Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nghiên cứu tạo chế phẩm kháng thể đa dòng IgY nhận biết đặc hiệu kháng nguyên nang F1 của vi khuẩn dịch hạch Yersinia pestis và ứng dụng tạo que thử phát hiện nhanh

Luận văn được thực hiện với mục tiêu nhằm tối ưu hóa qui trình gây đáp ứng miễn dịch với kháng nguyên nang F1 ở gà, tinh sạch kháng thể đa dòng IgY, nghiên cứu thăm dò khả năng sản sản xuất kháng thể đơn dòng IgG có ái lực cao với kháng nguyên F1, ứng dụng các chế phẩm kháng thể trong sản xuất que thử miễn dịch phát hiện nhanh kháng nguyên F1. Mời các bạn cùng tham khảo.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nghiên cứu tạo chế phẩm kháng thể đa dòng IgY nhận biết đặc hiệu kháng nguyên nang F1 của vi khuẩn dịch hạch Yersinia pestis và ứng dụng tạo que thử phát hiện nhanhBỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KH&CN VN VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT MAI THỊ THU NGHIÊN CỨU TẠO CHẾ PHẨM KHÁNG THỂ ĐADÒNG IgY NHẬN BIẾT ĐẶC HIỆU KHÁNG NGUYÊN NANG F1 CỦA VI KHUẨN DỊCH HẠCH YERSINIA PESTIS VÀ ỨNG DỤNG TẠO QUE THỬ PHÁT HIỆN NHANH LUẬN VĂN THẠC SỸ SINH HỌC Hà Nội, 11/2017 2 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu là do tôi tự thực hiện. Tất cả các số liệu, kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận vănlà hoàn toàn trung thực, chưa được bất kỳ tác giả nào công bố trước đây. Nếu lời cam đoan không đúng sự thật tôi xin chịu hoàn toàn tráchnhiệm. Tác giả Mai Thị Thu 3 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, tôi xin chân thành cảm ơn TS. Lê Quang Hòa, trưởng phòng Kỹthuật Gen, Viện Công nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học BáchKhoa Hà Nội người thầy đã luôn hướng dẫn, giúp đỡ tôi thực hiện luận văn này. Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy, cô giáo Viện Sinh thái và Tài nguyênsinh vật/Viện hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, đã dạy dỗ, giúp đỡ tôi trongsuốt quá trình học tập. Tôi xin chân thành cảm ơn các cấp Thủ trưởng và cán bộ phòng Sinh học,Viện Hóa học - Môi trường Quân sự nơi tôi công tác, đặc biệt là đồng chí NguyễnPhượng Minh, chủ nhiệm đề tài:“Nghiên cứu chế tạo test phát hiện nhanh vikhuẩn dịch hạch Yersinia pestis” đã cung cấp kinh phí, tạo mọi điều kiện để tôihoàn thành luận văn của mình. Cuối cùng tôi xin cảm ơn bạn bè và gia đình, những người đã luôn ủng hộtôi trong suốt thời gian qua! Hà Nội, ngày 30 tháng 10 năm 2017 Học viên Mai Thị Thu 4 MỤC LỤCDANH MỤC BẢNG BIỂU, ĐỒ THỊ ......................................................................7DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT......................................................................9LỜI MỞ ĐẦU .........................................................................................................10CHƯƠNGI: TỔNG QUAN ...................................................................................12I. Bệnh dịch hạch và nguyên nhân gây bệnh dịch hạch ...........................................12I.1. Bệnh dịch hạch...................................................................................................12I.2. Tình hình dịch hạch trên thế giới và Việt Nam .................................................13I.2.1. Tình hình dịch hạch trên thế giới ....................................................................13I.2.2. Tình hình dịch hạch tại Việt Nam...................................................................14I.3. Biểu hiện của bệnh dịch hạch ............................................................................16I.3.1. Dịch hạch thể hạch .......................................................................................... 16I.3.2. Dịch hạch thể nhiễm trùng huyết ....................................................................18I.3.3. Dịch hạch thể phổi .......................................................................................... 19I.4. Cơ chế lây lan bệnh dịch hạch và vi khuẩn Y. pestis .........................................20I.4.1. Cơ chế lây truyền bệnh dịch hạch ...................................................................20I.4.2. Vi khuẩn gây bệnh dịch hạch Y. pestis .......................................................... 22I.5. Kháng nguyên nang F1 ......................................................................................24I.5.1. Cấu trúc kháng nguyên nang F1 ....................................................................24I.5.2. Tính chất của kháng nguyên nang F1 ............................................................. 25I.6. Các phương pháp phân tích chẩn đoán kháng nguyên nang F1 của vi khuẩnY.pestis......................................................................................................................25I.6.1. Phương pháp miễn dịch .................................................................................25I.6.2. Phương pháp sinh học phân tử........................................................................30I.7. Sản xuất kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng........................................................... 31I.7.1. Định nghĩa IgY ............................................................................................... 31I.7.2. Sự hình thành kháng thể IgY ở gà ..................................................................31I.7.3. Cấu trúc của kháng thể IgY ............................................................................32 5I.8. Sản xuất kháng thể đơn dòng từ chuột thuần chủng BALB/c ........................... 33I.8.1. Khái niệm, ứng dụng của kháng thể đơn dòng ..............................................33I.8.2. Công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng .......................................................34CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .....................37II.1. Vật liệu nghiên cứu........................................................................................... 3 ...