Chẩn đoán nguyên nhân di truyền gây bệnh thoái hóa cơ tủy bằng kỹ thuật multiplex ligation‐dependent probe amplification

Bài viết "Chẩn đoán nguyên nhân di truyền gây bệnh thoái hóa cơ tủy bằng kỹ thuật multiplex ligation‐dependent probe amplification" có nội dung với mục tiêu nghiên cứu ứng dụng kĩ thuật MLPA để xác định đột biến mất đoạn exon 7 và exon 8 của gen SMN1.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Chẩn đoán nguyên nhân di truyền gây bệnh thoái hóa cơ tủy bằng kỹ thuật multiplex ligation‐dependent probe amplificationYHọcTP.HồChíMinh*Tập17*PhụbảncủaSố4*2013NghiêncứuYhọcCHẨNĐOÁNNGUYÊNNHÂNDITRUYỀNGÂYBỆNHTHOÁIHÓACƠTỦYBẰNGKỸTHUẬTMULTIPLEXLIGATION‐DEPENDENTPROBEAMPLIFICATIONNguyễnThịBăngSương*,ĐỗThịThanhThủy*,DươngThịHuệ**,LêThịKhánhVân***,TrầnDiệpTuấn*.TÓMTẮTĐặt vấn đề: Bệnhthoáihóacơtủy(SpinalMuscularAtrophy:SMA)làbệnhditruyềndogenlặnnằmtrênnhiễmsắcthểthường.Khoảng94%trườnghợpbệnhnhânSMAbịmấtcảhaibảnsaocủagenSMN1còn6%bệnhnhânrơivàotrườnghợpmang1alleleSMN1bịđộtbiếnmấtđoạnvà1alleleSMN1bịđộtbiếnđiểm.Mục tiêu: Nghiên cứu ứng dụng kĩ thuật MLPA để xác định đột biến mất đoạn exon 7 và exon 8 của genSMN1.Đốitượngvàphươngphápnghiêncứu:50bệnhnhiđượcchẩnđoánmắcbệnhSMAdựavàocáctriệuchứnglâmsàngđiểnhình,DNAđượctáchchiếttừmáungoạivicủabệnhnhân.ThựchiệnphảnứngMLPAsửdụngkitSALSAMLPAP021‐A2củaHàLanđểpháthiệnđộtbiếnmấtđoạngenSMN1.Kếtquả:Pháthiệnđược33/50(chiếm66%)trườnghợpbệnhnhimangđộtbiếnmấtđoạngenSMN1đồnghợptử,08trườnghợp(chiếm16%)mangđộtbiếnmấtđoạngenSMN1dịhợptử.Kếtluận:ÁpdụngthànhcôngphươngphápMLPAtrongxácđịnhkiểuđộtbiếnmấtđoạnexon7,exon8củagenSMN1ởbệnhnhânđượcchẩnđoánSMA.Từkhóa:MLPA,thoáihóacơtủySMA,độtbiếngenSMN1,chẩnđoántrướcsinhbệnhSMA.ABSTRACTDETECTIONOFGENETICMUTATIONWHICHCAUSESSPINALMUSCULARATROPHYDISEASEBYMULTIPLEXLIGATION‐DEPENDENTAMPLIFICATIONPROBEMETHODENguyenThiBangSuong,DoThiThanhThuy,DuongThiHue,LeThiKhanhVan,TranDiepTuan.*YHocTP.HoChiMinh*Vol.17‐SupplementofNo4‐2013:36‐42Background:Spinalmuscularatrophy(SMA)isanautosomalrecessiveneuromusculardisorder,withanincidenceofabout1in10000livebirthsandwithacarrierfrequencyofabout1in50.Approximately94%ofSMApatientshaveahomozygotedeletionofexon7intheSMN1gene.Theremaining6%ofpatientshaveapointmutationsinonealleleandadeletionintheother.Objectives:WestudiedtheapplicationofMLPAtechniquetodiagnosedeletionmutationsinSMN1genecausespinalmuscularatrophydisease.Patients and Methods: Genomic DNA of 50 SMA patients were extracted from peripheral bloodleukocytesusingtheQiAgenkit.MLPAtechniquewasperformedtodetectdeletionmutationofSMN1gene.Results: There were 33/50 patients with deletion homozygous on SMN1 gene deletion, 08 patients haddeletionheterozygotes.Conclusion:ApplicationsuccessfullyofMLPAmethodinidentifydeletioninSMN1gene.Keywords:MLPA,SMA,SMN1,PrenataldiagnosisofSMA***KhoaSinh,ĐạihọcSưphạmThànhphốHồChíMinhĐạihọcYDượcThànhphốHồChíMinh***KhoaThầnKinh,BệnhviệnNhiĐồng2Tácgiảliênlạc:TS.BS.NguyễnThịBăngSương‐ĐT:0914007038‐Email:suongnguyenmd@gmail.com.ChuyênĐềĐiềuDưỡngKỹThuậtYHọc37NghiêncứuYhọcYHọcTP.HồChíMinh*Tập17*PhụbảncủaSố4*2013ĐẶTVẤNĐỀThoáihóacơtủy(SpinalMuscularAtrophy:SMA) là bệnh di truyền do gen lặn nằm trênnhiễmsắcthểthường,bệnhđượcmôtảđầutiênbởi nhà thần kinh học Guido Wernig (ngườiAustralia) vào năm 1891(9). Đây là một trongnhững bệnh thần kinh cơ di truyền hay gặpnhất.Tầnsuấtmắcbệnhkhoảng1/10.000vàtầnsuất người bình thường mang gen bệnh là1/50(2,5,6).Bệnhnhâncócáctriệuchứnglâmsàngnhưsau:giảmkhảnăngvậnđộngtiếntriểnvớicácđặctrưnglàyếucơđốixứnggốcchi,trươnglựccơgiảm,phảnxạgânxươnggiảmhoặcmất,lưỡi rung, biến dạng lồng ngực và cứng khớp.Trường hợp nặng, bệnh nhi chết trong vòngnămđầutiêncủacuộcđờidobiếnchứngviêmphổivàsuyhôhấp(4,9).NguyênnhânchínhgâybệnhSMAlàdođộtbiến gen SMN (survival motor neuron). genSMNnằmtrênnhánhdàicủanhiễmsắcthểsố5(5q13), gồm hai bản sao SMN1 và SMN2, haigen này có trình tự gần như giống nhau, chỉkhácnhauở5nucleotide(Hình1.B)(9).Hình1:SơđồvịtrícủagenSMNvàsựkhácnhaugiữahaigenSMN1vàSMN2A.CấutrúcvùnggenSMAgồm4gen:H4F5,SMN,NAIPvàp44c.B.NămvịtrínucleotidekhácnhaugiữahaigenSMN1vàSMN2.củagenSMN1còn6%bệnhnhânrơivàotrườngGen SMN quy định tổng hợp protein SMNhợp mang 1 allele SMN1 bị đột biến mất đoạnbiểu hiện chủ yếu ở các tế bào thần kinh vậnvà 1 allele SMN1 bị đột biến điểm(1,4,8). Nghiênđộngtủysống(spinalmotorneuron).CảhaigencứucủaOginoS.kếtluận94%bệnhnhânthoáiSMN1vàSMN2đềutổnghợpraproteintươnghóacơtủybịđộtbiếnmấtcảhai ...