Hoàn thiện kỹ thuật tách dna từ các mẫu bệnh phẩm sinh học để xác định đột biến gen BRAF V600E

Mục đích nghiên cứu: Hoàn thiện kỹ thuật Realtime-PCR xác định đột biến gen BRAF V600E từ các mẫu bệnh phẩm bao gồm mẫu mô phủ parafin, mẫu mô tươi, mẫu dịch hút tế bào và mẫu máu ở bệnh nhân theo dõi chẩn đoán ung thư tuyến giáp.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Hoàn thiện kỹ thuật tách dna từ các mẫu bệnh phẩm sinh học để xác định đột biến gen BRAF V600E TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 490 - THÁNG 5 - SỐ 1 - 2020 HOÀN THIỆN KỸ THUẬT TÁCH DNA TỪ CÁC MẪU BỆNH PHẨM SINH HỌC ĐỂ XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN BRAF V600E Bùi Thị Lành*, Lê Anh Đức*, Bùi Minh Lý*, Đào Thị Luận* Nguyễn Quang Trung*, Nguyễn Xuân Hậu*, Nguyễn Thị Trang*TÓM TẮT samples were removed parafin by xylene, after that all of samples extracted DNA by Qiagen kit. We analyzed 59 BRAF là gen tổng hợp protein B-raf chịu trách BRAFV600E mutation from 21 patients who hadnhiệm kiểm soát hoạt động phát triển và phân chia anatomical diagnosis of papillary thyroid cancer, 21của nhiều loại tế bào trong cơ thể. Đột biến gen BRAF fresh tissue samples were taken during surgery fromlàm cho các tế bào bất thường này nhân lên một cách 21 patients with cytologic results monitoring thyroidkhông kiểm soát và hình thành ung thư. Theo nhiều cancer,22 fluid aspirated samplewere taken from 22nghiên cứu, đột biến tại codon 600 của exon 15 patients with suspected thyroid cancer who indicated(V600E) là đột biến phổ biến nhất trên gen BRAF. Đột needle aspiration and 16 blood samples were takenbiến này là nguyên nhân dẫn đến nhiều bệnh ung thư from 16 patients with other benign thyroid diseasestrong đó có ung thư tuyến giáp. Mục tiêu: Hoàn according to Realtime -PCR by BRAF V600E kitthiện kỹ thuật Realtime-PCR để xác định đột biến gen (Rusian). Results: The prevalence of BRAFBRAF V600E ở các mẫu bệnh phẩm bao gồm mẫu mô V600Emutation was 52,38% , 19,05%, 4,55% andphủ parafin, mẫu mô tươi, mẫu dịch hút tế bào và 0% fromparaffin-covered tissue sample,fresh tissuemẫu máu của bệnh nhân theo dõi chẩn đoán ung thư sample, fluid aspirated sampleand blood sampletuyến giáp. Đối tượng và phương pháp nghiên espectively. Conclusion: Complete techniques forcứu: 21 mẫu mô phủ parafin, 21 mẫu mô tươi, 22 DNA extraction from biological specimens formẫu dịch hút tế bào và 16 mẫu máu của bệnh nhân determination mutation V600E of gene BRAF.theo dõi chẩn đoán ung thư tuyến giáp. Sử dụng kỹ Keywords: Thyroid cancer, Realtime-PCR, BRAFthuật Realtime-PCR để xác định đột biến gen BRAF V600E.V600E từ các mẫu bệnh phẩm kể trên. Kết quả: Tỷ lệxuất hiện đột biến ở mẫu mô phủ parafin là 52,38%,; I. ĐẶT VẤN ĐỀmẫu mô tươi là 19,05%, mẫu dịch hút tế bào là4,55%, mẫu máu là 0%. Kết luận: Hoàn thiện thành Ung thư tuyến giáp (UTTG) biệt hóa là ungcông quy trình kỹ thuật Realtime-PCR để xác định đột thư phổ biến nhất của hệ thống nội tiết. Trongbiến gen BRAFV600E từ các mẫu bệnh phẩm gồm những thập kỷ gần đây, tỷ lệ mắc loại ung thưmẫu mô phủ parafin, mẫu mô tươi, mẫu dịch hút tế này đã tăng gấp 3 lần [1,2]. Loại mô học phổbào và mẫu máu ở bệnh nhân theo dõi chẩn đoán ung biến nhất của ung thư tuyến giáp biệt hóa,thư tuyến giáp. chiếm 80% -85% trong tất cả các trường hợp, là Từ khóa: Ung thư tuyến giáp, Realtime-PCR,BRAF V600E. ung thư tuyến giáp dạng nhú (PTC) [3]. PTC có tiên lượng rất tốt và tỷ lệ sống 5 năm cao; tuySUMMARY nhiên, một số bệnh nhân không đáp ứng với COMPLETE TECHNIQUES FOR DNA điều trị, cuối cùng dẫn đến tử vong. BRAF là một EXTRACTION FROM BIOLOGICAL phần của con đường tín hiệu tế bào MAPK, ngăn SPECIMENS FOR DETERMINATION chặn apoptosis và điều chỉnh sự tăng sinh cũng MUTATION V600E OF GENE BRAF như xâm lấn của khối u [3]. Trong các khuyến Background: BRAF gene is known as a tumor nghị mới nhất của Hiệp hội Tuyến giáp Hoa Kỳsuppressor gene in Thyroid cancer (TC), which plays arole in DNA repair. The mutation in BRAF have been (ATA), sự hiện diện của đột biến BRAF V600E làassociated with different types of cancer. The present một trong những yếu tố được tính đến trongstudy was aimed at studying the association between phân tầng nguy cơ của một nhóm lâm sàng PTCBRAF V600E mutation and TC.Object: Complete the tiên lượng xấu liên quan việc đáp ứng điều trịRealtime-PCR technique to identify the BRAF V600E I131 cũng như khả năng tái phát, di căn ở bệnhgene mutation in patient samples including paraffin- nhân UTTG [4]. Đột biến này còn được biết đếncovered tissue samples, fresh tissue samples, fluidaspirate samples and blood samples from patients là một trong những dấu ấn phân tử giúp chẩnfollowing ...