Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xây dựng phương pháp định tính, định lượng flavonoid trong nụ và lá vối

Nội dung chính của đề tài là phân lập được một flavonoid chính trong nụ vối dùng làm chất đối chiếu trong việc định tính, định lượng flavonoid. Xây dựng được quy trình định tính và định lượng flavonoid trong dược liệu nụ và lá vối. Mời các bạn cùng tham khảo!
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xây dựng phương pháp định tính, định lượng flavonoid trong nụ và lá vối ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN -------------------------------- NGUYỄN QUỐC TUẤNXÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG FLAVONOID TRONG NỤ VÀ LÁ VỐI LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC Hà Nội – 2012 1 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN -------------------------------- NGUYỄN QUỐC TUẤNXÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƢỢNG FLAVONOID TRONG NỤ VÀ LÁ VỐI Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 60 44 29 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC CÁN BỘ HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. PHƢƠNG THIỆN THƢƠNG Hà Nội – 2012 2 Mục lục TrangMỞ ĐẦU………………………….……….……………...…………………….…1CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN…………..…………….……………………….…..3 1.1 Tổng quan cây vối………………………….….……………………………..3 1.1.1 Tên gọi ……………………………..……………………………………3 1.1.2 Đặc điểm thực vật………………………………………………..………3 1.1.3 Phân bố, sinh thái………………………………………………….……..3 1.1.4 Thu hái và chế biến…………………………………………...………….4 1.1.5 Thành phần hóa học……………………………………………..……….5 1.1.6 Flavonoid trong cây vối………………………………………………….7 1.1.7 Tác dụng sinh học………………………………...…………………….13 1.1.8 Ứng dụng…………………………………………...…………………..16 1.2 Các phương pháp định tính, định lượng flavonoid ……………………...…17 1.2.1 Phương pháp định tính………………………………………….………17 1.2.2 Phương pháp định lượng……………………………….……………….20CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU………………………………………………………………………………26 2.1 Đối tượng nghiên cứu……………………………………...……………….26 2.2 Nội dung nghiên cứu …………………………………………..…………..27 2.3 Phương pháp nghiên cứu……………………………………..…………….27 2.3.1 Chiết xuất, phân lập flavonoid chính………….………………………..27 2.3.2 Xác định cấu trúc chất phân lập………………………………….……..28 2.4 Xây dựng phương pháp định tính trong nụ và lá vối…………………...…..28 2.4.1 Định tính bằng phương pháp hóa học…………………….…………….28 3 2.4.2 Định tính bằng phương pháp sắc ký………………………..…………..28 2.5 Xây dựng phương pháp định lượng flavonoid trong nụ và lá vối…….…….30 2.5.1 Định lượng flavonoid toàn phần bằng phương pháp trắc quang…….…30 2.5.2 Định lượng flavonoid chính bằng phương pháp HPLC……….…..........30 2.6 Một số đặc trưng thống kê để xử lý và đánh giá kết quả……...……………31 2.7 Thiết bị, dụng cụ và hóa chất, dung môi……………………………………32 2.7.1 Thiết bị, dụng cụ………………………………………………………..32 2.7.2 Hóa chất, dung môi……………………………………………………..32CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN…………………………………...33 3.1 Chiết xuất và phân lập một flavonoid chính từ nụ cây vối………………....33 3.1.1 Chiết xuất dược liệu và phân đoạn…..………………………………….33 3.1.2 Phân lập flavonoid chính trong cao phân đoạn ethyl acetat…………….34 3.1.3 Xác định cấu trúc chất phân lập………………...………………………37 3.2 Xây dựng phương pháp định tính flavonoid trong lá và nụ vối……...……..41 3.2.1 Định tính bằng phản ứng hóa học………………………...…………….41 3.2.2 Định tính bằng TLC………………………………………...…………..42 3.2.3 Định tính bằng HPLC……………………………………………..……46 3.3 Xây dựng phương pháp định lượng flavonoid trong lá và nụ vối…………..48 3.3.1 Xây dựng bằng phương pháp trắc quang………………...……………..48 3.3.2 Xây dựng phương pháp định lượng CO-1 bằng HPLC………...………61KẾT LUẬN……………………………….…………………………………...…74TÀI LIỆU THAM KHẢO……………………………………………………....76PHỤ LỤC 4 DANH MỤC CÁC BẢNGBảng 1.1. Các thành phần chính trong tinh dầu vối ………………………... 6Bảng 1.2. Thành phần flavonoid trong nụ vối………………………………. 8Bảng 1.3. Một số hệ dung môi khai triển để phân tích flavonoid bằng TLC.. 19Bảng 2.1. Bảng chi tiết mẫu nụ và lá vối……………………………………. 26Bảng 3.1. Kết quả định tính sơ bộ flavonoid ở cao H và cao E…………….. 35Bảng 3.2. Số liệu phổ 1H-NMR và 13C-NMR của hợp chất CO-1………… 40Bảng 3.3. Kết quả SKLM cao phân đoạn ETOAC…………………………. 46Bảng 3.4. Kết quả độ lặp lại của phương pháp trắc quang………………….. 49Bảng 3.5. Kết quả xây dựng đường chuẩn theo chất đối chiếu CO-1………. 50Bảng 3.6. Kết quả xây dựng đường chuẩn theo chất Catechin……………… 51Bảng 3.7. Kết quả xác định độ lệch chuẩn của mẫu trắng……………........... 52Bảng 3.8. Kết quả xác định nồng độ giới hạn LOL của chất chuẩn CO-1….. 53Bảng 3.9. Kết quả xác định nồng độ giới hạn LOL của chất Catechin……... 53Bảng 3.10. Kết quả xác định độ đúng của phương pháp…………………..... 54Bảng 3.11A. Kết quả đánh giá độ ổn định của phương pháp theo cách 1….. 55Bảng 3.11B. Kết q ...