Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nhân dòng và biểu hiện gen mã hóa protein OmpL1 của chủng Leptospira spp. trong Escherichia coli

Mục tiêu của đề tài là tách dòng và biểu hiện thành công protein tái tổ hợp OmpL1 của 5 chủng vi khuẩn Leptospira, làm tiền đề cho chế tạo vắc xin tái tổ hợp phòng bệnh Leptospirosis tại Việt Nam. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nhân dòng và biểu hiện gen mã hóa protein OmpL1 của chủng Leptospira spp. trong Escherichia coli BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ----------------------------- Nguyễn Văn HuyNHÂN DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA PROTEIN OmpL1 CỦA CHỦNG Leptospira spp. TRONG Escherichia coli LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM Hà Nội - 2021 BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ----------------------------- Nguyễn Văn HuyNHÂN DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA PROTEIN OmpL1 CỦA CHỦNG Leptospira spp. TRONG Escherichia coli Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THỰC NGHIỆM NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS. Nghiêm Ngọc Minh Hà Nội - 2021 i Lời cam đoan Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi và nhóm nghiêncứu, các số liệu, kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưacó ai công bố trong một công trình nào khác. Hà nội, ngày tháng năm 2021 Tác giả Nguyễn Văn Huy ii Lời cảm ơn Để hoàn thành luận văn này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tớiGS.TS.Nghiêm Ngọc Minh, Viện Nghiên cứu hệ gen, Viện Hàn lâm Khoahọc và Công nghệ Việt Nam đã định hướng nghiên cứu, tận tình hướng dẫn,sửa luận văn và tạo mọi điều kiện hóa chất, thiết bị, cũng như kinh phí để giúptôi thực hiện và hoàn thành luận văn này. Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới tập thể Phòng Hệ gen học vi sinh,Viện Viện Nghiên cứu Hệ gen và đặc biệt là PGS.TS. Võ Thị Bích Thủy đãchỉ bảo, giúp đỡ tận tình cho tôi trong quá trình thực nghiệm cũng như chia sẽnhững kinh nghiệm chuyên môn. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới các thầy cô giáo thuộc khoa Sinh học,các thầy cô giáo của Học viện Khoa học và Công nghệ cùng với Lãnh đạoViện Nghiên cứu hệ gen đã chỉ bảo và tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi học tậpcũng như hoàn thành đề tài nghiên cứu. Cuối cùng, tôi xin dành lời cảm ơn đặc biệt tới gia đình, người thân vàbạn bè đã giúp đỡ, tạo điều kiện, động viên tôi trong suốt thời gian học tập vànghiên cứu. Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà nội, ngày tháng năm 2021 Học viên Nguyễn Văn Huy iii Danh mục các ký hiệu và chữ viết tắt L. interrogans Leptoxspira interrogans L. interrogans Leptospira interrogans L. Bataviae Leptospira interrogans serovar Bataviae L. Canicola Leptospira interrogans serovar Canicola L. Grippotyphosa Leptospira interrogans serovar Grippotyphosa Leptospira interrogans serovarL. Icterohaemorrhagiae Icterohaemorrhagiae L. Pomona Leptospira interrogans serovar Pomona E.coli Escherichia coli LB Môi trường Luria Bertani Polymerase Chain Reaction (phản ứng khuếch đại PCR gen) DNA Deoxyribonucleic acid Amp Ampicillin BSA Bovine Serum Albumins (Huyết thanh bò) TBST Tris-buffered saline với Tween 20 CBB Comassie Brilliant Blue SDS Sodium dodecyl sulfate IPTG Cơ chất Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside APS Ammonium persulphate EDTA Ethylene Diamine Tetraacetace Acid OD Optical density PBS Phosphate buffer saline TEMED N,N,N’,N’-Tetramethylethylenediamine bp Base pair kb Kilobase kDa KiloDalton iv Danh mục các bảngBảng 1.1: Một số hệ biểu hiện phổ biến ......................................................... 19Bảng 2.1: Thành phần phản ứng PCR............................................................. 25Bảng 2.2: Chu trình nhiệt của phản ứng PCR ................................................. 25Bảng 2.3: Trình tự mồi khuếch đại toàn bộ gen ...