Tiểu luận Phương pháp xác định dư lượng aflatoxin trong thủy sản bằng sắc ký lỏng cao áp HPLC

Thuỷ sản là một ngành kinh tế mũi nhọn và rất có tiềm năng xuất khẩucủa Việt Nam.Theo báo cáo tại Hội thảo do Bộ Nông nghiệp và Phát triển nôngthôn phối hợp với tổ chức Nông lương Liên Hiệp Quốc (FAO) tổ chức ngày 8-9/6 tại Cần Thơ, hiện Việt Nam được coi là một trong những nước có tốc độtăng trưởng xuất khẩu thủy sản nhanh nhất thế giới với tốc độ tăng giá trị trungbình giai đoạn 1998-2008 đạt 18%/n...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tiểu luận "Phương pháp xác định dư lượng aflatoxin trong thủy sản bằng sắc ký lỏng cao áp HPLC" TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI VIỆN ĐÀO TẠO SAU ĐẠI HỌC -----------*&*----------- TIỂU LUẬN MÔN HỌCTên tiểu luận Phương pháp xác định dư lượng aflatoxin trong thủy sản bằng sắc ký lỏng cao áp HPLC Họ và tên HV: Đào Thị Hiên Mã số : CB101151 Lớp : CHTP2010 Hà nội 2011I. MỞ ĐẦU Thủy sản là một ngành kinh tế mũi nhọn và rất có tiềm năng xuất khẩucủa Việt Nam.Theo báo cáo tại Hội thảo do Bộ Nông nghi ệp và Phát tri ển nôngthôn phối hợp với tổ chức Nông lương Liên Hiệp Quốc (FAO) tổ chức ngày 8-9/6 tại Cần Thơ, hiện Việt Nam được coi là một trong những nước có tốc độtăng trưởng xuất khẩu thủy sản nhanh nhất thế giới với tốc độ tăng giá tr ị trungbình giai đoạn 1998-2008 đạt 18%/năm. Đại diện của FAO cho biết, Việt Nam đang đứng th ứ 6 th ế gi ới v ềxuất khẩu thủy sản, thứ 5 về sản lượng nuôi trồng và th ứ 12 v ề sản l ượng khaithác. Đến nay, tuy xuất khẩu tôm vẫn tăng nhưng tỷ trọng giảm. Các nhómhàng khác như cá lại có tốc độ tăng nhanh, trong đó cá tra là hiện t ượng đ ặc bi ệtcó sự tăng trưởng bùng nổ kể từ sau năm 2000. Tính riêng trong năm 2008, khối lượng cá xuất khẩu đạt hơn 825tấn, tỷ trọng đạt 66,7% khối lượng thủy sản xuất khẩu, trong đó riêng cá tra đ ạthơn 640 tấn, chiếm hơn 51% tỷ trọng khối lượng thủy sản xuất khẩu. Đặc biệt, việc xuất khẩu cá tra trở lại thị trường Nga, một th ịtrường lớn và quan trọng, đã tác động đến các thị trường khác. Nga đang xem xétchọn Việt Nam là mô hình đầu tiên trong quản lý đi ều hành, ch ế bi ến xu ất kh ẩuthủy sản. Tuy nhiên, đáp ứng được nhu cầu của thị trường thế giới là mọt vấn đềrất lớn, đặc biệt là chất lượng. Sản phẩm xuất khẩu nhất thiết phải đạt đ ượccác tiêu chuẩn của thị trường quốc tế. Hiện nay vấn đề an toàn v ệ sinh th ựcphẩm là chỉ tiêu hang đầu đối với chất lượng thực phẩm, trong đó nổi bật h ơncả là dư lượng độc tố có trong sản phẩm thủy h ải sản c ủa n ước ta còn r ất cao.Điển hình là dư lượng aflatoxin trong thủy sản, nguy cơ này ph ần l ớn b ắt ngu ồntừ nguồn thức ăn chế biến sẵn. Nhiệt độ và độ ẩm cao ở vùng nhiệt đới lànguyên nhân làm cho thức ăn thủy sản dễ bị nấm mốc phát tri ển. Trở ng ại chínhcho việc chế biến thức ăn thủy sản là sự phát triển của nấm m ốc Aspergillusflavus, nấm mốc này sản xuất ra độc chất Aflatoxin, một loại độc t ố nguy hi ểmcho động vật thủy sản. Nấm này thường phát triển ở các loại h ạt có d ầu. b ắpvà khoai củ … Dư lượng aflatoxin còn lại trong sản phẩm thủy sản là chỉ tiêu quan tr ọngcần được khống chế, kiểm tra và kiểm soát nghiêm ngặt để đảm bảo ch ấtlượng cho xuất khẩu. Hiện nay có rất nhiều phương pháp xác định dư lượng aflatoxin nh ưphương pháp sắc ký bản mỏng (TLC), Phương pháp ELISA, Ph ương pháp s ắcký lỏng cao áp (HLC), Phương pháp vi sinh, ph ương pháp áp d ụng k ỹ thu ật sinhhọc phân tử PCR… Trong phạm vi của tiểu luận tôi tiến hành tìm hi ểu v ề phương pháp xácđịnh dư lượng aflatoxin bằng sắc ký lỏng cap áp (HPLC).II. PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG AFLATOXINBẰNG SẮC KÝ LỎNG CAO ÁP (HPLC – High PerformanceLiquid Chromatography)1. Phạm vi áp dụngPhương pháp này áp dụng xác định hàm lượng độc tố aflatoxin (B1, B2, G1, G2)trong thủy sản và sản phẩm thủy sản bằng sắc ký lỏng cao áp (HPLC). Giới hạnphát hiện của phương pháp là 1,5 mg/kg.2. Nguyên tắcAflatoxin có trong mẫu thủy sản bao gồm các nhóm B1, B2, G1 và G2 đ ượcchiết tách ra bằng clorofom. Dịch chiết đựơc làm sạch bằng phương pháp chiếtpha rắn (SPE) trên silicagel. Hàm lượng aflatoxin có trong dịch chiết được xácđịnh trên hệ thống HPLC với đầu dò huỳnh quang theo ph ương pháp ngo ạichuẩn.3. Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, chất chuẩn và dung d ịch thử3.1. Thiết bị, dụng cụ3.1.1 Hệ thống HPLC với đầu dò huỳnh quang.3.1.2 Cột sắc ký pha đảo LC18 kích thước L x ID là 25 cm x 4,6 mm, đường kínhhạt từ 5 đến 10 [NAD1]mm.3.1.3 Màng lọc mao quản kích thước 0,4 mm.3.1.4 Máy nghiền đồng thể tốc độ 10 000 vòng/ phút.3.1.5 Cân phân tích có độ chính xác 0,0001 g.3.1.6 Máy ly tâm tốc độ 5 000 vòng/phút..1.7 Bể siêu âm.3.1.8 Hệ thống cô quay chân không.3.1.9 Cột thủy tinh có khóa teflon, kích thước L x ID là 500 x 20 mm và 500 x 8mm.3.1.10 ống ly tâm thủy tinh dung tích 250 ml.3.1.11 Bình cầu thủy tinh dung tích 100 ml và 250 ml.3.1.12 Bình định mức dung tích 5 ml và 10 ml.3.2 Hóa chất3.2.1 Nước cất loại dùng cho HPLC.3.2.2 Metanol loại dùng cho HPLC.3.2.3 Clorofom loại dùng cho HPLC.3.2.4 Axetonitril loại dùng cho HPLC.3.2.5 n-hexan tinh khiết loại dùng cho phân tích.3.2.6 Ete etylic tinh khiết.3.2.7 Sulfat natri khan.3.2.8 Silicagel cỡ hạt từ 60 đến 200 ...