TINH CHẾ KHÁNG NGUYÊN BỀ MẶT VIRUS VIÊM GAN B

Bệnh viêm gan virus B (HBV) là vấn đề mang tính toàn cầu, bởi đây là một trong những bệnh truyền nhiễm hàng đầu trên thế giới nói chung và ở Việt Nam nói riêng. Virus viêm gan B cũng chính là tác nhân liên quan đến ung thư tế bào gan và một số bệnh liên quan đến xơ gan, viêm gan mạn tính.Ngoài ra, HBV còn có thể lây truyền cho người khác qua đường máu (tiếp xúc với máu hay các sản phẩm từ máu, dụng cụ dính máu). Theo ước tính, người mang HBsAg sẽ có...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
TINH CHẾ KHÁNG NGUYÊN BỀ MẶT VIRUS VIÊM GAN B BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  NGUYỄN THỊ KIM HIỀN TINH CHẾ KHÁNG NGUYÊN BỀ MẶT VIRUS VIÊM GAN B LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  TINH CHẾ KHÁNG NGUYÊN BỀ MẶT VIRUS VIÊM GAN B LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌCGiáo viên hướng dẫn Sinh viên thực hiệnPGS. TS. NGUYỄN LÊ TRANG NGUYỄN THỊ KIM HIỀNTS. NGUYỄN NGỌC HẢI KHÓA: 2002 – 2006 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY  PURIFICATION OF HEPATITIS B SURFACE ANTIGEN GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGYProfessor StudentDr. NGUYEN LE TRANG NGUYEN THI KIM HIENDr.NGUYEN NGOC HAI TERM: 2002 - 2006 HCMC, 09/2006 LỜI CẢM ƠN Với tất cả lòng kính trọng, em xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu trườngĐại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công nghệ sinhhọc, cùng tất cả quý Thầy Cô đã truyền đạt kiến thức cho em trong suốt quá trình họctại trường. Con xin bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn LêTrang - người thầy đã dạy dỗ, giúp đỡ, tạo mọi điều kiện thuận lợi cho con trong suốtquá trình thực hiện khoá luận tại Viện Pasteur. Em xin chân thành cảm ơn TS. Nguyễn Ngọc Hải đã hết lòng hướng dẫn dạydỗ, động viên, quan tâm, ủng hộ em hoàn thành khoá luận. Em xin chân thành cảm ơn Th.s Nguyễn Thị Nguyệt Thu, KS Đỗ Thị Châm,KS Võ Thị Mỹ Duyên, CN Lạc Ngọc Thêm, CN Lại Ngọc Diễm, chị Sim phòng MiễnDịch, Viện Pasteur đã nhiệt tình giúp đỡ, dạy bảo em nhiều điều trong suốt thời gianthực hiện khoá luận. Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám Đốc Viện Pasteur – TpHCM đã cho phépvà tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em học tập và nghiên cứu tại Viện. Tôi xin cảm ơn các bạn lớp CNSH 28 đã chia xẻ cùng tôi những vui buồn trongthời gian học cũng như hết lòng hỗ trợ, giúp đỡ tôi trong thời gian thực tập. Sinh viên thực hiện Nguyễn Thị Kim Hiền i TÓM TẮTNGUYỄN THỊ KIM HIỀN, Đại Học Nông Lâm Tp.HCM. Tháng 7/2006. “TINHCHẾ KHÁNG NGUYÊN BỀ MẶT VIRUS VIÊM GAN B”.Hội đồng hướng dẫn:PGS.TS. NGUYỄN LÊ TRANG.TS.NGUYỄN NGỌC HẢI. Việt Nam là một trong những nước có nguy cơ cao về nhiễm virus viêm ganBaïn, với tỷ lệ người mang HBsAg trong cộng đồng dân chúng từ 15 – 26%. Do đó,nguồn kháng nguyên tự nhiên ở những người bệnh mang HBsAg là rất nhiều. Đồngthời, HBsAg là kháng nguyên được sản xuất ra gấp bội so với các loại kháng nguyênkhác . Mặc khác HBsAg lại rất đặc hiệu để chẩn đoán bệnh viêm gan B .Vì vậy, chúngtôi tiến hành tinh chế kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B để phục vụ cho nhu cầusản xuất kháng thể để tạo các bộ sinh phẩm chuẩn đoán cũng như dùng làm vaccinephòng bệnh. Sau khi tiến hành đề tài, chúng tôi đã đạt được những kết quả sau:  HBsAg được tinh chế với hoạt tính kháng nguyên HBsAg so với hàm lượngprotein tổng số là 32,35.103 mUI/ OD.  Độ tinh khiết của sản phẩm là 44 lần.  HBsAg được tinh chế khá tốt, kết quả được thể hiện trên gel điện di: dungdịch HBsAg thu được có chứa các băng có trọng lượng phân tử từ 25 – 28 kDa tươngứng với các quyết định kháng nguyên của HBsAg. Đề tài này là một bước quan trọng để tiến hành tạo bộ sinh phẩm chẩn đoánphát hiện virus viêm gan B trong máu. ii MỤC LỤCCHƢƠNG TRANGTrang tựaLời cảm tạ ........................................................................................................... iTóm tắt ............................................................................................................... iiMục lục ............................................................................................................. iiiDanh sách các chữ viết tắt ................................................................................ ivDanh sách các hình ........................................................................................... vDanh sách các bảng .......................................................................................... viPHẦN 1. MỞ ĐẦU ........................................................................................ 1 1.1 Đặt vấn đề ....................................................................................... 1 1.2 Mục đích – Yêu cầu........................................................................ 2PHẦN 2. TỔNG QUAN ................................................................................ 3 2.1 Lịch sử phát hiện của HBV ............................................................ 3 2.2 Phân loại HBV ................................................................................ 3 ...