NHÂN DÕNG GEN PRION (PrP) TỪ GIỐNG BÕ HANWOO (Bos Taurus Coreanae) CỦA HÀN QUỐC

Trong thời gian gần đây prion trở thành một thuật ngữ rất được lưu ý trong giới khoa học. Prion là một tác nhân gây bệnh mới được chú ý từ khi gây nên bệnh bò điên vào thập niên 1980 tại Anh Quốc. Sau khi trở thành đại dịch trên bò, người ta còn tìm thấy được mối liên hệ giữa các tác nhân gây nên bệnh bò điên và bệnh vCDJ ở người. Trong suốt vài thập kỷ qua, bệnh bò điên đã gây thiệt hại đáng kể cho nền chăn nuôi các nước kể cả các nước...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
NHÂN DÕNG GEN PRION (PrP) TỪ GIỐNG BÕ HANWOO (Bos Taurus Coreanae) CỦA HÀN QUỐC BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ****0O0**** ĐẶNG QUỐC BẢONHÂN DÕNG GEN PRION (PrP) TỪ GIỐNG BÕ HANWOO (Bos Taurus Coreanae) CỦA HÀN QUỐC LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh -Tháng 9/2006- BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ****0O0****NHÂN DÕNG GEN PRION (PrP) TỪ GIỐNG BÕ HANWOO (Bos Taurus Coreanae) CỦA HÀN QUỐC LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giáo viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện GS.TS. Kwon Moosik ĐẶNG QUỐC BẢO (Pr PGS.TS Nguyễn Ngọc Tuân KHÓA: 2002 – 2006 Thành phố Hồ Chí Minh -Tháng 9/2006- MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY GENE CLONING PRION (PrP) FROM KOREAN BOVINE: HANWOO (Bos taurus Coreanae) GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGY Professor Student Ph.D Kwon Moosik DANG QUOC BAO Dr. Nguyen Ngoc Tuan TERM: 2002 - 2006 HCMC, 09/2006 LỜI CẢM TẠChân thành cảm ơn Ban giám hiệu Trường Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh. Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học. Các Thầy Cô Phòng Quan Hệ Quốc Tế Các Thầy Khoa Công Nghệ Di Truyền, Đại Học Sungkyunkwan, Hàn Quốc Đã truyền đạt cho em những kiến thức quý báu và giúp đỡ em trong thời gian em học tập tại trường. Đặc biệt xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến: TS. Kwon Moosik- Trưởng bộ môn Công Nghệ Di Truyền, Đại Học Sungkyunkwan đã tận tình dạy bảo, hướng dẫn, giúp đỡ em trong nghiên cứu và thực hiện đề tài. TS. Nguyễn Ngọc Tuân- Trưởng phòng Sau Đại Học, Đại Học Nông Lâm đã giúp đỡ rất nhiều và hướng dẫn tận tình trong quá trình viết khoá luận. TS. Trần Thị Dung- Trưởng bộ môn Công Nghệ Sinh Học trường Đại Học Nông Lâm đã tạo điều kiện cho em thực hiện đề tài này. Ths. Kim Yong Hwan và các anh chị trong phòng thí nghiệm Công Nghệ Di Truyền, Đại Học Sungkyunkwan đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo em trong suốt thời gian em thực hiện khóa luận. Xin cảm ơn các bạn trong và ngoài lớp đã động viên giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và làm khóa luận tốt nghiệp. Con xin gửi lòng biết ơn sâu sắc đến bố mẹ, những người đã sinh thành, nuôi dưỡng, dạy dỗ con và luôn bên con trong mọi thời điểm. Thủ Đức, ngày 10 tháng 08 năm 2006 iii TÓM TẮTĐẶNG QUỐC BẢO, Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. Tháng 8/2006. ―NHÂNDÒNG GEN PRION (PrP) TỪ BÒ HANWOO (BOS TAURUS COREANAE) CỦAHÀN QUỐC‖Giáo viên hướng dẫnGS. TS. KWON MOOSIKPGS. TS. NGUYỄN NGỌC TUÂN BSE là một bệnh truyễn nhiễm do prion, là một trong những bệnh được quantâm trong giới nghiên cứu. Hiện nay các nhà khoa học đang tiến hành nghiên cứu đểcó thể tạo ra một bộ kit chẩn đoán sớm bệnh BSE, các nghiên cứu này đều tập trungnghiên cứu cấu trúc protein PrPsc, dạng protein gây bệnh của prion. Bước đầu trongnghiên cứu của chúng tôi về protein PrPsc, đã tiến hành nhân dòng và giải trình tự genprion. Tách chiết DNA từ máu của bò Hanwoo và PCR để khuếch đại gen prion. Genprion được khuếch đại có kích thước 651 bp, sau đó được kết buộc vào véc tơ pGEM-T easy và chuyển vào vi khuẩn E. coli DH5α. Khuẩn lạc chứa véc tơ tái tổ hợp có màutrắng trên môi trường LB chuyên biệt (Amp+, Xgal, IPTG). Plasmid thu được sau quátrình tinh sạch được giải mã trình tự. Kết quả giải trình tự thành công đã cho thấy sựgiống nhau gần như hoàn toàn trong trình tự gen prion của bò Hanwoo và bò châu Âu. Việc thành công trong quá trình nhân dòng sẽ là bước đầu quan trọng cho mụctiêu cuối cùng trong nghiên cứu của chúng tôi là tạo kit chẩn đoán bệnh BSE. iv ABSTRACT Prion — short for proteinaceous infectious particle — is a unique type ofinfectious agent, as it is made only of protein. Prion was termed in 1982 by Prusiner,who was prized Nobel for his research on prion. Bovine spongiform encephalopathy(BSE) is one of the most notable prion diseases. BSE is not only potential risk onbovine but also on human. Until now Korea is free from BSE (Tae-Yung Kim et.al,2005), but the BSE ...