Xác định độc lực và quá trình cảm nhiễm của vi khuẩn streptococcus iniae vào cá chẽm (lates calcarifer)

Việc ứng dụng kĩ thuật mô hóa miễn dịch đã làm sáng tỏ cách cảm nhiễm của vi khuẩn Streptococcus iniae vào cơ thể cá chẽm khi ngâm cá vào môi trường có chứa 107 CFU/mL vi khuẩn (tương ứng với liều gây chết 50%). Kết quả thí nghiệm cho thấy sau 6 giờ thí nghiệm, vi khuẩn S. iniae đã được phát hiện ở mang cá. Sau 12 giờ thí nghiệm, vi khuẩn đã xâm nhập vào lách và thận. Sự xâm nhập của vi khuẩn vào mô ruột, mắt, não và gan chỉ xảy ra sau khi lách và thận cá đã bị vi khuẩn cảm nhiễm với số lượng lớn. Kết quả này chứng tỏ vi khuẩn S. iniae tồn tại trong môi trường xâm nhập vào cơ thể cá chẽm qua mang và gây cảm nhiễm hệ thống.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định độc lực và quá trình cảm nhiễm của vi khuẩn streptococcus iniae vào cá chẽm (lates calcarifer)Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sảnSố 2/2013THOÂNG BAÙO KHOA HOÏCXÁC ĐỊNH ĐỘC LỰC VÀ QUÁ TRÌNH CẢM NHIỄM CỦA VI KHUẨNStreptococcus iniae VÀO CÁ CHẼM (Lates calcarifer)INVESTIGATION FOR THE VIRULENCE AND THE ROUTE OF INFECTION OFStreptococcus iniae IN BARRAMUNDI (Lates calcarifer)Trần Vĩ Hích1, Nguyễn Hữu Dũng2Ngày nhận bài: 24/10/2012; Ngày phản biện thông qua: 27/11/2012; Ngày duyệt đăng: 15/5/2013TÓM TẮTViệc ứng dụng kĩ thuật mô hóa miễn dịch đã làm sáng tỏ cách cảm nhiễm của vi khuẩn Streptococcus iniae vào cơthể cá chẽm khi ngâm cá vào môi trường có chứa 107 CFU/mL vi khuẩn (tương ứng với liều gây chết 50%). Kết quả thínghiệm cho thấy sau 6 giờ thí nghiệm, vi khuẩn S. iniae đã được phát hiện ở mang cá. Sau 12 giờ thí nghiệm, vi khuẩn đãxâm nhập vào lách và thận. Sự xâm nhập của vi khuẩn vào mô ruột, mắt, não và gan chỉ xảy ra sau khi lách và thận cá đãbị vi khuẩn cảm nhiễm với số lượng lớn. Kết quả này chứng tỏ vi khuẩn S. iniae tồn tại trong môi trường xâm nhập vào cơthể cá chẽm qua mang và gây cảm nhiễm hệ thống.Từ khóa: Barramundi, S.iniae, con đường cảm nhiễmABTRACTThe application of immunohistochemistry technique has allowed to investigate the mode of infection of Streptococcusniae in barramundi. A bacterial dose of 107CFU/mL corresponding to the LD50 delivered to barramundi through bathexposure in 1 hour. The results showed that S. iniae was detected first in gill of fish at 6 hours after challenge (HAC).12 HAC the bacteria was detected at spleen and kidney of fish. The infection of S. iniae in the tissue of the intestine, eye,brain and liver was only revealed after the spleen and kidney were infected seriously. It is suggested that S. iniae infectionsin barramundi are systemic infections. The bacteria entered through the gill to cause the disease.Key words: Barramundi, S. iniae, route of infectionI. ĐẶT VẤN ĐỀThành công của những mô hình thử nghiệmnuôi cá chẽm ở các ao nuôi tôm hoang hóa đãkhẳng định cá chẽm là đối tượng nuôi mang lạihiệu quả kinh tế cao. Đặc biệt, từ năm 2005, khicá chẽm phi lê đã tìm được thị trường xuất khẩu,nghề nuôi cá chẽm đã phát triển nhanh chóng ởcác tỉnh Khánh Hòa, Cà Mau, Bến tre... và đưaViệt Nam trở thành một nước xuất khẩu cá chẽm.Tuy nhiên, cùng với sự phát triển của nghề nuôicá chẽm, dịch bệnh cũng đã bắt đầu xuất hiện trênđối tượng này và gây ra những thiệt hại nghiêmtrọng cho người nuôi, đặc biệt là dịch bệnh do12S.iniae gây ra. S.iniae được tìm thấy lần đầu tiênở cá heo nước ngọt (Inia geoffrensis) sau đó vikhuẩn này được tìm thấy ở nhiều loài cá nuôi khácnhư cá rô phi Oreochromis niloticus × O. aureus vàTilapia nilotica x T. aureahybrids, cá đù đỏ Sciaenopsocellatus, cá chẽm Lates calcarifer. Dấu hiệu củacá mắc bệnh do S.iniae gây ra khác nhau giữa cácloài nhưng thường có một số biểu hiện như bơimất định hướng, màu sắc cơ thể chuyển sậm, xuấthuyết ở thân, gốc vây, lồi mắt.Nghiên cứu này được thực hiện nhằm xác địnhcon đường cảm nhiễm của vi khuẩn S. iniae từ môitrường vào cá chẽm nuôi.ThS. Trần Vĩ Hích: Khoa Nuôi trồng thủy sản - Trường Đại học Nha TrangTS. Nguyễn Hữu Dũng: Trung tâm Nghiên cứu Giống và Dịch bệnh thủy sản - Trường Đại học Nha TrangTRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 3Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sảnII. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU1. Chuẩn bị vi khuẩn Streptococcus iniaeChủng vi khuẩn S.iniae VN091211R phân lậptừ cá chẽm Lates calcarifer nuôi trong hệ thốngmương nổi ở Khánh Hòa, được nuôi cấy tăng sinhtrong môi trường TSB bổ sung 2% NaCl đặt trong tủấm lắc đảo (180rpm) ở nhiệt độ 280C trong 24 giờ.Tế bào vi khuẩn sau khi thu hoạch được rửa 3 lầnbằng dụng dịch muối sinh lý đệm phosphate (PBS,pH 7.4) rồi pha loãng trở lại bằng PBS để đạt mậtđộ 109 CFU/ml. Mật độ vi khuẩn được xác định bằngphương pháp đo mật độ quang bằng máy đo quangphổ () và xác định lại bằng cách nuôi cấy trên đĩathạch TSA có bổ sung 2% NaCl.2. Chuẩn bị cá chẽm thí nghiệmCá chẽm (chiều dài thân 3,8 ± 0,2cm) dùng trongthí nghiệm này được sản xuất và ương nuôi thành cágiống tại Trung tâm Nghiên cứu Giống và Dịch bệnhthủy sản - Trường Đại học Nha Trang. Khỏe mạnh,không có tiền sử bệnh tật và đã thích nghi với bể nuôithí nghiệm từ giai đoạn cá hương cho đến khi bắt đầusử dụng cho hoạt động nghiên cứu.3. Bố trí thí nghiệm xác định độc lực của vi khuẩnThí nghiệm được bố trí với 7 nghiệm thức, mỗinghiệm thức gồm 40 cá chẽm đã được chuẩn bị ởmục 2 nuôi trong bể composite 1000L chứa 500Lnước biển có độ mặn 30ppt. Tất cả cá thí nghiệmđược ngâm vào các xô chứa 2L nước biển có chứavi khuẩn S. iniae với mật độ tăng dần từ 103 CFU/mLcho nghiệm thức 1 đến 108 CFU/mL cho nghiệm thức6 trong 1 giờ trước khi đưa lại bể nuôi 500L. Ở nghiệmthức đối chứng, cá cũng được đưa vào xô chứa 2Lnước biển trong 1 giờ trước khi đưa vào bể nuôi. Liềugây chết 50% được x ...