Ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật và chitosan đến quá trình nhân giống in vitro cây lan Cattleya mini

Bài viết Ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật và chitosan đến quá trình nhân giống in vitro cây lan Cattleya mini tiến hành khảo sát ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật (auxin, cytokinin) và chitosan lên sự tăng trưởng và nhân nhanh chồi của lan Cattleya mini.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật và chitosan đến quá trình nhân giống in vitro cây lan Cattleya mini ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG THỰC VẬT VÀ CHITOSAN ĐẾN QUÁ TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY LAN CATTLEYA MINI Nguyễn Trọng Nguyễn và Nguyễn Thị Xuân Đào* *Viện Khoa học Ứng dụng HUTECH, Trường Đại học Công nghệ TP. Hồ Chí Minh GVHD:: TS. Trịnh Thị Lan AnhTÓM TẮTTrong nghiên cứu này chúng tôi tiến hành khảo sát ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật(auxin, cytokinin) và chitosan lên sự tăng trưởng và nhân nhanh chồi của lan Cattleya mini. Kết quả chothấy việc bổ sung 1 mg/l BA kết hợp với 1,5 mg/l NAA mẫu cấy tăng trưởng và tạo chồi tối ưu sau 12 tuầnnuôi cấy. Khi bổ sung chitosan với nồng độ (0; 5; 10;15; 20; 25) vào môi trường nuôi cấy tối ưu thu đượckết quả cho thấy việc bổ sung chitosan ở nồng độ 0 mg/l thì mẫu cấy tăng trưởng và phát triển tối ưu vềtrọng lượng tươi, số chồi, số lá, hình thái của mẫu cấy, chất lượng chồi, thí nghiệm này cho thấy việc bổsung chitosan ở các nồng độ (5; 10;15; 20; 25) không phù hợp cho quá trình tạo chồi lan Cattlaya mini.Từ khóa: chất điều hòa sinh trưởng thực vật, nhân giống, Cattlaya mini, chitosan, tạo cây hoàn chỉnh.1. ĐẶT VẤN ĐỀCattleya là một giống lan đẹp nhất trong họ Orchidaceae, gồm nhiều loài xuất phát từ châu Mỹ, mặc dùBen tham và Hooker chỉ chấp nhận có khoảng 20 loài, nhưng con số này hiện nay tăng lên rất nhiều khoảng65 loài, chưa kể vô số cây lai. Được biết, Cattleya là một giống lan có nhiều cây lai nhất trong họ lan. Kíchthước hoa rất lớn với bề rộng 15 – 20 cm và hoa có màu sắc cực kỳ phong phú. Cattleya được gọi là Nữhoàng của loài hoa bởi vì hoa đã to mà hương sắc lại vẹn toàn, Queen of the flowers: (William Cattlye1818). Ngoài ra Cattleya có đặc tính là nở hoa quanh năm. Đa số hoa nở vào mùa Xuân và Thu nhưng cáccây đã lai ghép giống nở bất cứ lúc nào trong năm.Đặc biệt hiện nay dòng lan Cattleya mini đang được rất nhiều người ưa chuộng. Kích thước nhỏ, hươngthơm, nhiều màu sắc lạ hơn những dòng lan Cattleya phổ thông giúp tạo được nhiều ấn tượng trong lòngngười chơi lan. Đối với các nước có nền công nghiệp hoa lan phát triển mạnh như Thái Lan, Hà Lan, ĐàiLoan và Trung Quốc, lan nói chung và Cattleya nói riêng đều được đầu tư đi sâu nghiên cứu để không chỉtạo ra giò lan đẹp mà còn có giá cả cạnh tranh. Do đó việc giảm giá thành cây giống để cung cấp cho ngườisản xuất, mở rộng diện tích đang là vấn đề bức xúc hiện nay. Chính vì vậy để giải quyết vấn đề này tôi tiếnhành nghiên cứu đề tài này nhằm mục đích tìm hiểu rõ hơn về môi trường nuôi cấy. Mục tiêu của đề tàinày: Xác định nồng độ BA và NAA thích hợp nhất lên khả năng tạo chồi lan Cattleya mini, đánh giá hoạttính kích thích tạo chồi khi bổ sung chitosan trong môi trường nuôi cấy mô cây lan Cattleya mini.2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP2.1. Vật liệu 505Nguồn mẫu được sử dụng trong đề tài được tạo từ các chồi có chiều cao 5 mm, của giống phong lan Cattleyamini tại phòng thí nghiệm của Viện Khoa Học Ứng Dụng Hutech, Trường Đại Học Công Nghệ TP. Hồ ChíMinh.2.2. Môi trường nuôi cấyCác thí nghiệm sử dụng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật thường quy. Môi trường sử dụng trongthí nghiệm là môi trường MS (Murashige và Shoog, 1962), tùy vào từng giai đoạn nuôi cấy mà các hóachất khác nhau, các chất điều hòa sinh trưởng khác nhau được sử dụng riêng lẻ hoặc kết hợp. Các chất bổsung bao gồm: chất điều hòa sinh trưởng thực vật: 2,4-D, NAA (naphatalenacetic acid), BA (6-Benzyl-aminopurine); chitosan (là một polysaccharide mạch thẳng được cấu tạo từ các D-glucosamine và N-Glucosamine liên kết tại vị trí β-(1-4) được sản xuất từ quá trình xử lý vỏ các loài giáp xác: tôm, cua,...),agar, nguồn carbon: sucrose; nước dừa.2.3. Phương pháp2.3.1. Điều kiện thí nghiệmĐể đảm bảo điều kiện vô trùng, các thí nghiệm được thực hiện trong phòng nuôi riêng với các điều kiện:nhiệt độ: 25 ± 2oC; cường độ sáng: 2500 – 3000 lux; thời gian chiếu sáng: 16 giờ/ngày; độ ẩm trung bình:85 – 90%.2.3.2. Bố trí thí nghiệm2.3.2.1. Khảo sát ảnh hưởng của BA kết hợp với nồng độ cố định của NAA lên sự tạo chồi lan CattleyaminiBảng 1: Bố trí nghiệm thức kết hợp BA với nồng độ cố định của NAA lên sự tạo chồi lan Cattleya mini BA (mg/l) NAA (mg/l) Nghiệm thức 0 A0 0,5 A1 0,5 1,0 ...