Bài thuyết trình: Phản ứng Elisa

Định nghĩa Elisa, nguyên tắc Elisa, Có hai phương pháp xét nghiệm Elisa, các loại enzyme thường dùng là những nội dung chính trong "Bài thuyết trình: Phản ứng Elisa". Mời các bạn cùng tham khảo.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài thuyết trình: Phản ứng Elisa NHÓM 7 1. Bùi Thị  Hà 2. Nguyễn Thị Hà 3. Võ Thị Châu Hà 4. Bùi Ngọc Hạnh 5. Bùi Thị Phương Hạnh 6. Nguyễn Thị Bích Hạnh 7. Trần Tiến Hải 8. Trần Thanh Hoàng 9. Nguyễn Hóa 10. Đặng Ngọc Tuyết Phản ứng  Elisa Định nghĩa: ELISA ( Enzyme­Linked  ImmunoSorbent Assay_ Xét nghiệm hấp  thu miễn dịch liên kết với enzyme) dựa  trên sự kết hợp giữa kháng nguyên và  kháng thể đặc hiệu, phản ứng tạo sản  phẩm có màu hay phát sáng. Trong đó  tính chất họat hóa của enzyme và độ  đặc hiệu của kháng thể là không đổi. Nguyên tắc: Sử dụng KT đơn dòng(Mabs) phủ  bề mặt những đĩa giếng. Nếu có sự  hiện diện của KN trong mẫu,KN sẽ  tạo phức hợp với KT cố định trên  giếng và KT tự do có gắn enzyme tạo  thành  một phức hợp  kép(sandwich).Khi bổ sung cơ chất đặc  hiệu của enzyme vào giếng,enzyme xúc  tác phản ứng thủy phân cơ chất để tạo  ra các sản phẩm có màu hay phát sáng. Ðĩa plastic sử dụng để tiến hành xét nghiệm ELISA Có hai phương pháp xét nghiệm  ELISA:  Phương pháp ELISA gián tiếp(indirect  ELISA): dùng để phát hiện kháng thể chuyên  biệt trong huyết thanh    Phương pháp ELISA trực tiếp( direct  ELISA): dùng để phát hiện kháng nguyên  trong mẫu xét nghiệm. Các loại enzyme thường dùng:  Alkaline phosphatase  Peroxydase  Glucoxydase  β­galactosidase ỨNG DỤNG TRONG THỰC PHẨM :  Phương pháp Elisa có thể phát hiện và định lượng vi  sinh trong thực phẩm trong thời gian vài giờ sau khi  tăng sinh.  Phát hiện độc tố trong tảo.  Phát hiện vi khuẩn E.coli, Salmonella,   Staphylococcus aureus,sán lá gan… trong thực phẩm.  Phát hiện chất chloramphenicol (chất không được  phép có trong tôm, cá và các sản phẩm thuỷ sản  khác)   Kiểm tra dư lượng kháng sinh trong thực phẩm,tàn  dư thuốc diệt cỏ,thuốc trừ sâu… TRONG Y HỌC:  Là một trong các kĩ thuật xét nghiệm HIV  nhằm phát hiện kháng nguyên p24.  Chuẩn đóan và điều trị bệnh viêm gan siêu vi  B và C,bệnh ung thư.  Ứng dụng để phát hiện bệnh A. cantonensis  (bệnh viêm màng não) do loại giun kí sinh ở  phổi chuột gây ra.  Xác định tỉ lệ nhiễm kí sinh trùng sốt rét ở  miền Trung­Tây Nguyên. Đối với cây trồng, vật nuôi  Chuẩn đoán bệnh Tristeza(tác nhân gây bệnh héo  rũ) trên cây cam quýt.  Giám định sự hiện diện của BBTV(Banana  Bunchy Top Virus) gây bệnh chùn đọt chuối.  Phát hiện kháng thể chống Mycoplasma  hyopnewmonia(MH) ở heo. bộ KIT Elisa. Thí nghiệm kiểm tra sốt dengue bằng bộ KIT Elisa. ELISA Activity The ELISA Method Partially purified, inactivated HIV antigens pre­coated onto an ELISA plate Patient serum which contains antibodies. If the patient is HIV+, then this  serum will contain antibodies to HIV, and those antibodies will bind to  the HIV antigens on the plate.  Anti­human immunoglobulin coupled to an enzyme. This is the second  antibody, and it binds to human antibodies. Chromogen or substrate which changes color when cleaved by the  enzyme attached to the second antibody. Positive ELISA Test  Negative ELISA Test  Ưu điểm:  Ưu điểm quan trọng nhất của phương pháp ELISA  là độ nhạy cao, có thể phát hiện được phức hợp  nhỏ KN_KT, cho phép phát hiện sớm tác nhân gây  bệnh ở giai đoạn sớm khi mầm bệnh mới xâm  nhiễm.  Nhanh,thao tác đơn giản.  Rẻ tiền, ít tốn sinh phẩm,hóa chất,số lượng mẫu  lớn, rất thích hợp với việc phân tích đối với nguyên  liệu thô. Nhược điểm: độ chính xác không cao Tài liệu tham khảo  Nguyễn Lân Dũng.1997.Vi sinh vật học.Nxb GD.  Glick BR, Jackj P. 1994. Molecular Biotechnology.  ASM Press. Washington D.C. USA.  Chopra VL, Anwan N. 1990. Genetic Engineering  and Biotechnology. Oxford and IBH Publishing  CO.PVT, Ltd. UK.  Một số đề tài của giáo viên và sinh viên trường ĐH  Nông Lâm.  www.sinhhocvietnam.com   http://elearning.hueuni.edu   www.genprice.com THE END