Sự đồng nhiễm và tương quan giữa các kỹ thuật xét nghiệm PCV2 ở ca bệnh hô hấp phức hợp và còi cọc sau cai sữa

Bài viết Sự đồng nhiễm và tương quan giữa các kỹ thuật xét nghiệm PCV2 ở ca bệnh hô hấp phức hợp và còi cọc sau cai sữa được nghiên cứu nhằm khảo sát tỷ lệ đồng nhiễm các mầm bệnh liên quan PCV2 và đánh giá sự tương quan giữa các kỹ thuật xét nghiệm trên các ca bệnh khảo sát. Mẫu mô và máu từ heo có dấu hiệu lâm sàng được thu thập từ 90 trang trại khác nhau ở nhiều tỉnh thành.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Sự đồng nhiễm và tương quan giữa các kỹ thuật xét nghiệm PCV2 ở ca bệnh hô hấp phức hợp và còi cọc sau cai sữa HỘI NGHỊ KHOA HỌC CHĂN NUÔI THÚ Y TOÀN QUỐC 2021 - AVS2021: 327-332 SỰ ĐỒNG NHIỄM VÀ TƯƠNG QUAN GIỮA CÁC KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM PCV2 Ở CA BỆNH HÔ HẤP PHỨC HỢP VÀ CÒI CỌC SAU CAI SỮA Đỗ Tiến Duy1*, Ngô Thị Ngọc Trâm1, Nguyễn Thế Hiển1, Trần Hoàng Vũ2 và Nguyễn Tất Toàn1 Tóm tắt Mục tiêu của nghiên cứu này nhằm khảo sát tỷ lệ đồng nhiễm các mầm bệnh liên quan PCV2 và đánh giá sự tương quan giữa các kỹ thuật xét nghiệm trên các ca bệnh khảo sát. Mẫu mô và máu từ heo có dấu hiệu lâm sàng được thu thập từ 90 trang trại khác nhau ở nhiều tỉnh thành. Phương pháp PCR/RT-PCR được thực hiện để xác định mầm bệnh trong từng trường hợp. Từ kết quả đó, tiếp tục khảo sát sự tương qua giữa các xét nghiệm thông qua các phương pháp mổ khám, HE, IHC và ELISA. Kết quả sàng lọc cho thấy nhiễm ghép 2 mầm bệnh có tỷ lệ cao nhất trong đó chủ yếu là đồng nhiễm giữa PCV2 và PRRSV, tiếp theo là đồng nhiễm 3 mầm bệnh (6,3 - 23,8%) theo trại và (4,1 - 16,3%) theo ca bệnh. Sự khác biệt tỷ lệ phát hiện PCV2 ở các kỹ thuật xét nghiệm lâm sàng, bệnh tích, PCR, qPCR, ELISA và IHC là rất có ý nghĩa. PCV2 thường nhiễm ghép với các mầm bệnh PRRSV, MH, HP và CSFV. Sự kết hợp dấu hiệu lâm sàng, bệnh tích đặc trưng với kỹ thuật xét nghiệm PCR có giá trị chắc chắn để khẳng định ca bệnh do PCV2. Từ khóa: Đồng nhiễm, heo, PCV2. CO-INFECTION AND CORRELATION BETWEEN PCV2 TEST TECHQUINES IN PORCINE RESPIRATORY DISEASE COMPLEX (PRDC) AND POST-WEANING MULTISYSTEMIC WASTING SYNDROME (PMWS) Abstract The aim of this study was to investigate the prevalence of the PCV2-related pathogens and to evaluate the cor- relation between the diagnostic assays in the surveyed cases. Tissue and blood samples from clinical pigs were collected from 90 different farms in several provinces. PCR/RT-PCR method was performed to identify the pathogen in each case. From that result, continue to investigate the correlation between tests through surgery, HE, IHC and ELISA methods. Screening results showed that double co-infection has the highest rate which is mainly co-infection between PCV2 and PRRSV, followed by co-infection with 3 pathogens (6.3 - 23.8%) by farm and (4.1 - 16.3%) by case. The difference in the detection rate of PCV2 in clinical, lesion, PCR, qPCR, ELISA and IHC diagnostic techniques was very significant. PCV2 is co-infect with PRRSV, MH, HP and CSFV pathogens. The combination of clinical signs, characteristic lesions with PCR testing technique has a certain value to confirm a case caused by PCV2. Keywords: Co-infection, pigs, PCV2. 1. MỞ ĐẦU Circovirus là virus không có vỏ bọc với (Open reading frames - ORFs) bao gồm bộ gen có dạng vòng DNA mạch đơn thuộc ORF1 và ORF2, mã hóa cho protein cap và họ Circoviridae (Segales và cs., 2005). Bộ rep, hai protein này được mã hoá ngược chiều gen Circovirus chứa hai khung đọc mở chính nhau (Palinski và cs., 2017). Cho đến nay, 1 Khoa Chăn nuôi - Thú y, Trường Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh; 2 Công ty Boehringer Ingelheim, Việt Nam; * Tác giả liên hệ: Đỗ Tiến Duy. Email: duy.dotien@hcmuaf.edu.vn; ĐT: 0918.356744 327 HỘI NGHỊ KHOA HỌC CHĂN NUÔI THÚ Y TOÀN QUỐC 2021 - AVS2021: 327-332 bốn loài Porcine circovirus (PCV) đã được 3 - 10 tuần tuổi từ 63 trại khảo sát heo ở các xác định, bao gồm PCV1 không gây bệnh trên tỉnh thành khu vực phía Nam và một số tỉnh heo (Tischer và cs, 1986), PCV2 hiện đang miền Trung và Bắc. Thu thập mẫu theo hai gây bệnh phổ biến trên đàn heo (Allan và cs., dạng: Mẫu mô tươi (Phổi, hạch, lách, thận, 1998), PCV3 phát hiện lần đầu vào năm 2015 gan) cho kỹ thuật xét nghiệm PCR và huyết (Palinski và cs., 2017) và PCV4 vừa mới được thanh cho kỹ thuật Realtime-PCR; Mẫu mô phát hiện tại Trung Quốc (Zhang và cs., 2019). (Phổi, hạch, lách, thận, gan) cố định formalin Ở Việt Nam, PCV2 được xác định xuất 10% cho kỹ thuật HE và IHC; và huyết thanh hiện từ năm 2000. Tỷ lệ nhiễm cũng như thu thập cho xét nghiệm ELISA. Các xét sự phức tạp do đồng nhiễm với vi khuẩn và nghiệm được thực hiện ở Phòng thí nghiệm vi-rút khác có xu hướng tăng dần qua từng nghiên cứu Chăn nuôi và Thú y, Khoa Chăn năm (Lâm Thị Thu Hương, 2012). Các bệnh do Porcine circovirus type 2 (PCVD) hoặc nuôi Thú y, Trường đại học Nông Lâm TP. các bệnh liên quan đến Porcine circovirus HCM). type 2 (PCVAD) là các thuật ngữ đề cập đến 2.2. Xác định sự hiện diện của các mầm một số thể bệnh gây ra do PCV2. Cho đến bệnh khảo sát nay, cơ chế chính xác của PCVD/PCVAD Tách chiết DNA/RNA: Mẫu mô tươi hiện vẫn chưa được biết rõ (Ren và cs., 2016). Tuy nhiên, nhiều nghiên cứu đã báo cáo được xử lý với dung dịch PBS 1X, thu được đồng nhiễm PCV2 với các mầm bệnh khác huyễn dịch 10%. Ly tâm huyễn dịch thu ở heo, chẳng hạn như vi-rút gây hội chứng phần dịch nổi để tách chiết DNA/RNA theo rối loạn hô hấp và sinh sản ở heo (PRRSV), quy trình của Bộ kít thương mại (GeneJET Mycoplasma hyopneumoniae (MH),... là Genomic DNA Purification Kit của Thermo những yếu tố quan trọng có thể tăng mức độ Scientific, Lithuania) và RNA (SV Total nghiêm trọng của PCVD/PDVAD. Hơn nữa, RNA Isolation System-Promega, Mỹ). Huyết việc tiêm phòng thất bại, stress hoặc mật độ thanh từ ca bệnh được tách chiết DNA bằng đàn đông cùng với nhiễm PCV2 cũng gây bộ kit InviMAG Virus DNA/RNA (INVITEK ra PCVD/PCVAD (Ren ...