Bảo quản tinh trùng cá basa, cá tra

Tham khảo tài liệu 'bảo quản tinh trùng cá basa, cá tra', nông - lâm - ngư, ngư nghiệp phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bảo quản tinh trùng cá basa, cá tra I. PHÖÔNG PHAÙP BAÛO QUAÛN TINH TRUØNG CAÙ TRA VAØ BA SA DAØI NGAØY BAÈNG NITÔ LOÛNG a/ Thí nghieäm: Ñaùnh giaù söï vaän ñoäng tinh truøng baûo quaûn trong Nitô loûng. Qui trình baûo quaûn tinh truøng ñöôïc trình baøy caùc böôùc sau. Tinh truøng sau khi ñöôïc vuoát Pha loaõng tæ leä 1: 10 Dung dòch coá ñònh Chaát baûo veä ôû noàng ñoä 5-20% Thôøi gian caân baèng 10 phuùt Cho vaøo oáng nhöïa 0,5mL Ñoâng laïnh ôû toác ñoä haï nhieät 5-70C ñat ñeán –800C Thaû tröïc tieáp vaøo bình Nitô loûng Sau 3 thaùng baûo quaûn Ñaùnh giaù chaát löôïng tinh 1 Vôùi chaát baûo veä laø - Dimethyl sulfoxide (DMSO) (theo Tiersch vaø ctv., 1994) - Glycerol (G) (Theo Tiersch vaø ctv., 1994) - Methanol (M) (theo Tiersch vaø ctv., 1994). Vaø ôû 4 noàng ñoä: 5%, 10%, 15%, 20%. II. KEÁT QUAÛ VAØ THAÛO LUAÄN A. Keát Quaû Caù Tra 1. Phöông phaùp baûo quaûn ngaén ngaøy tinh truøng caù tra Pagasius hypophthalmus Tinh truøng ñöôïc vuoát ra khoûi caù ñöïc vaø chæ hoaït ñoäng khi ñöôïc tieáp xuùc vôùi nöôùc. Söï thuï tinh giöõa tinh truøng vaø tröùng dieãn ra raát nhanh trong voøng vaøi giaây sau khi tinh truøng hoaït ñoäng. Ñeå baûo quaûn tinh truøng sau khi rôøi khoûi cô theå, tieán haønh tröõ tinh truøng trong caùc dung dòch coá ñònh. Chuùng toâi söû duïng boán dung dòch coá ñònh tinh truøng. Ñoù laø dung dòch nöôùc muoái sinh lyù NaCl 0,9%, dung dòch HBSS (dung dòch muoái caân baèng Hank), dung dòch CF-HBSS (dung dòch muoái caâng baèng Hank khoâng chöùa Calcium) vaø dung dòch ñeäm Tris (goàm NaCl 0,9% vaø pH=7), vôùi tyû leä pha loaõng giöõa tinh vaø dung dòch coá ñònh tinh truøng laø 1:10, tröõ ôû nhieät ñoä 4-100C. Ñeå ñaùnh giaù chaát löôïng tinh truøng baûo quaûn thay ñoåi theo thôøi gian vaø dung dòch coá ñònh, thoâng qua chæ tieâu ñaùnh giaù phaàn traêm vaän ñoäng tinh truøng, thôøi gian tinh truøng vaän ñoäng, kieåu tinh truøng vaän ñoäng cuõng nhö ñaùnh giaù qua tyû leä thuï tinh, tyû leä nôû, tyû leä soáng vaø tæ leä dò hình. 2. Ñaùnh giaù söï vaän ñoäng tinh truøng theo thôøi gian baûo quaûn Söï vaän ñoäng tinh truøng ñöôïc baûo quaûn trong caùc dung dòch coá ñònh thay ñoåi theo thôøi gian baûo quaûn töø 12 giôø ñeán 96 giôø. Keát quaû ñöôïc trình baøy ôû baûng 1 Theo keát quaû baûng 4.1, phaàn traêm tinh truøng vaän ñoäng giaûm daàn theo thôøi gian baûo quaûn vaø cuõng thay ñoåi theo dung dòch coá ñònh tinh truøng. Keát quaû thí nghieäm cho thaáy ôû thôøi gian baûo quaûn 24 giôø, phaàn traêm vaän ñoäng tinh truøng baûo quaûn trong dung dòch coá ñònh Tris so vôùi phaàn traêm vaän ñoäng tinh truøng ñoái chöùng (100%) thì khoâng sai khaùc. Traùi laïi, caùc dung dòch coá ñònh tinh truøng coøn laïi cho thaáy phaàn traêm tinh truøng vaän ñoäng coøn laïi 63,3- 73,3% so vôùi ñoái chöùng coù söï sai khaùc. Vaäy ôû thôøi gian baûo quaûn 24 giôø thì dung dòch coá ñònh Tris giuùp tinh truøng vaän ñoäng toát nhaát. Tinh truøng baûo quaûn sau thôøi gian 48 giôø baét ñaàu coù söï thay ñoåi khaù roõ. Trong dung dòch coá ñònh HBSS, phaàn traêm tinh truøng vaän ñoäng baèng khoâng, nghóa laø söï soáng cuûa chuùng khoâng coøn nöõa. Tuy nhieân, ñoái vôùi dung dòch coá ñònh CF-HBSS, Tris vaø nöôùc muoái sinh lyù NaCl 0,9% thì keát quaû thí nghieäm cho thaáy phaàn traêm vaän ñoäng tinh truøng baûo quaûn coøn 2 toát, maëc duø so vôùi ñoái chöùng (100%) thì ñaõ giaûm khaù nhieàu. Cuï theå nhö dung dòch Tris (43,3%), CF-HBSS (36,7%) vaø dung dòch NaCl (50,0%). Ñeán thôøi gian baûo quaûn sau 72 giôø, phaàn traêm vaän ñoäng tinh truøng baûo quaûn trong caùc dung dòch coá ñònh giaûm raát nhieàu. Cuï theå nhö dung dòch coá ñònh Tris(26,7%), dung dòch CF-HBSS vaø NaCl (13,3%), roài ñeán HBSS (baèng khoâng). Thôøi gian baûo quaûn tinh truøng caøng keùo daøi thì phaàn traêm tinh truøng vaän ñoäng caøng giaûm. Ñeán thôøi gian baûo quaûn 96 giôø, chæ coøn khoaûng 10% tinh truøng vaän ñoäng ñöôïc baûo quaûn trong dung dòch coá ñònh Tris vaø NaCl 0,9%. Nhaän xeùt thaáy raèng, chaát löôïng tinh truøng thoâng qua chæ tieâu ñaùnh giaù phaàn traêm tinh truøng vaän ñoäng trong ñieàu kieän khoâng cung caáp oxygen vaø thuoác khaùng sinh, 50% tinh truøng coøn soáng vaø vaän ñoäng sau 48 giôø trong dung dòch coá ñònh Tris vaø NaCl 0,9 ...