Bài giảng Nuôi cấy tế bào động vật – Kĩ thuật và ứng dụng: Bài 2 – TS. Vũ Bích Ngọc (2017)

Mời các bạn cùng tham khảo "Bài giảng Nuôi cấy tế bào động vật – Kĩ thuật và ứng dụng: Bài 2 – TS. Vũ Bích Ngọc (2017)" để nắm chi tiết các nội dung về sinh học của tế bào động vật; đặc điểm sinh học của tế bào; các yếu tố ảnh hưởng đến sự thành công của nuôi cấy tế bào.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Nuôi cấy tế bào động vật – Kĩ thuật và ứng dụng: Bài 2 – TS. Vũ Bích Ngọc (2017)10/1/17 TS.VũBíchNgọc-vbngoc@hcmus.edu.vn 1 SINH HỌC CỦA TẾ BÀO ĐỘNG VẬT Đặcđiểmsinhhọccủa tếbào Cácyếutốảnhhưởng đếnsựthànhcôngcủa nuôicấytếbào10/1/17 TS.VũBíchNgọc-vbngoc@hcmus.edu.vn ĐẶC ĐIỂM CỦA TẾ BÀO ĐỘNG VẬT Tăngtrưởng,phânchiachậm(20-40giờ) HiệusuấtsinhchấtcóhoạtcnhsinhhọcthấpTínhcơhọcyếu(dễvỡ)10/1/17 TS.VũBíchNgọc-vbngoc@hcmus.edu.vn ChukìtếbàoG2 check point Metaphase check point•  DNA replicated M •  chromosome align on spindle•  cell big Mitosis•  environment suitable G2 Gap2 G1 Gap1 G0 S G1 check point Synthesis •  cell big •  environment suitable 4 Chukìtếbào•  Interphase: –  Nhìnchungkéodàitừ12-14giờtrongmôđộngvậtcóvú –  TếbàođangtổnghợpRNA,tạoproteinvàpháttriểnvềkíchthước •  Gap0(G0):tếbàothoátrakhỏichukìtếbàovàkhôngphânchia •  Gap1(G1):tếbàogiatăngkíchthước,tổnghợpRNAvàprotein,có1G1 Checkpoint •  SPhase:sựnhânđôiDNAxảyra •  Gap2(G2):tếbàosẽcếptụcpháttriểnvàsảnxuấtcácproteinmới.Có1G2 Checkpoint•  MitosishayMPhase: –  Sựpháttriểnvàtổnghợpprotein –  Tếbàochiathành2tếbàogiốngnhau. –  Mitosisthườngxảyratừ1-2giờ –  CóCheckpointtronggiữakìcủaMitosis(MetaphaseCheckpoint)đểđảmbảo tếbàohoànthànhxongsựphânchia. 5 Chukìtếbào•  Làđiểmquantrọngquyết địnhsựphânchiacủatê sbaof•  Khitếbàovượtquađiểm này,đivàophaseS,quátrình phânchiakhôngthểđảo ngược.Chukìtếbào•  Đảmbảotếbàophânchia thuậnlợi•  Nếutếbàobịlỗihoặctổn thương,G”checkpointsẽ dừnglạiđểsửachữa•  Nếutổnthươngkhôngthể đảongược,tếbàođivào quátrìnhapoptosisàđảm bảoDNAhưhỏngtếbào khôngtruyềnchothếhệ sauàquantrọngtrongngăn ngừaungthưChukìtếbào SỰTĂNGSINHINVITRO•  SựTĂNGSINHcủatếbàotrongnuôicấyphụthuộc: –  Trạngtháitựnhiêncủatếbào: •  Vaitròcủabộgen–GiớihạnHayflick •  Vaitròcủasựbiểuhiệngen –  Môitrườngnuôicấy •  Cơchấttếbàobám •  Thànhsinhlívàsinhhoácủamôitrườngnuôi •  Thànhphầncủaphasekhí •  Nhiệtđộnuôi •  Tươngtáctếbào-tếbàovàtếbào-chấtnền 9 ThờigiannhânđôicủarBMMSCkhôngthayđổi trongsuốtquátrìnhnuôitrongkhiởhASC,rASC, hBMMSCthờigiannàytănggấp2 IzadpanahR,TryggC,PatelB,etal.BiologicProperŠesofMesenchymalStemCellsDerivedFromBoneMarrowandAdiposeTissue.Journalofcellularbiochemistry.2006;99(5):1285Thayđổikiểugenvàkiểuhình Dunghợp,biếnnạp,tảinạp…àtế bàothayđổikiểugenvàkiểuhình •  Ởmỗitếbàophânchia, sựtựlàmmớivàbiệthoá đượcquyếtđịnhbởi tươngtáccủayếutốbên trongvàcnhiệuhướng dẫnhoặccnhiệuchọnlọc bênngoài Thayđổikiểugenvàkiểuhình•  MSCcủacácloàicókhảnăngbiệthoáthành tếbàomỡnhưnhauởpass5(6-8ngày)•  rASCvàhBMMSCthờigiantạogiọtmỡdài hơnởpass10;khôngcókhảnăngtạomỡsau pass15•  rBMMSCvàhASC:ítthayđổikhảnăngbiệt hoá,thờigianhìnhthànhgiọtmỡkhôngkhác nhauchođếnpass20 Thayđổikiểugenvàkiểuhình•  hASCvàrBMMSCbiệthoáthànhdòngtếbào tạoxươngtrongsuốtquátrìnhnuôicấy•  rASCvàhBMMSCmấtkhảnăngbiệthoá thànhdòngtếbàotạoxươngsaupass10 Thayđổikiểugenvàkiểuhình•  Chiềudàitelomeregiảmtheotuổi•  Hoạtcnhcủatelomerasecaonhấtởcácpass đầuŠên ...