Xác định cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào của galactofucansulfate tách chiết từ rong nâu Sargassum aquifolium ở Khánh Hòa
Số trang: 6
Loại file: pdf
Dung lượng: 356.76 KB
Lượt xem: 5
Lượt tải: 0
Xem trước 2 trang đầu tiên của tài liệu này:
Thông tin tài liệu:
Bài viết trình bày kết quả nghiên cứu cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào của galactofucan sulfate tách từ rong nâu Sargassum aquifolium thu thập ở vịnh Nha Trang, tỉnh Khánh Hòa. Kết quả cho thấy, hiệu suất chiết tách sulfated polysaccharide (fucoidan) thô (FSA) đạt 3,7% tính trên khối lượng rong khô.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào của galactofucansulfate tách chiết từ rong nâu Sargassum aquifolium ở Khánh Hòa KHOA HỌC CÔNG NGHỆ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA GALACTOFUCANSULFATE TÁCH CHIẾT TỪ RONG NÂU SARGASSUM AQUIFOLIUM Ở KHÁNH HÒA Bùi Văn Nguyên1*, Thành Thị Thu Thủy2, Trần Thị Thanh Vân3, Nguyễn Văn Thành4 TÓM TẮT Bài báo trình bày kết quả nghiên cứu cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào của galactofucan sulfate tách từ rong nâu Sargassum aquifolium thu thập ở vịnh Nha Trang, tỉnh Khánh Hòa. Kết quả cho thấy, hiệu suất chiết tách sulfated polysaccharide (fucoidan) thô (FSA) đạt 3,7% tính trên khối lượng rong khô. Bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion, fucoidan thô được tách thành 4 phân đoạn (F1, F2, F3 và F4) trên cột sắc ký DEAE-cellulose. Phân đoạn F4 có hàm lượng sulfate cao nhất là 31,5% và có thành phần đường đơn giản nhất, chỉ gồm Fuc và Gal với tỉ lệ (L-Fuc:D-Gal = 1:0,55) nên đã được chọn để nghiên cứu sâu về cấu trúc bằng phương pháp phổ ESI-MS và phổ NMR. Kết quả cho thấy, F4 có cấu trúc dạng galactofucan sulfate. Các thành phần đường của nó gắn với nhau qua liên kết glycoside (1→3) hoặc (1→4), nhóm sulfate gắn với gốc Fuc ở vị trí C2 hoặc C4 và gắn với gốc Gal ở vị trí C2. Kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học cho thấy các phân đoạn F3 và F4 đều có hoạt tính gây độc tế bào trên các dòng ung thư gan Hep-G2, ung thư phổi LU-1 và ung thư mô liên kết RD. Từ khóa: Hoạt tính gây độc tế bào, galactofucansulfate, phương pháp phổ, sargassum aquifolium, rong nâu. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ2 cấu trúc và hoạt tính của fucoidan từ một số loài rong nâu thuộc chi Sargasum cũng đã được các nhà khoa Fucoidan là một sulfated polysaccharide có cấu học trong và ngoài nước nghiên cứu, tuy nhiên cáctrúc hóa học phức tạp. Thành phần của nó bao gồm nghiên cứu chưa nhiều [2, 4]. Để góp phần làm rõ đặcnhiều loại đường, chủ yếu là fucose, tiếp theo là trưng cấu trúc của fucoidan từ chi Sargassum, đãgalactose, glucose, manose và một số đường khác. nghiên cứu cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào củaNgoài ra nó còn có thể có axít uronic. Fucoidan được galactofucan sulfate tách chiết từ loài rong nâubiết đến là một chất có nhiều hoạt tính sinh học quí, Sargassum aquifolium thu thập ở biển Nha Trangnhư: hoạt tính chống khối u, chống oxy hóa, kháng bằng các phương pháp phổ NMR và ESI-MS.khuẩn, kháng nấm, chống đông tụ máu và chống cácvirus như HIV. Ngoài ra fucoidan còn được mô tả là 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁPcó nhiều tác dụng sinh học khác như tác dụng hạ 2.1. Mẫu rongcholesterol, giảm mỡ máu, v.v. Do có các tính chất Rong nâu được thu thập tại đảo Hòn Rùa, vịnhquí như vậy nên fucoidan thu hút được rất nhiều sự Nha Trang vào tháng 5/2020 và được định danh bởiquan tâm của các nhà khoa học trên thế giới [4, 8, 13, TS. Lê Như Hậu (Viện Nghiên cứu và Ứng dụng14]. Công nghệ Nha Trang). Tên khoa học là Sargassum Việt Nam có hơn 3260 km bờ biển với nguồn tài aquifolium. Mẫu rong sau khi thu thập được rửa sạchnguyên rong biển rất phong phú. Rong nâu là nguồn tạp chất (rác, cát, mùn,...) bằng nước ngọt, đem sấylợi rong biển tự nhiên lớn nhất, trong đó chi rong có khô ở nhiệt độ 400C và nghiền mịn thành bột.trữ lượng lớn nhất là chi Sargasum. Các nghiên cứu về 2.2. Chiết tách Fucoidan Việc chiết tách fucoidan được thực hiện theo1 Trường Đại học Khánh Hòa phương pháp của Bilan và cộng sự [1]. Mẫu rong khô2 Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt (200 g) được xử lý ở nhiệt độ phòng với hỗn hợpNam MeOH-CHCl3-H2O tỉ lệ 4:2:1 để loại bỏ các chất màu,3 Viện Nghiên cứu và Ứng dụng Công nghệ Nha Trang4 Trường Đại học Kiên Giang lọc rửa với axeton, rồi sấy khô. Sau khi sấy khô, bột*Email: buivannguyen@ukh.edu.vn rong được chiết với 250 ml dung dịch CaCl2 2% (5N«ng nghiÖp vµ ph¸t triÓn n«ng th«n - KỲ 2 - TH¸NG 4/2021 115 KHOA HỌC CÔNG NGHỆlần), mỗi lần dung dịch được khuấy trộn ở 850C trong đông lạnh, thu được 4 phân đoạn ký hiệu là F1, F2, F35 giờ. Các dịch chiết được gom lại, sau đó thêm 80 ml và F4.dung dịch hexadecyltrimethylammonium bromide 2.5. Thủy phânnồng độ 10% trong nước. Tủa tạo thành được li tâm, Phản ứng thủy phân được tiến hành với TFA 0,75rửa với nước nhiều lần, sau đó khuấy trộn với 150 ml M ở nhiệt độ 60º0C trong thời gian là 1 giờ. Thủy phândung dịch NaI 20% trong cồn, để ở nhiệt độ phòng mẫu F4 dùng đo phổ ESI-MS.trong vòng 2-3 ngày, rồi ly tâm tách lấy phần tủa (làmnhư vậy 5 lần), sau đó rửa với cồn và hòa tan lại trong 2.6. Phổ NMRnước. Dung dịch được thẩm t ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào của galactofucansulfate tách chiết từ rong nâu Sargassum aquifolium ở Khánh Hòa KHOA HỌC CÔNG NGHỆ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA GALACTOFUCANSULFATE TÁCH CHIẾT TỪ RONG NÂU SARGASSUM AQUIFOLIUM Ở KHÁNH HÒA Bùi Văn Nguyên1*, Thành Thị Thu Thủy2, Trần Thị Thanh Vân3, Nguyễn Văn Thành4 TÓM TẮT Bài báo trình bày kết quả nghiên cứu cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào của galactofucan sulfate tách từ rong nâu Sargassum aquifolium thu thập ở vịnh Nha Trang, tỉnh Khánh Hòa. Kết quả cho thấy, hiệu suất chiết tách sulfated polysaccharide (fucoidan) thô (FSA) đạt 3,7% tính trên khối lượng rong khô. Bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion, fucoidan thô được tách thành 4 phân đoạn (F1, F2, F3 và F4) trên cột sắc ký DEAE-cellulose. Phân đoạn F4 có hàm lượng sulfate cao nhất là 31,5% và có thành phần đường đơn giản nhất, chỉ gồm Fuc và Gal với tỉ lệ (L-Fuc:D-Gal = 1:0,55) nên đã được chọn để nghiên cứu sâu về cấu trúc bằng phương pháp phổ ESI-MS và phổ NMR. Kết quả cho thấy, F4 có cấu trúc dạng galactofucan sulfate. Các thành phần đường của nó gắn với nhau qua liên kết glycoside (1→3) hoặc (1→4), nhóm sulfate gắn với gốc Fuc ở vị trí C2 hoặc C4 và gắn với gốc Gal ở vị trí C2. Kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học cho thấy các phân đoạn F3 và F4 đều có hoạt tính gây độc tế bào trên các dòng ung thư gan Hep-G2, ung thư phổi LU-1 và ung thư mô liên kết RD. Từ khóa: Hoạt tính gây độc tế bào, galactofucansulfate, phương pháp phổ, sargassum aquifolium, rong nâu. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ2 cấu trúc và hoạt tính của fucoidan từ một số loài rong nâu thuộc chi Sargasum cũng đã được các nhà khoa Fucoidan là một sulfated polysaccharide có cấu học trong và ngoài nước nghiên cứu, tuy nhiên cáctrúc hóa học phức tạp. Thành phần của nó bao gồm nghiên cứu chưa nhiều [2, 4]. Để góp phần làm rõ đặcnhiều loại đường, chủ yếu là fucose, tiếp theo là trưng cấu trúc của fucoidan từ chi Sargassum, đãgalactose, glucose, manose và một số đường khác. nghiên cứu cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào củaNgoài ra nó còn có thể có axít uronic. Fucoidan được galactofucan sulfate tách chiết từ loài rong nâubiết đến là một chất có nhiều hoạt tính sinh học quí, Sargassum aquifolium thu thập ở biển Nha Trangnhư: hoạt tính chống khối u, chống oxy hóa, kháng bằng các phương pháp phổ NMR và ESI-MS.khuẩn, kháng nấm, chống đông tụ máu và chống cácvirus như HIV. Ngoài ra fucoidan còn được mô tả là 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁPcó nhiều tác dụng sinh học khác như tác dụng hạ 2.1. Mẫu rongcholesterol, giảm mỡ máu, v.v. Do có các tính chất Rong nâu được thu thập tại đảo Hòn Rùa, vịnhquí như vậy nên fucoidan thu hút được rất nhiều sự Nha Trang vào tháng 5/2020 và được định danh bởiquan tâm của các nhà khoa học trên thế giới [4, 8, 13, TS. Lê Như Hậu (Viện Nghiên cứu và Ứng dụng14]. Công nghệ Nha Trang). Tên khoa học là Sargassum Việt Nam có hơn 3260 km bờ biển với nguồn tài aquifolium. Mẫu rong sau khi thu thập được rửa sạchnguyên rong biển rất phong phú. Rong nâu là nguồn tạp chất (rác, cát, mùn,...) bằng nước ngọt, đem sấylợi rong biển tự nhiên lớn nhất, trong đó chi rong có khô ở nhiệt độ 400C và nghiền mịn thành bột.trữ lượng lớn nhất là chi Sargasum. Các nghiên cứu về 2.2. Chiết tách Fucoidan Việc chiết tách fucoidan được thực hiện theo1 Trường Đại học Khánh Hòa phương pháp của Bilan và cộng sự [1]. Mẫu rong khô2 Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt (200 g) được xử lý ở nhiệt độ phòng với hỗn hợpNam MeOH-CHCl3-H2O tỉ lệ 4:2:1 để loại bỏ các chất màu,3 Viện Nghiên cứu và Ứng dụng Công nghệ Nha Trang4 Trường Đại học Kiên Giang lọc rửa với axeton, rồi sấy khô. Sau khi sấy khô, bột*Email: buivannguyen@ukh.edu.vn rong được chiết với 250 ml dung dịch CaCl2 2% (5N«ng nghiÖp vµ ph¸t triÓn n«ng th«n - KỲ 2 - TH¸NG 4/2021 115 KHOA HỌC CÔNG NGHỆlần), mỗi lần dung dịch được khuấy trộn ở 850C trong đông lạnh, thu được 4 phân đoạn ký hiệu là F1, F2, F35 giờ. Các dịch chiết được gom lại, sau đó thêm 80 ml và F4.dung dịch hexadecyltrimethylammonium bromide 2.5. Thủy phânnồng độ 10% trong nước. Tủa tạo thành được li tâm, Phản ứng thủy phân được tiến hành với TFA 0,75rửa với nước nhiều lần, sau đó khuấy trộn với 150 ml M ở nhiệt độ 60º0C trong thời gian là 1 giờ. Thủy phândung dịch NaI 20% trong cồn, để ở nhiệt độ phòng mẫu F4 dùng đo phổ ESI-MS.trong vòng 2-3 ngày, rồi ly tâm tách lấy phần tủa (làmnhư vậy 5 lần), sau đó rửa với cồn và hòa tan lại trong 2.6. Phổ NMRnước. Dung dịch được thẩm t ...
Tìm kiếm theo từ khóa liên quan:
Khoa học nông nghiệp Hoạt tính gây độc tế bào Phương pháp phổ Rong nâu Sargassum aquifolium Chiết tách sulfated polysaccharideGợi ý tài liệu liên quan:
-
7 trang 172 0 0
-
8 trang 162 0 0
-
Nguồn lợi rong biển quần đảo Nam Du, Kiên Giang
14 trang 140 0 0 -
Phân lập, tuyển chọn vi khuẩn lactic và ứng dụng trong lên men nem chua chay từ cùi bưởi Năm Roi
9 trang 103 0 0 -
Tổng quan về một số vấn đề lý luận và thực tiễn về sản xuất lúa gạo theo tiêu chuẩn chứng nhận
12 trang 71 0 0 -
11 trang 57 0 0
-
6 trang 55 0 0
-
Nghiên cứu tổng hợp, thành phần, cấu tạo phức chất của crom với Azo DQ1
7 trang 55 0 0 -
8 trang 51 1 0
-
11 trang 50 0 0