNGTRƯỚC VÀ SAU PHẪU THUẬTChuyên ngành: Sinh học Thực nghiệmMã số: 60420114LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌCNGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Trịnh Hồng TháiTS Đỗ Minh HàHà Nội – 2017LỜI CẢM ƠNTôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc nhất tới PGS.TS. Trịnh Hồng Thái, ngườithầy đã luôn quan tâm, tận tình chỉ bảo, hướng dẫn tôi trong suốt quá trình học tập,thực hiện và hoàn thành luận văn này.Tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn với những ý kiến đóng góp quý báu của TS.Đỗ Minh Hà trong suốt quá trình tôi thực hiện và hoàn thành luận văn.Trong quá trình học tập, làm việc và thực hiện luận văn, tôi đã nhận được sựgiúp đỡ rất nhiều của ThS. Phạm Thị Bích, ThS. Nguyễn Thị Tú Linh, ThS. Lê LanPhương và các bạn sinh viên làm việc tại Phòng Proteomics và Sinh học Cấu trúcthuộc Phòng thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ Enzyme và Protein, Trường Đạihọc Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội.Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới ThS. BS. Phạm Mạnh Cường cùng Khoa Tếbào và Giải phẫu bệnh, Bệnh viện Quân y 103 và đồng cảm ơn tới Khoa Xét nghiệmvà Sàng lọc máu Viện Huyết học -Truyền máu Trung ương vì đã cung cấp mẫunhững mẫu bệnh phẩm và đối chứng quý giá trong quá trình thực hiện luận văn.Tôi cũng xin bày tỏ lòng cảm ơn tới Phòng thí nghiệm Trọng điểm Côngnghệ Enzym và Protein, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên đã tạo điều kiện giúpđỡ tôi về trong suốt quá trình làm luận văn này.Cuối cùng, tôi vô cùng biết ơn gia đình và bạn bè đã khích lệ, động viên vàluôn bên tôi trong suốt thời gian qua.Hà Nội, tháng 02 năm 2017Học viênHoàng Ngọc AnhMỤC LỤCBẢNG KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT ........................................................... iDANH MỤC CÁC BẢNG......................................................................................... iiMỞ ĐẦU .....................................................................................................................1Chương 1 -TỔNG QUAN .....................................................................................31.1.Khái quát về ung thư đại trực tràng .................................................31.1.1. Ung thư đại trực tràng .................................................................31.1.2. Nguyên nhân gây ung thư đại trực tràng và các yếu tố nguy cơ.41.1.3. Phân loại ung thư đại trực tràng ..................................................61.1.4. Ảnh hưởng sau phẫu thuật...............................................................91.2.Tổng quan về các MMP ...................................................................91.2.1. Matrix Metalloproteinases ..........................................................91.2.2. Sự hoạt hóa dạng tiền hoạt động (pro-MMP) ...........................121.2.3. Vai trò của họ Matrix Metalloproteinase ..................................131.3.Chương 2 -Tình hình nghiên cứu MMP trong ung thư đại trực tràng .............16NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP ............................................212.1.Nguyên liệu ....................................................................................212.1.1. Đối tượng nghiên cứu ...............................................................212.1.2. Thiết bị ......................................................................................212.1.3. Hóa chất ....................................................................................212.2.Phương pháp ..................................................................................222.2.1. Tách chiết protein tổng số từ mẫu mô ......................................232.2.2. Xác định hàm lượng protein theo phương pháp Bradford ........242.2.3. Điện di xác định hoạt tính enzyme MMP trên gelpolyacrylamide .................................................................................................252.2.4. Phân tích hình ảnh bản gel điện di bằng phần mềm Image J ....272.2.5. Phân tích, đánh giá kết quả .......................................................28Chương 3 -KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .............................................................293.1. Xác định hoạt tính enzyme trên gel polyacrylamide có SDS có bổsung cơ chất gelatin ..............................................................................................293.2.Hoạt độ của MMP-2 và MMP-9 trong các mẫu mô và huyết tươngcủa bệnh nhân ung thư đại trực tràng....................................................................333.2.1. Hoạt độ của MMP-2 và MMP-9 theo vị trí mô ........................333.2.2. Hoạt độ của MMP-2 và MMP-9 trong huyết tương .................363.3. Hoạt độ của MMP-2 và MMP-9 theo một số đặc điểm bệnh họccủa bệnh nhân ung thư đại trực tràng....................................................................40KẾT LUẬN ...............................................................................................................46KIẾN NGHỊ ..............................................................................................................47TÀI LIỆU THAM KHẢO .........................................................................................48PHỤ LỤC .................................................................................................................... i ...