Xác định tỷ lệ nhiễm Adenovirus bằng kỹ thuật realtime PCR và một số đặc điểm dịch tễ ở trẻ em điều trị tại bệnh viện nhi Trung ương

Nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Xác định tỷ lệ nhiễm Adenovirus trong năm 2016 ở trẻ em điều trị tại Bệnh viện Nhi Trung ương và một số đặc điểm dịch tễ của trẻ có nhiễm Adenovirus. Nghiên cứu thưc hiện với 2409 trẻ có độ tuổi từ 1 tháng đến 15 tuổi điều trị tại các khoa lâm sàng Bệnh viện Nhi Trung ương. Sử dụng kỹ thuật real-time PCR trong việc xác định virut Adenovirus trong mẫu bệnh phẩm dịch hô hấp.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định tỷ lệ nhiễm Adenovirus bằng kỹ thuật realtime PCR và một số đặc điểm dịch tễ ở trẻ em điều trị tại bệnh viện nhi Trung ương TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM ADENOVIRUS BẰNG KỸ THUẬT REALTIME PCR VÀ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ Ở TRẺ EM ĐIỀU TRỊ TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG Phùng Thị Bích Thuỷ Bệnh viện Nhi Trung ương Viêm phổi, viêm phế quản phổi và nhiễm virut đường hô hấp cấp là nhóm bệnh phổ biến ở trẻ em, đặc biệt là trẻ dưới 5 tuổi. Đặc điểm lâm sàng chung là biểu hiện viêm đường hô hấp kèm theo các triệu chứng riêng biệt đặc trưng do từng virut gây ra. Bệnh do nhiễm Adenovirus là bệnh virut cấp tính với hội chứng lâm sàng đa dạng, các trường hợp viêm phổi do Adenovirus thường nặng, có tỷ lệ tử vong cao, đặc biệt ở trẻ em và người suy giảm miễn dịch. Chính vì vậy nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Xác định tỷ lệ nhiễm Adenovirus trong năm 2016 ở trẻ em điều trị tại Bệnh viện Nhi Trung ương và một số đặc điểm dịch tễ của trẻ có nhiễm Adenovirus. Nghiên cứu thưc hiện với 2409 trẻ có độ tuổi từ 1 tháng đến 15 tuổi điều trị tại các khoa lâm sàng Bệnh viện Nhi Trung ương. Sử dụng kỹ thuật real-time PCR trong việc xác định virut Adenovirus trong mẫu bệnh phẩm dịch hô hấp. Nghiên cứu đã phát hiện 428 trường hợp trẻ dương tính (17,8%). Nhóm tuổi có tỷ lệ cao nhất là trẻ từ 12 tháng đến 60 tháng (42,52%) trong đó đặc biệt trẻ từ 12 đến 24 tháng chiếm 19,15%. Tỷ lệ dương tính ở trẻ nam cao hơn trẻ nữ (64,95% so với 35,05%). Mùa hay gặp nhất là mùa thu đông với khí hậu lạnh và ẩm (60,04%). Đề tài nghiên cứu cho thấy tỷ lệ trẻ nhiễm virut Adenovirus chiếm đa số trong mùa thu đông ở nhóm trẻ từ 12 đến 60 tháng. Kỹ thuật real-time PCR phát hiện Adenovirus có giá trị trong chẩn đoán sớm trong bệnh phẩm lâm sàng thực hiện tại bệnh viện. Từ khoá: realtime PCR, Adenovirus, nhiễm trùng hô hấp trẻ em I. ĐẶT VẤN ĐỀ Virut là nguyên nhân gây viêm phổi, viêm phế quản phổi và nhiễm virut đường hô hấp cấp phổ biến ở trẻ em, đặc biệt là trẻ dưới 5 tuổi. Một phân tích cộng gộp dựa trên 51 nghiên cứu với 56.091 trẻ viêm phổi phải nhập viện cho thấy có 50,4% trường hợp xác định được căn nguyên là virut, trong đó ghi nhận 5,8% viêm phổi do virut Adenovirus [1]. Adenovirus là nhóm virut gây ra các bệnh về mắt, đường tiêu hoá, đường tiết niệu, ít gặp ở hệ thần kinh và đặc biệt phổ biến nhất là nhóm các bệnh về đường hô hấp. Tuy không phải tác nhân thường gặp nhưng các trường hợp này thường nặng, có tỷ lệ tử vong cao, để lại di chứng, đặc biệt ở trẻ nhỏ và người suy giảm miễn dịch [2; 3]. Di chứng xảy ra sau nhiễm trùng đường hô hấp do Adenovirus gồm: giãn phế quản, xơ hoá phổi mãn và viêm phổi. Đặc biệt, Adenovirus type 1, 3, 4, 7, 21 thường gây viêm tiểu phế quản tắc nghẽn (dẫn đến hội chứng phổi tăng sáng một bên hay hội chứng Swyer-James), đây cũng là tác nhân chính gây viêm phổi nặng tối cấp ở trẻ nhỏ. Nhiễm trùng đường hô hấp cấp tính do Adenovirus thường gặp vào thu (từ tháng 8 đến tháng 10), đông (tháng 11 đến tháng 1) và Địa chỉ liên hệ: Phùng Thị Bích Thủy, Bệnh viện Nhi đầu xuân (tháng 2 và 3) khi thời tiết giao mùa Trung ương với khí hậu lạnh, ẩm. Email: thuyphung.nhp@gmail.com Ngày nhận: 31/7/2018 Ngày được chấp thuận: 05/9/2018 TCNCYH 115 (6) - 2018 Hiện nay, chẩn đoán nhiễm Adenovirus có thể sử dụng một số phương pháp như nuôi 73 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC cấy tế bào, phát hiện kháng nguyên trực tiếp, hoặc real-time PCR. Hầu hết các type Adenovirus đều phát triển tốt khi nuôi cấy tế bào, tuy nhiên phương pháp này thường đòi hỏi từ 2 đến 7 ngày thường áp dụng ở các cơ sở nghiên cứu và do đó không thể giúp ích cho chẩn đoán căn nguyên sớm tại bệnh viện. Kỹ thuật miễn dịch thường phát hiện ở giai đoạn muộn sau 7 - 10 ngày nhiễm Adenovirus hạn chế trong chẩn đoán sớm. Real-time PCR là kỹ thuật sinh học phân tử cho kết quả nhanh (4 - 6 giờ) với độ nhạy, độ đặc hiệu cao (trên 97%) [4], có thể hỗ trợ các bác sĩ lâm sàng 2. Vật liệu và phương pháp Mẫu bệnh phẩm: Dịch tỵ hầu, dịch nội khí quản hoặc dịch rửa phế quản phế nang của bệnh nhi tại các khoa lâm sàng được chuyển tới khoa Nghiên cứu sinh học phân tử các bệnh truyền nhiễm để thực hiện xét nghiệm real time PCR Adenovvirus Mẫu dịch hô hấp sau khi thu thập được tiến hành tách chiết RNA/DNA tổng số (MagNA Pure LC Total Nucleic acid Isolation Kit- Roche) trên hệ thống máy tách chiết tự động MagNA Pure LC 2.0 (Roche). trong việc chẩn đoán sớm, mang lại hiệu quả Quá trình chạy real-time PCR được thực điều trị cao, giảm chi phí và thời gian nằm viện hiện trên hệ thống ABI 7500 Fast xác định cho người bệnh, đặc biệt ở đối tượng trẻ em. Adenovirus [5].Trình tự mồi xuôi: GCC ACG Chính vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu với các mục tiêu xác định Adenovirus trong mẫu bệnh phẩm dịch hô hấp của bệnh nhi bằng việc sử dụng kỹ thuật real-time PCR và tìm hiểu một số đặc điểm dịch tễ ở trẻ nhiễm Adenovirus điều trị tại Bệnh viện Nhi Trung ương. II. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP GTG GGG TTT CTA AAC TT, mồi ng ...