Tách các neurotoxin từ nọc rắn hổ mang Việt Nam (naja naja)

Bài báo này trình bày việc tách, làm sạch và khảo sát độc tính của một số phân đoạn từ nọc rắn hổ mang Việt Nam.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tách các neurotoxin từ nọc rắn hổ mang Việt Nam (naja naja)T¹p chÝ Hãa häc, T. 44 (4), Tr. 449 - 453, 2006 T¸ch c¸c neurotoxin tõ näc r¾n hæ mang ViÖt nam (naja naja) §Õn Tßa so¹n 8-9-2005 Ho ng Ngäc Anh , Bïi Thanh Xu©n1, §Æng TrÇn Ho ng2, Tr ¬ng Nam H¶i2 1 1 ViÖn Hãa häc, ViÖn Khoa häc v% C«ng nghÖ ViÖt Nam 2 ViÖn C«ng nghÖ Sinh häc, ViÖn Khoa häc v% C«ng nghÖ ViÖt Nam Summary The results of our study show that the Vietnamese cobra (N. naja) venom contains two groups of neurotoxins with different molecular weights. Three neurotoxins were isolated from this venom using the combination of chromatography on a Sephacryl S-100 column and a reverse-phase HPLC column. The toxicity of isolated toxins was determined by injection it on the C57BL/6 mice. These isolated toxins have the masses of 5920.13 Da, 5798.26 Da, 6677.28 Da and are structurally related to short-chain neurotoxins from other elapids. These toxins are different from known Taiwan cobra toxins. In further these toxins will be studied for use in medicine. I - Më ®Çu c¸c -neurotoxin näc r¾n l kh«ng cã cÊu tróc xo¾n , trong khi ®ã sè l îng cÊu tróc chiÕm Cho ®Õn nay tõ näc nhiÒu lo i r¾n kh¸c nhau kho¶ng 40% v t¹o th nh ba vßng I, II, III t ¬ngng êi ta ® t¸ch ra v x¸c ®Þnh tr×nh tù axit øng d¹ng ba ngãn tay [1, 4]. Nghiªn cøu -amine cña h¬n mét tr¨m -neurotoxin. Nh÷ng neurotoxin cho thÊy c¸c vßng I v II ®ãng vaitoxin n y cã kh¶ n¨ng ng¨n chÆn sù dÉn truyÒn trß chÝnh trong liªn kÕt víi thô thÓ axetylcholinthÇn kinh b»ng c¸ch liªn kÕt ®Æc biÖt víi thô thÓ [5, 6].nicotinic axetylcholin trªn postsynaptic R¾n hæ mang (N. naja) phæ biÕn ë nhiÒu ®Þamembrane cña khung c¬ hay c¸c neuron [1]. ph ¬ng cña ViÖt Nam. Nh÷ng nghiªn cøu gÇnDùa trªn tr×nh tù axit amin c¸c neurotoxin n y ®©y cho thÊy th nh phÇn c¸c -neurotoxin trong® îc chia ra l m hai lo¹i ng¾n v d i. C¸c näc r¾n kh«ng nh÷ng chØ phô thuéc v o lo i,neurotoxin ng¾n chøa 57 - 64 gèc axit amin víi gièng r¾n m cßn phô thuéc v o ®iÒu kiÖn ®Þabèn cÇu disulfit cßn c¸c neurotoxin d i chøa 66 lý, nguån thøc ¨n. VÝ dô cïng mét lo i r¾n N.- 79 gèc axit amin víi n¨m cÇu disulfit [2].Nh÷ng toxin n y cã cÊu tróc kh«ng gian gièng naja ph©n bè ë ba vïng gÇn nhau cña Ên §é cãnhau (cÊu tróc d¹ng ba ngãn tay), mÆc dï cÊu th nh phÇn näc kh¸c nhau [7, 8]. ë ViÖt Namtróc bËc mét cña chóng rÊt kh¸c nhau. C¸c tr íc ®©y ® cã nh÷ng nghiªn cøu vÒ th nh phÇnneurotoxin d i liªn kÕt m¹nh víi c¶ hai lo¹i thô toxin cña näc r¾n hæ mang nh ng do ®iÒu kiÖnthÓ nicotinic axetylcholin (AChR) cña khung c¬ kü thuËt ch a cho phÐp nªn nh÷ng nghiªn cøuv tÕ b o thÇn kinh, trong khi ®ã c¸c neurotoxin n y chØ dõng ë t¸ch näc r¾n qua gel sephadexng¾n chØ t¸c dông m¹nh víi thô thÓ AChR cña G-75 v ®«ng kh« ph©n ®o¹n cã ®éc tÝnh [9]. V×khung c¬ [3]. vËy viÖc t¸ch, l m s¹ch v kh¶o s¸t c¸c - §Æc ®iÓm chung cÊu tróc kh«ng gian cña neurotoxin näc r¾n hæ mang ViÖt Nam l cÇn 449thiÕt. ® a v o cét mçi lÇn l 5 µg (ho trong 50 µl TiÕp theo c«ng tr×nh tr íc, trong b i b¸o n y dung dÞch A).chóng t«i tr×nh b y viÖc t¸ch, l m s¹ch v kh¶o C¸c -neurotoxin cña näc r¾n t¸c dông víis¸t ®éc tÝnh cña mét sè ph©n ®o¹n tõ näc r¾n hæ kªnh Na+ nªn ®éc tÝnh cña nã dÔ x¸c ®Þnh b»ngmang ViÖt Nam. c¸ch tiªm chóng v o chuét. §éc tÝnh cña c¸c ph©n ®o¹n t¸ch ra ® îc thö trªn chuét b¹ch II - Nguyªn liÖu v ph ¬ng ph¸p C57BL/6 c¶ hai gièng (18-20 g) b»ng c¸ch tiªm nghiªn cøu b¾p, l îng protein tiªm v o chuét l kho¶ng 0,2 mg [10] . Sö dông ba møc ®é ®Ó x¸c ®Þnh ®é ®éc1. Nguyªn liÖu cña ...