Đánh giá HER2 trong ung thu vú bằng phương pháp lai tại chỗ huỳnh quang và lai tại chỗ gắn bạc

Mục tiêu của nghiên cứu này nhằm khảo sát đối chiếu kết quả D‐ISH với kết quả FISH (tiêu chuẩn vàng) để có thể phát triển thêm một kỹ thuật mới với nhiều ưu điểm hơn. Đây là kết quả bước đầu khi thực hiện phương pháp D‐ISH để khảo sát tình trạng gen HER2 trong ung thư vú.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đánh giá HER2 trong ung thu vú bằng phương pháp lai tại chỗ huỳnh quang và lai tại chỗ gắn bạc Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013  Nghiên cứu Y học ĐÁNH GIÁ HER2 TRONG UNG THU VÚ BẰNG PHƯƠNG PHÁP  LAI TẠI CHỖ HUỲNH QUANG VÀ LAI TẠI CHỖ GẮN BẠC  Đoàn Thị Phương Thảo*, Phan Đăng Anh Thư*, Hứa Thị Ngọc Hà*, Nguyễn Sào Trung*  TÓM TẮT  Giới  thiệu:  Tình trạng HER2 trong ung thư vú giữ vai trò rất quan trọng trong việc đưa ra quyết định  điều trị, giúp cho các nhà lâm sàng tiên đoán đáp ứng hóa trị liệu, có hoặc không đáp ứng nội tiết và là yếu tố chỉ  định  cho  điều  trị  kháng  thể  đơn  dòng  trastuzumab.  Phương  pháp  lai  tại  chỗ  huỳnh  quang  (FISH),  được  ASCO/CAP xác định là tiêu  chuẩn  vàng  để  khảo  sát  tình  trạng  HER2.  Bộ  môn  Giải  Phẫu  Bệnh  Đại  Học  Y  Dược triển khai phương pháp này từ năm 2009 đến nay. Tuy nhiên, để thực hiện phương pháp FISH đòi hỏi  phòng xét nghiệm phải rất chuyên biệt, phải có kính hiển vi huỳnh quang, hơn nữa thời gian lưu trữ tiêu bản  quá  ngắn  nên  không  thể  xem  xét  lại  khi  cần  thiết.  Song  song  với  phương  pháp  FISH,  từ  năm  2012  Bộ  môn  chúng tôi đã ứng dụng thêm phương pháp lai tại chỗ gắn bạc hai màu (D‐ISH), với phương pháp này các tiêu  bản được khảo sát dưới kính hiển vi quang học và đặc biệt tiêu bản có thể lưu trữ lâu dài. Phương pháp này cũng  đã được FDA chấp thuận cho khảo sát HER2 vào tháng 6/2011. Mục tiêu của nghiên cứu này, chúng tôi khảo  sát đối chiếu kết quả D‐ISH với kết quả FISH (tiêu chuẩn vàng) để có thể phát triển thêm một kỹ thuật mới với  nhiều  ưu  điểm  hơn.  Đây  là  kết  quả  bước  đầu  khi  thực  hiện  phương  pháp  D‐ISH  để  khảo  sát  tình  trạng  gen  HER2 trong ung thư vú.  Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Phương pháp lai tại chỗ huỳnh quang: dùng bộ kít PathVysion  HER‐2  DNA  Probe.  Phương pháp lai tại chỗ  gắn bạc (D‐ISH): dùng bộ  INFORM  HER2  Dual  ISH  DNA  Probe.  Dùng  trên  máy  nhuộm  tự  động.  Phương  pháp  Hóa  Mô  Miễn  Dịch:  bộ  Pathway  (Ventana  Medical  Systems Inc, Tucson, Ariz) dùng trên máy nhuộm tự động.  Kết quả: Khảo sát 67 mẫu ung thư vú xâm lấn, trong đó có 47 mẫu được thực hiện đồng thời D‐ISH,  FISH và HMMD. 20 mẫu thực hiện D‐ISH và HMMD. Tương hợp giữa kết quả của hai phương pháp lai  với kết quả HMMD gần như tuyệt đối trong nhóm HER2(‐) và HER2(3+), nhóm HER2(2+) thì tỉ lệ khuếch  đại  dưới  20%.  Tương  hợp  giữa  kết  quả  FISH  và  Kết  quả  D‐ISH  là  100%  cả  nhóm  không  khuếch  đại  và  khuếch đại gen HER2.  Kết  luận: Trong nghiên cứu này, sự phù hợp giữa IHC và D‐ISH, FISH là trung bình. Sự phù hợp  giữa kết quả FISH và D‐ISH là 100% cho cả trường hợp khuếch đại và không khuếch đại. Phương pháp D‐ ISH là phương pháp được chấp nhận để đánh giá HER2, kết quả nghiên cứu này đã cho thấy phương pháp  D‐ISH  có  thể  xác  định  được  tình  trạng  HER2  với  tỉ  lệ  tương  hợp  hai  kết  quả  FISH  và  D‐ISH  là  100%.  Ngoài ra, xét nghiệm D‐ISH dễ sử dụng vì khảo sát được dưới kính hiển quang học, tín hiệu màu không  phân hủy theo thời gian, mẫu có thể được lưu trữ ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài. Phương pháp FISH  hoặc D‐ISH nên được thực hiện cho tất cả các bệnh nhân cần điều trị bằng trastuzumab.  Từ  khóa:  hóa  mô  miễn  dịch,  lai  tại  chỗ  huỳnh  quang  (FISH),  lai  tại  chỗ  gắn  bạc  hai  màu  (D‐ISH),  HER2.  *Bộ Môn Giải Phẫu Bệnh – Đại Học Y Dược TP.HCM  Tác giả liên lạc: TS Đoàn Thị Phương Thảo ĐT: 0938008418  Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh  Email: thaodtpdhyd@gmail.com  75 Nghiên cứu Y học  Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013 ABSTRACT  EVALUATION OF HER2 STATUS IN BREAST CANCER BY FLUORESCENCE IN SITU  HYBRIDIZATION, DUAL IN SITU HYBRIDIZATION AND IMMUNOHISTOCHEMICTRY  Doan Thi Phuong Thao, Hua Thi Ngoc Ha, Nguyen Sao Trung  * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ Supplement of No 3 ‐ 2013: 76 ‐ 82  Introduction: The application of FISH and D‐ISH methods to determine HER2 status in breast cancer in  order to provide the most accurate results for patients receiving treatment most appropriate.  Methods:  FISH:  Human  epidermal  growth  factor  receptor  2  (HER2)  fluorescence  in  situ  hybridization  (FISH) is a quantitative assay for selecting breast cancer patients for target therapy. D‐ISH: Our objective was to  apply  an  automated  dual  in  situ  hybridization  (D‐ISH)  application  for  HER2  gene  and  chromosome  17  centromere (CEN 17) in invasive breast carcinomas. (1) HER2 copies via silver in situ hybridisation (SISH) and  (2) Chromosome 17 (CEN17) copies via chromogenic Red in situ hybridisation (Red ISH) on a single slide. The  recognition  of  amplified  HER2  copies  which  may  require  microscopic  examination  using  objectives  as  high  as  40X to 60X.  Result: 67 invasive breast cancer samples performed simultaneously IHC and FISH or D‐ISH. Including 47  samples were carried out simultaneously D‐ISH, FISH and IHC. 20 samples performed simu ...