Tinh sạch và nuôi cấy tế bào diệt tự nhiên (nk) cho ứng dụng lâm sàng

Tế bào diệt tự nhiên Natural Killer (NK) đã được chứng minh có vai trò quan trọng trong đáp ứng chống lại khối u và do đó đã được ứng dụng như là một liệu pháp miễn dịch trong điều trị ung thư. Trong nghiên cứu này chúng tôi khái quát các phương pháp hiện có dùng để kích hoạt, làm giàu, nhân dòng và vận chuyển các chế phẩm tế bào NK dùng cho mục đích lâm sàng.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tinh sạch và nuôi cấy tế bào diệt tự nhiên (nk) cho ứng dụng lâm sàng TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC TINH SẠCH VÀ NUÔI CẤY TẾ BÀO DIỆT TỰ NHIÊN (NK) CHO ỨNG DỤNG LÂM SÀNG Natalia Lapteva1, Susann M. Szmania2, Frits van Rhee2, Cliona M. Rooney1 1 Trung tâm nghiên cứu Gene và Tế bào, Đại học Y Baylor, Houston, TX 77030; 2 Đại học Y Arkansas, Little Rock, AK 72205 Người dịch: BS. Lương Hoàng Long Hiệu đính: TS.BS. Nguyễn Thanh Bình Trường Đại học Y Hà Nội *Bản dịch này người dịch đã cố gắng truyền tải thông tin một cách sát nghĩa và dễ hiểu nhất đến với bạn đọc. Tuy nhiên cũng có thể xảy ra sai sót do chưa thống nhất về một số thuật ngữ và khái niệm mới. Chúng tôi không chịu trách nhiệm về bất kỳ sai sót y khoa nào khi tham khảo, trích dẫn bài dịch này. Mọi thông tin chính xác và đầy đủ nhất xin xem bài báo nguyên gốc theo link dưới đây: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/24941378 (Critical Reviews™ in Oncogenesis, 19(1 - 2): 121 – 132 (2014)). TÓM TẮT Tế bào diệt tự nhiên Natural Killer (NK) đã được chứng minh có vai trò quan trọng trong đáp ứng chống lại khối u và do đó đã được ứng dụng như là một liệu pháp miễn dịch trong điều trị ung thư. Trong nghiên cứu này chúng tôi khái quát các phương pháp hiện có dùng để kích hoạt, làm giàu, nhân dòng và vận chuyển các chế phẩm tế bào NK dùng cho mục đích lâm sàng. Từ khóa: tế bào diệt tự nhiên, sản xuất, sản phẩm lâm sàng Từ viết tắt: AML: Leukemia cấp dòng tủy; B-ALL: Leukemia cấp dòng lympho B; C-ALL: Leukemia cấp dòng lympho thông thường; H-SCT: Ghép tế bào gốc tạo máu; IL: interleukin; N/A: Không có thông tin; NK: Tế bào diệt tự nhiên; PBMC: Tế bào đơn nhân máu ngoại vi; SCGM: Môi trường nuôi cấy tế bào gốc. I. TỔNG QUAN Trong vòng 3 thập kỷ qua, đã có rất nhiều dung nạp tốt, đồng thời tế bào NK được nỗ lực của các nhà nghiên cứu cơ bản và lâm truyền có khả năng duy trì với nồng độ cao ở sàng để làm sáng tỏ chức năng tế bào diệt tự người nhận trong vài tháng dẫn đến các đáp nhiên NK trong đáp ứng miễn dịch chống lại ứng trên lâm sàng [2 - 4]. Một phác đồ lý các tế bào ung thư và để hiểu cơ chế hoạt tưởng ứng dụng tế bào NK trên lâm sàng cần động của chúng [1]. Các nghiên cứu này đã phải tạo ra được các tế bào NK có độ tinh dẫn đến các thử nghiệm lâm sàng ứng dụng sạch và tiềm năng với số lượng đủ lớn để có tế bào NK trong điều trị ung thư. Kết quả của thể truyền nhiều lần cùng một sản phẩm. Tế các thử nghiệm lâm sàng đã cho thấy việc bào NK được truyền cần phải có khả năng truyền tế bào NK là an toàn và có khả năng nhân lên ở người nhận và chống lại, tiêu diệt khối u. Một điều cần lưu ý nữa là tế bào NK có Địa chỉ liên hệ: Lương Hoàng Long, Trường Đại học Y Hà Nội Email: longluong.fsh@gmail.com Ngày nhận: 7/5/2018 Ngày được chấp thuận: 30/6/2018 120 đặc tính kích hoạt miễn dịch chủ động, do đó có khả năng thu hút các tế bào miễn dịch, kích hoạt và nhân lên các tế bào T đặc hiệu với khối u. TCNCYH 112 (3) - 2018 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC II. NGUỒN TẾ BÀO NK VÀ CÁC QUY TRÌNH NUÔI CẤY 108 tế bào diệt tự nhiên (CD3-CD56+)/kg cân Đa phần các thử nghiệm lâm sàng ứng với ~80% của tổng số tế bào T và B), do đó có dụng tế bào NK trong điều trị ung thư đều yêu nhiều phương pháp đã được phát triển nhằm cầu một lượng tế bào truyền lớn, khoảng 5 x làm giàu từ một thể tích lớn máu ngoại vi, như 6 7 nặng [7]. Bởi vì tế bào NK chỉ chiếm tỷ lệ nhỏ trong quần thể tế bào bạch cầu (~1 - 20% so 10 đến 5 x 10 tế bào NK (CD3-CD56+) cho 1 chế phẩm phân tách máu (apheresis), hoặc kilogram cân nặng bệnh nhân [2; 3; 5; 6]. Gần nhân lên từ một lượng mẫu nhỏ hơn hoặc từ đây, có báo cáo đã sử dụng liều cao tới 1 x nguồn tế bào gốc (hình 1). Loại bỏ tế bào T&B hoặc làm giàu CD56+ bằng CliniMACS và hoạt hóa qua đêm với cytokines Chỉ có cytokines trong 4 - 10 tuần Với tế bào nuôi được tia xạ trong 10 - 14 ngày Tế bào nuôi Hình 1. Tế bào NK ứng dụng trên lâm sàng thường thu được từ chế phẩm phân tách máu tươi hoặc đông lạnh (A) Máy CliniMACS có thể làm giàu CD56+ bằng việc loại bỏ các dòng tế bào không phải tế bào diệt tự nhiên, chọn lọc dương tính sử dụng hạt từ gắn anti-CD56 hoặc cả hai phương pháp có thể được sử dụng để tăng độ tinh sạch tế bào NK. Sau khi trải qua làm giàu bằng CliniMACS, tế bào NK được truyền trực tiếp hoặc kích hoạt qua đêm bằng IL-2. Thay vào đó, tế bào NK có thể được nhân lên từ một lượng nhỏ chế phẩm phân tách máu in vitro sử dụng (B) hỗn hợp Cytokine hoặc (C) bổ sung tế bào nuôi để tăng hiệu quả nhân lên và giảm thời gian cần nuôi cấy để chế phẩm có thể truyền được. Các biện pháp tạo dòng tế bào NK dùng tăng nhu cầu số lượng tế bào cần ban đầu, cho ghép đồng loại thường cố gắng loại bỏ nhất là khi khâu loại bỏ nằm cuối cùng trong dòng lympho T-CD3+ do chúng có khả năng quy trình [8]. Do đó, đa phần các quy trình sử gây hội chứng mảnh ghép chống vật chủ dụng chế phẩm phân tách máu (apheresis) (Graft-vesus-host disease–GVHD) nên làm cần 1 - 20 x 109 tế bào đơn nhân làm nguyên ...