Báo cáo y học: BIỆT HÓA TẾ BÀO GèC MÁU CUỐNG RỐN NGƯỜI THÀNH NGUYÊN BÀO XƯƠNG

T Máu cuống rốn (MCR) người chứa một nguồn tế bào gốc (TBG) có khả năng biệt hóa thành một số kiểu tế bào khác nhau của cơ thể. Chúng tôi nghiên cứu một phương pháp thu nhận, phân lập và biệt hóa những TBG này thành nguyên bào xương để có thể ứng dụng trong lĩnh vực y học tái tạo, đặc biệt là trong công nghệ mô ghép xương. §ã phân lập những tế bào đơn nhân từ MCR bằng dung dịch ly giảihồng cầu và ficoll - hypaque. Tế bào được cảm ứng tạo xương bằng cách...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Báo cáo y học: "BIỆT HÓA TẾ BÀO GèC MÁU CUỐNG RỐN NGƯỜI THÀNH NGUYÊN BÀO XƯƠNG" BIỆT HÓA TẾ BÀO GèC MÁU CUỐNG RỐN NGƯỜI THÀNH NGUYÊN BÀO XƯƠNG Trần Công Toại*; Huỳnh Duy Thảo*; Phan Kim Ngọc**; Nguyễn Phương Thảo*TÓM TẮT Máu cuống rốn (MCR) người chứa một nguồn tếbào gốc (TBG) có khả năng biệt hóa thành một sốkiểu tế bào khác nhau của cơ thể. Chúng tôi nghiêncứu một phương pháp thu nhận, phân lập và biệt hóanhững TBG này thành nguyên bào xương để có thểứng dụng trong lĩnh vực y học tái tạo, đặc biệt làtrong công nghệ mô ghép xương. §ã phân lập nhữngtế bào đơn nhân từ MCR bằng dung dịch ly giảihồng cầu và ficoll - hypaque. Tế bào được cảm ứngtạo xương bằng cách nuôi trong môi trường IMDMvới 15% FCS và bổ sung dexamethasone, ascorbicacid, β - glycerol phosphate, vitamin D2 và FGF - 9.Tế bào có những thay đổi về hình thái giống với tếbào xương. Kết quả nhuộm dương tính với Alizarinred, Von kossa và alkaline phosphatase. Kết quảchạy RT - PCR dương tính với osteopontin vàosteocalcin. §ã xây dựng được qui trình thu nhận,phân lập và biệt hóa TBG từ máu cuống rốn ngườithành nguyên bào xương. * Từ khóa: Máu cuống rốn; Tế bào gốc; Biệt hóatạo xương; Osteopontin; Osteocalcin. DIFFERENTIATion of HUMAN UMBILICAL CORD BLOOD STEM CELLS INTO OSTEOBLASTIC LINEAGE CELLS Tran Cong Toai; Huynh Duy Thao; PhanKim Ngoc; Nguyen Phuong ThaoSUMMarY Human umbilical cord blood (UCB) is anincredible source of stem cells which are able todifferentiate into many kind of cells of the body. Ourteam has developed a procedure to collect, isolate,and differentiate UCB stem cells into osteoblast forapplication in regenerative medicine especial forbone tissue engineering. We have isolatedmononuclear cells from umbilical cord blood byerythrolysis solution and ficoll - hypaque solution.Mononuclear cells were induced into osteoblast byusing an osteogenic medium IMDM plus 15% FCS,dexamethasone, ascorbic acid, β - glycerolphosphate, vitamin D2 and FGF - 9. Cells started tochange shape, assuming the typical osteocyte likeshape. Cells were positive with Alizarin red stain,Von kossa stain, and alkaline phosphatase stain. RT- PCR for osteopontin and osteocalcin gene markerswere positive. We confirmed the validity of aprotocol regarding the isolation, culture anddifferentiation of UCB stem cells into osteoblasts. * Key words: Umbilical cord blood; Stem cells;Osteogenic differentiation; Osteopontin;Osteocalcin.* Tr-êng §¹i häc Y khoa Ph¹m Ngäc Th¹ch; ** §¹ihäc Khoa học Tự nhiênThành phố Hồ Chi MinhPh¶n biÖn khoa häc: GS. TS. Lª Gia Vinh ĐẶT VẤN ĐỀ Máu cuống rốn người thậm chí là cả đối với tếlà một nguồn mẫu rất dồi bào thần kinh… MCRdào nh-ng trước đây còn được sử dụng đểchưa được quan tâm điều trị một số bệnh vềnghiên cứu, bị bỏ đi và máu và hệ thống miễnđược xử lý như một loại dịch có liên quan đếnrác thải y tế. một số bệnh di truyền, MCR chứa nhiều dòng ung thư và những rốiTBG còn rất trẻ có khả loạn chức năng có liênnăng phân chia tốt, có thể quan về máu [1].biệt hóa thành một số Ngoài ra, ưu điểm củaloại tế bào khác nhau MCR là dễ thu nhận, sốnhư: nguyên bào xương lượng máu thu được[9, 11], nguyên bào sụn nhiều [7], khi thu nhận[9], tế bào mỡ [9], máu ảnh không gâynguyên bào sợi, nguyên hưởng đến sức khoẻ củabào cơ, tế bào gan và bà mẹ và bé [6]. Khi tiếnhành nghiên cứu và ứng VẬT LIỆU VÀdụng không gặp nhiều PHƯƠNG PHÁPkhó khăn, cản trở về mặt NGHI£N CøUđạo đức sinh học và luật 1. VËt liÖu nghiªnpháp như những nghiên cøu.cứu về TBG phôi người. Mẫu MCR thu nhận từMCR ngày càng được những sản phụ sinh tạinhiều người quan tâm Bệnh viện Hùng Vương,nghiên cứu và xem như phải đạt các tiêu chuẩnlà một nguồn cung cấp [2, 4]: các sản phụ đồngTBG thay thế cho nguồn ý cho MCR để nghiênTBG từ tủy xương và cứu, được theo dõi lâmmáu ngoại vi trong tương sàng, làm các xét nghiệmlai. trước sinh. Thai được lấy trong khoảng 36 - 42 tuần tuổi. Thai nhi sinh ra khỏe mạnh, không dịtật bẩm sinh. Mẫu MCR Sử dụng hai phươngâm tính với các xét pháp khác nhau để phânnghiệm HIV, HBsAg, lập tế bào đơn nhân từ MCR. Sử dụng dunganti - HCV, VDRL. 2. Ph-¬ng ph¸p nghiªn dịch ficoll - hypaque (1,077g/ml, GEcøu. Healthcare BioSciences 2.1. Ph©n lËp tÕ bµo AB) và dung dịch ly giải®¬n nh©n tõ MCR: ...