Luận văn Thạc sĩ Vi sinh vật học thú y: Xác định tỷ lệ nhiễm Escherichia coli O157: H7 trong thịt bò bán ở một số địa điểm tại Hà Nội, nghiên cứu sản xuất kháng thể đơn đòng đặc hiệu

Mục tiêu của đề tài là xác định được tỷ lệ nhiễm E.coli O157:H7 trong thịt bò bán ở một số địa điểm tại Hà Nội; sản xuất được kháng thể đơn dòng đặc hiệu của vi khuẩn E.coli O157:H7. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Vi sinh vật học thú y: Xác định tỷ lệ nhiễm Escherichia coli O157:H7 trong thịt bò bán ở một số địa điểm tại Hà Nội, nghiên cứu sản xuất kháng thể đơn đòng đặc hiệu ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂMXÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM ESCHERICHIA COLI O157:H7 TRONG THỊTBÒ BÁN Ở MỘT SỐ ĐỊA ĐIỂM TẠI HÀ NỘI, NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG ĐẶC HIỆU PHẠM THỊ TÂM CHUYÊN NGÀNH: VI SINH VẬT HỌC THÚ Y 1 MỞ ĐẦU1. Tính cấp thiết của đề tài Vấn đề vệ sinh an toàn thực phẩm ở Việt Nam đang được Chính phủ vàhầu hết các Ngành, các cấp và người tiêu dùng quan tâm. Gần đây báo chíthường xuyên lên tiếng phản đối việc sử dụng hormone, kháng sinh, thuốcbảo vệ thực vật không đúng mục đích và không phù hợp với các qui định, gâyảnh hưởng nguy hiểm đến sức khoẻ con người. Việc phát hiện thấy chất sudantrong lòng đỏ trứng gà, melamin trong sữa, kim loại nặng gấp nhiều lần so vớingưỡng quy định là những hồi chuông cảnh báo cho sự mất an toàn của thựcphẩm đang lưu hành tại Việt Nam. Theo số liệu thống kê của Cục Vệ sinh Antoàn Thực phẩm – Bộ Y Tế, năm 2010 cả nước đã xảy ra 132 vụ ngộ độc thựcphẩm với 4.676 người mắc bệnh, 3.281 người nhập viện và có 41 trường hợptử vong. Nguyên nhân chính là do vi khuẩn (Salmonella, Streptoccocus, E.coli Staphylococcus); do độc tố tự nhiên và hóa chất) [2]. E.coli O15:H7 là một trong các chủng vi khuẩn nguy hiểm gây ngộ độcthực phẩm ở nhiều quốc gia trên thế giới với các hội chứng: tiêu chảy, viêmruột xuất huyết, urê huyết (Haemolytic ureamic syndrome-HUS). Thịt bò vàcác sản phẩm chế biến từ bò là những loại thực phẩm có nguy cơ cao nhiễmvi khuẩn E.coli O15:H7. Theo báo cáo của Griffin P.M, (1995) [47], 3,7%mẫu thịt bò ở vùng Nam Mỹ nhiễm vi khuẩn E.coli O15:H7. Ở Châu Á,E.coli O157:H7 đã được phát hiện ở Nhật Bản, Trung Quốc, Ấn Độ, Malaysia(Yamada, 1993) [144], (Son Radu, 1998) [133]. Ở Việt Nam, vi khuẩn nàyđược phát hiện thấy trong phân bò với tỷ lệ 2% (Norobu và cộng sự, 2005)[90]. Bên cạnh đó, các nghiên cứu của các tác giả trong nước đã phát hiệnthấy các gen độc tố điển hình của vi khuẩn E.coli O157:H7 trong thịt bò, thịtlợn, phân bò, phân lợn với tỷ lệ mẫu nhiễm khá cao (Phạm Công Hoạt vàcộng sự, 2003) [3], (Trần Thanh Phong và cộng sự, 2007) [5]. 2 Như vậy, với điều kiện chăn nuôi kém vệ sinh và đặc biệt là điều kiệngiết mổ mất vệ sinh, thiếu kiểm soát như hiện nay ở Việt Nam thì nguy cơnhiễm vi khuẩn E.coli O157:H7 vào các loại thực phẩm và gây ngộ độc thựcphẩm cho người tiêu dùng là rất dễ xảy ra. Với mục đích xác định sự có mặt của vi khuẩn này trong thịt bò để chủđộng trong công tác phòng, điều trị bệnh ngộ độc thực phẩm và sản xuấtkháng thể đơn dòng phục vụ chế tạo kit xác định nhanh vi khuẩn, chúng tôitiến hành thực hiện đề tài: “ Xác định tỷ lệ nhiễm Escherichia coli O157:H7trong thịt bò bán ở một số địa điểm tại Hà Nội, nghiên cứu sản xuấtkháng thể đơn đòng đặc hiệu”.2. Mục tiêu của đề tài - Xác định được tỷ lệ nhiễm E.coli O157:H7 trong thịt bò bán ở một sốđịa điểm tại Hà Nội; - Sản xuất được kháng thể đơn dòng đặc hiệu của vi khuẩn E.coliO157:H7.3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài3.1 Ý nghĩa khoa học - Việc xác định được tỷ lệ nhiễm vi khuẩn E.coli O157:H7 và các đặctính sinh hóa cũng như độc lực của vi khuẩn này sẽ là cơ sở để xác định dịchtễ học của hội chứng ngộ độc thực phẩm do vi khuẩn này gây ra, từ đó tạo cơsở để xây dựng các biện pháp phòng ngừa quá trình ô nhiễm thực phẩm vàđiều trị bệnh do vi khuẩn này gây nên. - Đề tài đã đưa ra được quy trình chế tạo kháng thể đơn dòng đặc hiệuvới vi khuẩn E.coli O157:H7 có thể ứng dụng để sản xuất các kit chẩn đoánhuyết thanh học xác định vi khuẩn này. 33.2 Ý nghĩa thực tiễn - Đề tài đã xác định được sự có mặt của vi khuẩn E.coli O157:H7 trongthịt bò bán ở Hà Nội và một số vùng phụ cận, đồng thời chứng minh đượckhả năng gây bệnh của các chủng này. - Đề tài đã chế tạo được 2 kháng thể đơn dòng đặc hiệu 100% với vikhuẩn E.coli O157:H7. Hai kháng thể này đã được sử dụng trong nghiên cứutạo phức hợp kháng thể và hạt nano silica để phát hiện số lượng vi khuẩnE.coli O157:H7 do Viện Công nghệ sinh học chủ trì thực hiện. - Việc xác định được vi khuẩn E.coli O157:H7 và sản xuất kháng thểđơn dòng phục vụ chế tạo kit phát hiện vi khuẩn sẽ góp phần tích cực trongcông tác đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm.4. Những đóng góp mới của đề tài Kết quả của đề tài hoàn toàn mới ở Việt Nam, với các lý do: - Đề tài được thực hiện với đối tượng là vi khuẩn E.coli O157:H7nhiễm trong thịt bò và đặc tính gây điển hình. Kết quả của đề tài là minhchứng đầu tiên cho sự có mặt của vi khuẩn này trong thịt bò ở Hà Nội và cácvùng ph ...