Góp phần khảo sát cơ chế di truyền của bệnh teo cơ tủy sống týp 1 (werdnig hoffmann)

Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 ở người lành mang gen bệnh werdnig-hoffmann. Nghiên cứu đưa ra kết quả này hỗ trợ cho quan điểm cho rằng mất đoạn (deletion) chứ không phải chuyển đổi đoạn (conversion) là cơ chế di truyền chính trong bệnh Werdnig-Hoffmann.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Góp phần khảo sát cơ chế di truyền của bệnh teo cơ tủy sống týp 1 (werdnig hoffmann)Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số 2 * 2008Nghiên cứu Y họcGÓP PHẦN KHẢO SÁT CƠ CHẾ DI TRUYỀNCỦA BỆNH TEO CƠ TỦY SỐNG TÝP I (WERDNIG-HOFFMANN)Trần Diệp Tuấn*TÓM TẮTMục tiêu: Xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 ở người lành mang gen bệnh Werdnig-Hoffmann.Phương pháp: Chúng tôi dùng phản ứng khuếch đại cạnh tranh tạo ra các sản phẩm PCR củaSMN1 và SMN2. Sau đó, làm đứt đoạn sản phẩm PCR của gen SMN bằng men Hinfl. Sản phẩm thuđược sẽ được chạy điện di trên gel, rồi scan bằng máy ảnh Polaroid dưới tia cực tím, và phân tích đậm độ(phần mềm 1.16/ppc NIH Image) đối với hai dãi band 101 bp (SMN2) và 78 bp (SMN1). Tỉ lệ genSMN1/SMN2 được xác định dựa trên tỉ lệ đậm độ của đoạn 78 bp/101 bp.Kết quả: 11 (73,3%) người có tỉ lệ SMN1/SMN2 là 0,5 và 1; bốn người còn lại (26,7%) có tỉ lệ là1/3.Kết luận: Kết quả này hỗ trợ cho quan điểm cho rằng mất đoạn (deletion) chứ không phải chuyển đổiđoạn (conversion) là cơ chế di truyền chính trong bệnh Werdnig-Hoffmann.ABSTRACTTHE GENE COPY RATIOS OF SMN1/SMN2 IN CARRIERSWITH TYPE I SPINAL MUSCULAR ATROPHYTran Diep Tuan * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 12 - No 2 - 2008: 75 – 80Objective: To determine the SMN1/SMN2 ratios of carriers of Werdnig-Hoffmann disease.Methods: We used competitive PCR to amplified SMN1 and SMN2 gene products. The PCRproducts were digested by Hinfl. The samples were run on gel, and scanned by Polaroid camera underUV-light. Densitometric analysis was performed on the two bands that correspond to the 101 bp fragmentof SMN2 and the 78 bp fragment of SMN1. The SMN1/SMN2 copy ratio was determined based on the 78bp/101 bp ratio obtained from densitometric analysis.Results: We found that the SMN1/SMN2 ratio was 0.5 or 1 in 11 (73.3%) carriers; the remaining 4(26.7%) carriers had an SMN1/SMN2 ratio of 1/3.Conclusion: The finding supports the idea that deletion rather than conversion is the main geneticevent in Werdnig-Hoffmann disease.đỡ, trong khi bệnh nhân SMA type III (bệnhKugelberg-Welander) thì có thể đi được.MỞĐẦUSMA type II là thể trung gian với sự yếu cơBệnh teo cơ tủy sống (SMA) là bệnh ditiến triển chậm hơn SMA type I. Tần số mắctruyền gen lặn trên nhiễm sắc thể thường,của SMA là 1 trên 10.000 lần sinh, với tần sốđặc trưng bởi sự yếu liệt và teo các cơ tiếnngười lành mang gen bệnh là 1/50(15). Gentriển do sự thoái hóa của các tế bào vậnSMN là gen gây bệnh SMA và được xácđộng ở sừng trước tủy sống. SMA gồm 3định là nằm trên nhiễm sắc thể 5q13(1,12).thể lâm sàng, phân loại được dựa trên thờiKhông liên quan đến mức độ trầm trọngđiểm khởi phát và mức độ trầm trọng củacủa bệnh, 90-98% các bệnh nhân SMA có sựbiểu hiện lâm sàng(13). Bệnh nhân SMA typemất đồng hợp tử của SMN1, do mất exon 7I (còn gọi là bệnh Werdnig-Hoffmann)hoặc 8 hoặc cả hai(6,10,16,22). Phần lớn bệnhkhông thể ngồi được nếu không được giúpnhân người Trung Quốc, Hàn Quốc và75* Bộ Môn Nhi, Đại Học Y Dược TPHCMNghiên cứu Y họcNhật có sự mất đồng hợp tử của exon 7 và 8của gen SMN1(2,8,18). Gen protein ức chế sựtự chết tế bào thần kinh (neuronal apoptosisinhibitory protein: NAIP) là gen nằm gầnvới gen SMN. Chúng bị mất đoạn trong50% bệnh nhân bị SMA type I(17). Tần suất bịmất gen NAIP trong bệnh SMA thể nhẹ xảyra ít hơn so với trong bệnh SMA type I, điềunày có lẽ phản ảnh mức độ rộng của sự mấtđoạn trên nhiễm sắc thể SMA(21,25). GenSMN là gen cần cho sự tồn tại và sống còncủa các tế bào thần kinh vận động tủy sống.Gen SMN gồm hai gen khá giống nhau, đólà SMN1 và SMN2 trên nhiễm sắc thể 5q13.Cả hai gen đều có độ dài khoảng 20 kbnhưng chỉ khác nhau có 5 nucleotide. Ởbệnh nhân bị SMA, có ít nhất một genSMN2 còn sót lại. Người bình thường cómột gen SMN1 và một gen SMN2 trên mỗinhiễm sắc thể, do đó, tỉ lệ SMN1/SMN2 là 1.Tỉ lệ gen SMN1/SMN2 ở cha mẹ của bệnhnhân đã được sử dụng để phân tích vai tròcủa số gen SMN2 trên độ nặng của bệnhSMA. McAndrew và cs, và Velasco và csnhận thấy rằng ở người Tây Ban Nha, Mỹvà Canada thì cha mẹ của bệnh nhân bịSMA type II và III có tỉ lệ SMN1/SMN2 nhỏhơn so với cha mẹ của bệnh nhân SMA typeI(11,22). Tuy nhiên, Schwartz và cs(20) lại khôngghi nhận hiện tượng này trong gia đìnhbệnh nhân người Scandinavi. Ngược lại,Nishio và cs lại ghi nhận tỉ lệ SMN1/SMN2bằng 2 ở hai trong số bốn người lành manggen bệnh, họ là cha mẹ của hai bệnh nhingười Nhật bị SMA type I(14). Tác giả tiênđoán rằng tần suất tỉ lệ SMN1/SMN2 là 2 ởngười lành mang gen bệnh trong dân Nhậtcao hơn so với dân phương Tây(14). Chúngtôi muốn tìm hiểu liệu tiên đoán này cóđúng không. Do đó, chúng tôi tiến hành xácđịnh tỉ lệ SMN1/SMN2 trên 15 người Nhậtlà người lành mang gen bệnh SMA type I.Để xác định tỉ lệ SMN1/SMN2, điều quantrọng là phải phân biệt được hai loại gennày. Chúng tôi dùng phản ứng khuếch đạicạnh tranh (competitive polymerase chainreaction: competitive PCR) bằng cách dùngY Học TP. ...