Tạp chí khoa học: Dịch chiết Hồ tiêu (Piper nigrum L.) ức chế hoạt động của thụ thể neurokinin-1 (NK-1R) được kích thích bởi chất P (substance P) ở tế bào lympho chuột

Trong nghiên cứu này, đã chứng minh chất P (SP), phối tử đặc hiệu thụ thể NK-1R, thúc đẩy tế bào lympho chuột giải phóng cytokine interferon-gamma (IFN-γ) trong điều kiện invitro. Ngoài ra, SP kích thích (hoặc ít nhất làm tăng) sự biểu hiện của thụ thể này ở tế bào nuôi cấy.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tạp chí khoa học: Dịch chiết Hồ tiêu (Piper nigrum L.) ức chế hoạt động của thụ thể neurokinin-1 (NK-1R) được kích thích bởi chất P (substance P) ở tế bào lympho chuộtTạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Tập 30, Số 1 (2014) 13-17D ch chi t H tiêu (Piper nigrum L.) c ch ho t ng c a th th neurokinin-1 (NK-1R) ư c kích thích b i ch t P (substance P) t bào lympho chu tTr nh T t Cư ng1,*, Giang Huy Di m2, Tr n Trung oàn2, Ph m Thanh Huy n3, inh oàn Long1,4Phòng thí nghi m tr ng i m Công ngh enzyme-protein, Trư ng i h c Khoa h c T nhiên, 334 Nguy n Trãi, Thanh Xuân, Hà N i, Vi t Nam 2 Khoa Sinh h c, Trư ng i h c Khoa h c T nhiên, 334 Nguy n Trãi, Thanh Xuân, Hà N i, Vi t Nam 3 Khoa Tài nguyên Dư c li u, Vi n Dư c Li u, 3B Quang Trung, Hoàn Ki m, Hà N i, Vi t Nam 4 Khoa Y Dư c, i h c Qu c Gia Hà N i, 144 Xuân Th y, C u Gi y, Hà N i, Vi t NamNh n ngày 01 tháng 12 năm 2013 Ch nh s a ngày 08 tháng 01 năm 2014; ch p nh n ăng ngày 24 tháng 3 năm 20141Tóm t t. Trong nghiên c u này, chúng tôi ch ng minh ch t P (SP), ph i t c hi u th th NK1R, thúc y t bào lympho chu t gi i phóng cytokine interferon-gamma (IFN-γ) trong i u ki n invitro. Ngoài ra, SP kích thích (ho c ít nh t làm tăng) s bi u hi n c a th th này t bào nuôi c y. D ch chi t mêtanol h t H tiêu (Piper nigrum L.) c ch m nh ho t ng c a th th NK-1R ư c ho t hóa b i SP cho th y th th này có th là ích tác ng c a thành ph n nào ó có trong d ch chi t, m c dù có th không liên quan n capsaicin qua con ư ng truy n tin c a th th vanilloid lo i 1 (TRPV1) v n ã bi t trư c ây. Thành ph n nào trong d ch chi t H tiêu có ho t tính i kháng ( i v n) th th NK-1R c n ư c ti p t c quan tâm nghiên c u. T khóa: Th th neurokinin-1 (NK-1R), Ch t P (Substance P - SP), Capsaicin, H tiêu (Piper nigrum L.), Ch t i kháng th th .1.tv n∗Th th neurokinin-1 (NK-1R) thu c nhóm các th th xuyên màng liên k t v i G-protein, bi u hi n m nh nh t khu v c não b và có m t các t bào c a h th ng mi n d ch [1]. Ch t P (SP) là ph i t có ái l c c hi u v i NK-1R. Khi k t c p v i SP, NK-1R kích thích_______∗Tác gi liên h . Tel: 84-0984814776. E-mail: cuongtrinhtat@gmail.comquá trình truy n tin trong t bào d n t i i u hòa c m giác au t vùng th n kinh ngo i vi v h th n kinh trung ương, gây ra các tr ng thái lo âu và các tri u ch ng tr m c m, ngoài ra cũng gây tác d ng kích thích co cơ trơn và nh hư ng n i u hòa ph n ng mi n d ch c a cơ th [2]. Ngoài ra, NK-1R khi ho t hóa còn gây các tín hi u áp ng viêm trên m t s mô hình chu t b viêm do nhi m trùng [3]. Theo nghiên c u g n ây, NK-1R tr ng thái ho t hóa thúc 1314T.T. Cường và nnk. /Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Tập 30, Số 1 (2014) 13-17y t bào lympho (lymphocyte) ti t interferon gamma (IFN-γ) [3]. Capsaicin ư c tách chi t t H tiêu (Piper nigrum L.), t (Capsicum frutescens L.) … ư c bi t có tác d ng gi m au th n kinh sau khi k t c p v i th th TRPV1 thông qua thúc y gi i phóng SP [4]. tìm hi u d ch chi t H tiêu ư c gi thi t có ch a capsaicin có tác ng tr c ti p n th th NK-1R hay không, chúng tôi ti n hành xây d ng i u ki n k thu t cho phép ánh giá s bi u hi n ch c năng c a th th NK-1R t bào lympho chu t do tác ng c a ph i t SP và kh năng nh hư ng c a d ch chi t dư c li u t cây H tiêu n con ư ng truy n tin này. K t qu nghiên c u cho th y, d ch chi t H tiêu không làm tăng ho t ng c a th th NK-1R như d oán và thay vào ó c ch ho t ng c a nó. Như v y, có th trong H tiêu, ngoài capsaicin, còn ch a các thành ph n nào ó có tác ng n ho t ng c a th th NK-1R ư c ho t hóa b i SP theo cơ ch i kháng (antagonist).Tách và nuôi t bào lympho: T bào ư c tách t huy t thanh chu t b ng kit Ficoll-paque PLUS theo quy trình c a hãng. T bào sau ó ư c nuôi trong RPMI 1640 ch a 10% FBS. Phân tích ELISA: T bào lympho ư c x lý r i phân tích b ng ELISA như mô t trư c ây [5]. Cytokine IFN-γ mà t bào ti t ra ư c nh lư ng b ng ELISA. Các bư c phân tích ư c th c hi n theo ch d n c a nhà s n xu t (BD Biociences). Western Blot: T bào lympho ư c x lý và phân tích Western Blot như mô t trư c ây [5]. Kháng th kháng NK-1R ư c pha loãng v i t l 1:1000. Màng chuy n protein ư c phát hi n b ng Chemiluminescence (ECL, GE HealthCare). Th ho t tính sinh h c: D ch chi t mêtanol dư c li u có n ng khác nhau (t 0 n 40 g/ml) ư c b sung vào môi trư ng nuôi c y t bào v i v i th tích không quá 5%. i ch ng ư c b sung cùng th tích dung môi nhưng không ch a d ch chi t dư c li u. Cytokine ư c so sánh gi a các lô i ch ng và các lô thí nghi m. Thu th p s li u và x lý th ng kê: S li u ư c thu t 3 thí nghi m l p l i c l p, ư c bi u hi n b ng giá tr trung bình ± phương sai tiêu chu n (±SD) và ư c phân tích b ng Student’s T-test v i i u ch nh Bonferroni ho c ANOVA. S khác nhau có ý nghĩa thông kê v i P < 0,05.2. V t li u và phương pháp i tư ng và v t li u: Chu t nh t tr ng (Mus musculus) dòng Swiss ư c mua t Vi n V sinh D ch t Trung ương. Kit tách t bào lympho Ficoll-paque PLU ...