Nghiên cứu tính đa dạng di truyền của một số giống đậu tương có khả năng kháng bệnh gỉ sắt khác nhau

Bài viết trình bày kết quả nghiên cứu tính đa dạng di truyền của các giống đậu tương có khả năng kháng bệnh gỉ sắt khác nhau trong tập đoàn giống đậu tương Việt Nam.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu tính đa dạng di truyền của một số giống đậu tương có khả năng kháng bệnh gỉ sắt khác nhau28(3): 49-53 T¹p chÝ Sinh häc 9-2006 Nghiªn cøu tÝnh ®a d¹ng di truyÒn cña mét sè gièng ®Ëu t−¬ng cã kh¶ n¨ng kh¸ng bÖnh gØ s¾t kh¸c nhau TrÇn ThÞ Ph−¬ng Liªn, Lª ThÞ Muéi ViÖn C«ng nghÖ sinh häc TrÇn §×nh Long Trung t©m nghiªn cøu vµ thùc nghiÖm §Ëu ®ç NÊm Phakospora pachyrhizi Sydow g©y ra tö ®Ó t×m ra c¸c chØ thÞ ph©n tö cho tÝnh ®a h×nhbÖnh gØ s¾t ë l¸ cña c©y ®Ëu t−¬ng (Glycine max gi÷a gièng kh¸ng vµ gièng mÉn c¶m víi bÖnh gØ(L) Merr). NhiÒu nßi nÊm ®· ®−îc ph©n lËp [1]. s¾t. Trong bµi nµy, chóng t«i tr×nh bµy kÕt qu¶Mét sè nghiªn cøu vÒ sù ph©n ly tÝnh kh¸ng nghiªn cøu tÝnh ®a d¹ng di truyÒn cña c¸c gièngbÖnh gØ s¾t b»ng c¸ch lai h÷u tÝnh cho thÊy c¸c ®Ëu t−¬ng cã kh¶ n¨ng kh¸ng bÖnh gØ s¾t kh¸cgien tréi (®¬n gien) kh¸ng bÖnh Rpp1, Rpp2, nhau trong tËp ®oµn gièng ®Ëu t−¬ng ViÖt Nam.Rpp3 ë c¸c dßng ®Ëu t−¬ng kh¸c nhau vµ trªnc¸c locut kh¸c nhau [2]. Nh−ng viÖc ph©n lËp I. ph−¬ng ph¸p nghiªn cøunh÷ng gien nµy còng nh− ®Þnh vÞ chóng trªn c¸c 1. Nguyªn liÖunhãm liªn kÕt gien ë c©y ®Ëu t−¬ng cho ®Õn nµyvÉn cßn lµ vÊn ®Ò ®ang ®−îc nghiªn cøu. ViÖc - C¸c gièng ®Ëu t−¬ng cã kh¶ n¨ng kh¸ngt×m kiÕm c¸c chØ thÞ ph©n tö liªn quan ®Õn tÝnh bÖnh gØ s¾t kh¸c nhau. C¸c gièng G1, G2, G3kh¸ng bÖnh gØ s¾t vµ tiÕn tíi ph©n lËp c¸c gien mÉn c¶m víi bÖnh gØ s¾t; c¸c gièng G8, G9 -nµy ®−îc nghiªn cøu trªn nhiÒu ®èi t−îng c©y kh¸ng bÖnh ë møc trung b×nh cßn c¸c gièng G4,trång nh− lóa mú, ng«, ®Ëu… [3, 4]. G7 vµ G10 - kh¸ng bÖnh gØ s¾t tèt. C¸c gièng nµy do Trung t©m nghiªn cøu vµ thùc nghiÖm §Ëu ®ç Mét trong nh÷ng b−íc tiÖm cËn ®Çu tiªn ®Ó (TT §§) thuéc ViÖn Khoa häc vµ Kü thuËt N«ngph©n lËp c¸c gien kh¸ng bÖnh lµ nghiªn cøu tÝnh nghiÖp ViÖt Nam nh©n gièng vµ kh¶o s¸t s¬ bé vÒ®a d¹ng di truyÒn cña c¸c gièng ®Ëu t−¬ng cã kh¶ kh¶ n¨ng kh¸ng bÖnh gØ s¾t.n¨ng kh¸ng bÖnh kh¸c nhau b»ng c¸c chØ thÞ ph©n H×nh 1. C¸c gièng ®Ëu t−¬ng víi tÝnh kh¸ng bÖnh gØ s¾t kh¸c nhauC«ng tr×nh ®−îc hç trî vÒ kinh phÝ cña Ch−¬ng tr×nh C«ng nghÖ sinh häc (2001-2005). 49 - C¸c enzim vµ hãa chÊt chuyªn dông ®−îc DÞch bµo tö ®−îc phun (hoÆc dïng b«ng quÐt)mua tõ c¸c h·ng Fermentas, Sigma, Merk. C¸c ®Òu lªn 2 mÆt l¸ víi l−îng 0,5 ml/dm2 l¸ vµo lóccÆp måi SSR ®−îc ®Æt tæng hîp t¹i h·ng chiÒu muén. Gi÷ ®é Èm ®Òu 80-90%, nhiÖt ®éInvitrogen. 25oC- 28oC. Sau 15 ngµy, tiÕn hµnh x¸c ®Þnh kh¶ n¨ng t¹o vÕt bÖnh theo sè l−îng vÕt bÖnh trªn2. Ph−¬ng ph¸p diÖn tÝch l¸, ®Æc ®iÓm cña vÕt bÖnh (møc ®é t¹o - Ph−¬ng ph¸p SSR: ADN tæng sè cña c¸c gê, kÝch th−íc vÕt…) vµ møc ®é h×nh thµnh bµogièng ®Ëu t−¬ng nghiªn cøu ®−îc t¸ch chiÕt tö theo ph−¬ng ph¸p cña Bé m«n Di truyÒntheo ph−¬ng ph¸p cña Keim (1987) [5]. Ph−¬ng miÔn dÞch, ViÖn Khoa häc vµ Kü thuËt n«ngph¸p nµy sö dông 12 cÆp måi SSR: Satt042, nghiÖp ViÖt Nam. Kh¶ n¨ng kh¸ng gÖnh gØ s¾tSatt005, Satt146, Satt175, Satt173, Satt557, ®−îc ®¸nh gi¸ nh− sau: kh¸ng cao: 0-20%;Satt489, Satt373, Satt567, Satt150, Satt009 vµ kh¸ng: 21-30%, nhiÔm trung b×nh: 31-50%;Satt431 [6]; tr×nh tù cña c¸c cÆp måi SSR theo nhiÔm: 51-70%; nhiÔm nÆng: 71-100%.c«ng bè cña Cregan vµ cs. (1999) [7]. Ph¶n øngPCR ®−îc tiÕn hµnh trong thÓ tÝch 25 µl bao II. KÕt qu¶ vµ th¶o luËngåm: 20 ng ADN; 10 pmole måi tæng sè; 1,6mM MgCl2; 250 µM dNTP; 10 mM Tris-HCl C¸c gièng ®Ëu t−¬ng ®· ®−îc kh¶o nghiÖmpH 8,8; 50 mM KCl; 0,08% Nonidet P40; 1 ®¬n s¬ bé vÒ kh¶ n¨ng kh¸ng bÖnh gØ s¾t G1-G10 vµvÞ Taq DNA polymeraza. Chu tr×nh nhiÖt cña gièng §T2000 ®−îc nghiªn cøu tiÕp b»ng chØ thÞph¶n øng: 95°C: 8 phót, 35 chu kú gåm ba b−íc ph©n tö SSR. Sö dông 12 chØ thÞ SSR ®Ó kh¶o s¸t95°C: 45 gi©y, 50°C: 45 gi©y, 72°C: 60 gi©y; sù kh¸c nhau gi÷a c¸c gièng nµy ®· cho kÕt qu¶ trªn h×nh 2. Trong ®ã, 10 chØ thÞ SSR cho sù ®asau ®ã 72°C: 8 phót vµ kÕ ...