Nhân nhanh Protocorm và chồi hoa hoàng lan, hồ điệp, địa lan và ngọc điểm bằng công nghệ Bioreactor bán chìm nổi

Bài viết nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng khoáng trong nhân nhanh Protocorm trên môi trường Agar; thời gian nuôi cấy ngập cách quãng đến nhân Protocorm và phát triển chồi... Để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nhân nhanh Protocorm và chồi hoa hoàng lan, hồ điệp, địa lan và ngọc điểm bằng công nghệ Bioreactor bán chìm nổi33(2): 82-88 T¹p chÝ Sinh häc 6-2011 NH¢N NHANH PROTOCORM Vµ CHåI HOA Hoµng LAN, Hå §IÖP,§ÞA LAN vµ NGäC §IÓM B»NG C¤NG NGHÖ BIOREACTOR B¸N CH×M NæI Mai ThÞ Ph−¬ng Hoa, Bïi ThÞ T−êng Thu, TrÇn V¨n Minh ViÖn Sinh häc nhiÖt ®íi Vi nh©n gièng truyÒn thèng [7] trªn loµi hoa Gièng hoa lan: hoµng lan (Dendrobium sp.,lan hiÖn dÉn ®Õn mét vÊn ®Ò mµ c¸c phßng thÝ Singapore), hå ®iÖp (Phalaenopsis sp. GiantnghiÖm vi nh©n gièng th−êng gÆp ph¶i ®ã lµ c©y White, NhËt), ®Þa lan (Cymbidium sp. - dßng laicÊy m« th−êng sinh tr−ëng chËm, tèn rÊt nhiÒu cã h−¬ng th¬m, óc), ngäc ®iÓm (Rhynchostylischi phÝ lao ®éng, mÊt nhiÒu thêi gian ®Ó s¶n sp. - hoa rõng ViÖt Nam, hoa mµu ®á).xuÊt c©y con víi khèi l−îng lín khi ®−a ra thÞtr−êng víi gi¸ thµnh c©y con cao [6]. HÖ thèng 2. Ph−¬ng ph¸pnh©n gièng b»ng ph«i v« tÝnh [4] gi¶i quyÕt M«i tr−êng nu«i cÊy do c«ng ty Duchefa®−îc rµo c¶n nªu trªn víi c¸c lîi thÕ: nh©n (Singapore) cung cÊp: MS (M.0244), Orchimaxnhanh d−íi d¹ng tÕ bµo, ph«i v« tÝnh, thÓ gi¶ (O.0257), Vacine-Went (V.0226), Knudson-Cph«i (protocorm like body) lµ nh÷ng thÓ biÖt hãa (K.0215) vµ Lindemann (L.0216) cã bæ sungcã hÖ sè t¸i sinh cao, tèn Ýt chi phÝ lao ®éng vµ BA (benzyl aminopurin), IBA (β-indolbutyricc¶i thiÖn gi¸ thµnh [1]. Kü thuËt bioreactor ®J acid), NAA (α-napththalenacetic acid), n−íc®−îc nghiªn cøu vµ vËn dông vµo vi nh©n gièng dõa CW (10%).nh»m môc tiªu gi¶m gi¸ thµnh s¶n phÈm c©ycÊy m« [9]. Bioreactor lµ mét kü thuËt nu«i cÊy §iÒu kiÖn nu«i cÊy: nhiÖt ®é phßng 28±2oC,trªn ®èi t−îng tÕ bµo ph«i soma nh»m môc tiªu RH = 65%, thêi gian chiÕu s¸ng 8 giê/ngµy,nh©n nhanh b»ng ph−¬ng thøc t¨ng nhanh sinh c−êng ®é chiÕu s¸ng 11,1-33,3 µmol/m2/s.khèi thÓ nh©n gièng [8]. VËt liÖu nu«i cÊy trong Bè trÝ thÝ nghiÖm: (i). b×nh tam gi¸c: ®−îcvi nh©n gièng b»ng c«ng nghÖ bioreactor nh− tÕ bè trÝ 3 lÇn lËp l¹i, mçi lÇn nu«i cÊy 3 b×nh tambµo m« sÑo ph«i hãa, tÕ bµo ph«i v« tÝnh, gi¸c, mçi b×nh tam gi¸c nu«i cÊy 8-12 mÉu; (ii).protocorm, côm chåi [8]. Vµ còng cã nhiÒu kiÓu bioreactor b¸n ch×m næi: ®−îc bè trÝ 1 lÇn lËpbioreactor dïng cho vi nh©n gièng nh− l¹i, 1 b×nh nu«i cÊy cho mçi lÇn lÆp l¹i, nu«i cÊybioreactor sôt khÝ h×nh trô (airlift bubble 60-100 mÉu cho 1 b×nh nu«i cÊy (1 lÝt). Sè liÖucolumn-bioreactor), bioreactor sôc khÝ h×nh cÇu ®−îc xö lý ANOVA b»ng phÇn mÒm MSTATC(airlift bubble balloon-bioreactor), bioreactor (p 0,05).c¸nh qu¹t (stirred tank-bioreactor), bioreactorb¸n ch×m næi (contemporary bioreactor) [8]. 3. ThiÕt kÕ thÝ nghiÖmMçi lo¹i bioreactor cã tÝnh n¨ng kh¸c nhau, phôthuéc vµo tÝnh chÊt sinh lý cña thùc vËt nu«i a. ¶nh h−ëng cña m«i tr−êng kho¸ng ®Õn nh©ncÊy, nh»m môc tiªu t¨ng sinh khèi nhanh vµ nhanh protocorm trªn agart¨ng c−êng kh¶ n¨ng sinh tr−ëng [10]. §J cã Sö dông 5 m«i tr−êng dinh d−ìng kho¸ng donh÷ng thµnh c«ng nhÊt ®Þnh trong viÖc øng dông c«ng ty Duchefa cung cÊp. Trªn m«i tr−êng nu«ibioreactor trong nh©n nhanh c©y hoa lan [2], cÊy cã bæ sung BA (0,5 mg/l) + IBA (0,1 mg/l) +Dendrobium [3], Cymbidium [5]. Bµi b¸o nµy CW (10%). MÉu nu«i cÊy lµ protocorm (3-4nghiªn cøu thêi gian nu«i cÊy ngËp c¸ch quJng PLB/côm). ChØ tiªu theo dâi: sè protocorm vµ sètrong nu«i cÊy b¸n ch×m næi. chåi h×nh thµnh. Thêi gian nu«i cÊy 45 ngµy. I. PH¦¥NG PH¸P nghiªn cøu b. ¶nh h−ëng cña thêi gian nu«i cÊy ngËp c¸ch qu,ng ®Õn nh©n protocorm vµ ph¸t triÓn1. Nguyªn liÖu chåi hoµng lan82 Sö dông m«i tr−êng dinh d−ìng kho¸ng MS vµ sè chåi h×nh thµnh, chiÒu dµi l¸ (mm). Thêi(M.0244). Trªn m«i tr−êng nu«i cÊy nh©n gian nu«i cÊy 45 ngµy.protocorm cã bæ sung BA (0,2 mg/l) + IBA (0,1mg/l) + n−íc dõa (5%); mÉu nu«i cÊy lµ f. ¶nh h−ëng cña PPM ®Õn qu¸ tr×nh chèngprotocorm (3-4 PLB/côm). Trªn m«i tr−êng nu«i nhiÔm (hoµng lan)cÊy sinh tr−ëng cã bæ sung BA (0,1 mg/l) + Sö dông m«i tr−êng MS (M.0244), cã bæn−íc dõa (10%); mÉu nu«i cÊy lµ chåi ®¬n 7-10 sung BA (0,1 mg/l) + IBA (0,1 mg/l) + CWmm. ChØ tiªu theo dâi: sè protocorm vµ sè chåi (10%). MÉu nu«i cÊy lµ côm chåi hoµng lan nháh×nh thµnh, chiÒu dµi l¸ (mm). Thêi gian nu«i (3-4 chåi/côm, chiÒu cao côm chåi 5-10 mm).cÊy 45 ngµy. Nu«i cÊy 60-100 mÉu/b×nh BCN. ChØ ti ...