Tạp chí khoa học: Điều chế và kiểm tra chất lượng kháng thể đơn dòng gắn đồng vị phóng xạ 131I-rituximab dùng trong điều trị U Lympho ác tính không Hodgkin

Kháng thể đơn dòng rituximab được đánh dấu với đồng vị phóng xạ 131I dùng trong điều trị bệnh u lympho ác tính không Hodgkin theo phương pháp hướng đích. Phức hợp 131I-rituximab được điều chế bằng phương pháp chloramin T và iodogen.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tạp chí khoa học: Điều chế và kiểm tra chất lượng kháng thể đơn dòng gắn đồng vị phóng xạ 131I-rituximab dùng trong điều trị U Lympho ác tính không HodgkinTạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Tập 29, Số 3 (2013) 51-58i u ch và ki m tra ch t lư ng kháng th ơn dòng g n ng v phóng x 131I-rituximab dùng trong i u tr U Lympho ác tính không HodgkinNguy n Th Thu1,*, Mai Tr ng Khoa2, Tr n ình Hà2, Võ Th C m Hoa1, Dương Văn ông1, Bùi Văn Cư ng1, Nguy n Th Khánh Giang11Vi n Nghiên c u h t nhân, à L t, Vi t Nam 2 B nh Vi n B ch Mai, Hà N i, Vi t NamNh n ngày 27 tháng 2 năm 2013Ch nh s a ngày 06 tháng 5 năm 2013; ch p nh n ăng ngày 27 tháng 9 năm 2013Tóm t t: Kháng th ơn dòng rituximab ư c ánh d u v i ng v phóng x 131I dùng trong i u tr b nh u lympho ác tính không Hodgkin theo phương pháp hư ng ích. Ph c h p 131I-rituximab ư c i u ch b ng phương pháp chloramin T và iodogen. Ph c mi n d ch phóng x ư c ki m tra ch t lư ng b ng các phương pháp hóa lý như s c ký l ng cao áp, s c ký l p m ng, s c ký gi y, o ph gamma. Các ánh giá sinh h c c a thu c phóng x ư c th nghi m như vô khu n, n i c t vi khu n, n nh invitro, phân b trên chu t nh t. Hi u su t ánh d u kháng th v i ng v phóng x 131I t 95% b ng phương pháp chloramin T và t hơn 85% b ng phương pháp riêng c a h p ch t ánh d u thu ư c theo hai phương pháp là 0,246 iodogen t i pH 7,5. Ho t GBq/mg và 0,037 GBq/mg. Ph c mi n d ch phóng x ư c i u ch có tinh khi t hoá phóng x c a t hơn 98% và tinh khi t h t nhân phóng x t hơn 99%. Thu c phân b cao trong h tư i máu, trong các mô và ào th i nhanh theo con ư ng bài ti t qua th n. Dư c ch t phóng x 131 I-rituximab t các tiêu chu n ch t lư ng thu c phóng x có th s d ng i u tr lâm sàng. T khóa: i u tr mi n d ch phóng x , 131I-rituximab, Ki m tra ch t lư ng dư c ch t phóng x .1. Gi i thi u∗ Trong nh ng năm g n ây, kháng th ơn dòng ánh d u phóng x ã ư c nghiên c u i u ch và ng d ng trong ch n oán và i u tr lâm sàng [1]. Trong s ó, ch ph m 131I rituximab ch a kháng th ơn dòng kháng CD20 ánh d u ng v phóng x 131I là m t trong nh ng dư c ch t phóng x ư c s d ng_______∗Tác gi liên h . T: 84-0918223739. E-mail: ngthithu2006@yahoo.comcó hi u qu trong i u tr b nh u lympho ác tính không Hodgkin (Non Hodgkin’s Lymphoma, NHL) [1, 2]. Kháng th ơn dòng rituximab th c hi n ch c năng nh m ích lên kháng nguyên c hi u CD20 trên t bào ung thư lympho B. Bên c nh ch c năng tiêu di t t bào ung thư theo các cơ ch sinh h c, kháng th ơn dòng sau khi ánh d u phóng x 131I-rituximab tìm n và di t t bào ung thư theo cơ ch b c x ion hóa [3, 4]. V i th i gian bán rã 8 ngày, phát tia gamma v i năng lư ng 364 keV và tia 5152N.T. Thu và nnk. /Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Tập 29, Số 3 (2013) 51-58beta v i năng lư ng trung bình là 192 keV, 131I là ng v phóng x lý tư ng cho vi c ch p hình và i u tr b nh khi g n v i phân t kháng th [5]. Trong báo cáo này chúng tôi trình bày các phương pháp nghiên c u ki m tra ch t lư ng 131I-rituximab b ng các phương pháp lý, hóa, sinh h c như phương pháp s c ký l ng protein nhanh (FPLC), s c ký l p m ng (TLC), o ho t phóng x , o ph , th vô khu n, phân b sinh h c... [6, 7]. Cùng v i các thi t b chuyên d ng o ho t phóng x , thi t b phân tích và các thi t b ki m tra ch t lư ng thu c phóng x , dư c ch t phóng x 131I-rituximab dư c ánh giá toàn di n v ch t lư ng theo quy nh c a Dư c i n v thu c phóng x t các tiêu chu n ch t lư ng dùng i u tr trong y h c [8].ch a 80 µg iodogen, ph n ng x y ra trong vòng 10 phút t i pH 7,5 trong m phosphat. Ph c h p 131I-rituximab ư c tách ra kh i h n h p b ng phương pháp s c ký l c gel dùng c t sephadex G-25 [9]. Dung môi r a gi i là nư c mu i sinh lý 0,9% ho c m phosphate 0,2 M vô trùng. Hi u su t ánh d u kháng th ư c tính b ng cách l y ho t phóng x t i v trí nh 131I-rituximab chia cho ho t t ng s . Phương pháp s c ký l ng protein nhanh FPLC: t các m u rituximab, 131I - rituximab 131 và I vào h s c ký FPLC 6850A, Perkin Elmer, dùng c t s c ký Agilentb Zorbax GF250, dung môi m phosphate trong nư c mu i sinh lý (PBS) 0,1 mol/L, pH 7, th tích m u 4 µl, v n t c x i 0,6 ml/phút, detector UV o t i 280 nm. Phương pháp s c ký l p m ng: Kích thư c b n m ng TLC là 1 x 10 cm, h dung môi khai tri n là methanol và NaCl 0,9% t l 85:15. Ch m 5 µl m u lên băng TLC, t băng gi y vào bình ch a s n h n h p dung môi [10], th i gian s c ký là 15 phút. Khi dung môi di chuy n n centimet th 10, l y băng gi y ra. Ho t phóng x trên băng s c ký có th o trên các thi t b o phóng x ho c quét trên máy Bioscan. Có th ưa băng s c ký vào bu ng phóng x t ch p Cyclone, ch p 10 giây ho c c t băng s c ký thành t ng băng nh r ng 1 cm, o m ho t phóng x trên máy Caprat. Trên m i băng s c ký, phân t 131I t do di chuy n v tuy n trên dung môi (Rf=1). Ph c 131Irituximab n m t i i m g c (Rf=0). Tính t l ho t phóng x c a các vùng tương ng v i các h p ch t c a 131I . Ph n trăm tinh khi t hóa phóng x tính theo công t ...