KẾT QUẢ BAN ĐẦU TRONG VIỆC SỬ DỤNG KỸ THUẬT PCR NHẰM ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG CÁC SẢN PHẨM BẮP CHUYỂN GENE TẠI VIỆT NAM

Bắp là một trong nhưng cây trồng đã thành công trong vấn đề chuyển nạp những gene mới bằng công nghệ tái tổ hợp di truyền. Tính đến năm 2000, đã có trên 10 triệu hecta bắp gieo trồng là bắp chuyển gene. Đối với cây trồng này, các gene được các nhà sản xuất đặc biệt lưu ý là các gene cho phép tạo ra tính đề kháng sâu đục thân [CryIA (b)] và gene tăng cường chuyển hóa đường [Invertase].
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
KẾT QUẢ BAN ĐẦU TRONG VIỆC SỬ DỤNG KỸ THUẬT PCR NHẰM ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG CÁC SẢN PHẨM BẮP CHUYỂN GENE TẠI VIỆT NAM KEÁT QUAÛ BAN ÑAÀU TRONG VIEÄC SÖÛ DUÏNG KYÕ THUAÄT PCR NHAÈM ÑAÙNH GIAÙ HIEÄN TRAÏNG CAÙC SAÛN PHAÅM BAÉP CHUYEÅN GENE TAÏI VIEÄT NAM PREVIOUS RESULTS ON SCREENING GM CORN IN THE IMPORTED PRODUCTS Buøi Minh Trí, Buøi Caùch Tuyeán Trung taâm phaân tích thí nghieäm Hoùa Sinh - Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. Hoà Chí Minh ÑT/Fax: 08.8972262SUMMARY Vietnam has imported a large amount of corn from foreign countries. It is so far not knownwhether the imported products are transgenic or not? This research used PCR based techniques inscreening corn that were imported from different countries during the second haft of the year 2002.The obtained results indicated that most of those products are transgenic. Furthermore, it is alsonoticeable that all analyzed samples were mixture of GM with non-GM corn. A calculation shown that30-90% of corn imported from China was modified with Invertase gene. The ratio for corn importedfrom Argentina and the USA were 20% and 10%, respectively. Bt corn was also detected in productsimported from Argentina.ÑAËT VAÁN ÑEÀ Baép laø moät trong nhöng caây troàng ñaõ thaønh coâng trong vaán ñeà chuyeån naïp nhöõng gene môùi baèngcoâng ngheä taùi toå hôïp di truyeàn. Tính ñeán naêm 2000, ñaõ coù treân 10 trieäu hecta baép gieo troàng laø baépchuyeån gene. Ñoái vôùi caây troàng naøy, caùc gene ñöôïc caùc nhaø saûn xuaát ñaëc bieät löu yù laø caùc gene chopheùp taïo ra tính ñeà khaùng saâu ñuïc thaân [CryIA (b)] vaø gene taêng cöôøng chuyeån hoùa ñöôøng[Invertase]. Vì caùc öu ñieåm veà hieäu quaû saûn xuaát neân baép chuyeån gene thöôøng coù giaù thaønh thaáp,tính caïnh tranh cao. Do ngaønh saûn xuaát baép trong nöôùc coøn chöa ñaùp öùng nhu caàu xaõ hoäi neân chuùngta phaûi nhaäp moät löôïng ñaùng keå caùc loaïi baép töø nhieàu nguoàn khaùc nhau trong ñoù ñaëc bieät laø töø caùcnöôùc coù troàng baép chuyeån gene. Tuy nhieân do caùc qui ñònh ñoái vôùi saûn phaåm bieán ñoåi di truyeàn chöañöôïc ban haønh do ñoù taát caû caùc saûn phaåm nhaäp khaåu chöa ñöôïc khai baùo hoaëc daùn nhaõn xaùc ñònhsaûn phaåm coù ñöôïc bieán ñoåi di truyeàn hay khoâng? Trong tình hình naøy, moät trong nhöõng vieäc caàn öutieân tieán haønh ñoù laø phaûi xaùc ñònh möùc ñoä hieän dieän cuûa caùc saûn phaåm caûi bieán di truyeàn treân thòtröôøng. Ñaây thöïc söï khoâng phaûi laø vaán ñeà ñôn giaûn, nhöng caàn phaûi baét tay tieán haønh bôûi vì neáuchaäm treã moïi ruûi ro ñeàu coù theå xaûy ra maø caùi giaù phaûi traû laø toaøn xaõ hoäi seõ phaûi gaùnh chòu. Ñeà taøinaøy ñaõ ñöôïc thöïc hieän nhaèm muïc ñích tìm hieåu hieän traïng vaø söï toàn taïi cuûa caùc saûn phaåm baép nhaäpkhaåu ñaëc bieät laø nhaèm tìm caâu traû lôøi cho söï toàn taïi cuûa hai gene cô baûn ñoù laø caùc gene Invertase vaøgene CryIA(b).VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙPCaùc hoaù chaát duøng trong chaån ñoaùn baép chuyeån genCaùc hoaù chaát duøng ñeå taùch chieát DNA bao goàm: DNA extract buffer vaø sarkosyl 10%; NaCl 5M; CTAB 10%; Chloroform/isoamyl alcohol (24:1);Phenol/chloroform/isoamyl alcohol (25:24:1); Isopropanol; Ethanol (70%) vaa2 TE 1X.Caùc hoaù chaát duøng cho phaûn öùng PCR bao goàm: Nöôùc caát 2 laàn; PCR buffer; MgCl2 dNTP/s; Taq DNA polymerase; Primer Gic vaø Primers Bt.Caùc hoùa chaát duøng cho ñieän di vaø ñoïc keát quaû bao goàm TAE 0,5%; Gel agarose 2%; Loading dye 6X; Ethidium bromide. Ngoaïi tröø caùc primers do coâng ty Genset (Singapore) toång hôïp vaø cung caáp, taát caùc caùc hoùa chaátkhaùc ñeàu do coâng ty Promega (Myõ) saûn xuaát vaø cung caáp.Trang thieát bò chính ñöôïc söû duïng bao goàm: Maùy nhaân baûn DNA (Biorad – Myõ); Maùy ñieän di (Cosmo Bio Co. - Nhaät ) vaø Maùy chuïp aûnh gel coùmaøn hình (Biorad – Myõ).Phöông phaùp laáy maãu Taát caû maãu tieán haønh nghieân cöùu ñeàu laø caùc saûn phaåm baép nhaäp khaåu trong naêm 2002 qua ñöôøngcaûng Saøi goøn. - Ñoái vôùi maãu boät: caân 0,5gr boät baép/maãu vaø tieán haønh treân 10 maãu. - Ñoái vôùi maãu haït: moãi saûn phaåm baép laáy ngaãu nhieân 10 haït (trung bình khoaûng 0,3 –0,4gr/haït). - Moãi maãu ñöôïc ñem ly trích ñeå laáy DNA. - Moãi maãu ñöôïc laëp laïi hai laàn khi phaân tích.Phöông phaùp tieán haønh chaån ñoaùn baép chuyeån genTaùch chieát DNADNA ñöôïc ly trích theo quy trình: - Böôùc 1: caân 0,5gr boät baép hoaëc laáy moät haït. - Böôùc 2: nghieàn maãu haït vôùi 3 ml dòch trích DNA (trong 3ml dòch trích DNA ñoù goàm 2,7mlDNA extract buffer vaø 0,3ml sakosyl 10%). - Böôùc 3: laáy phaàn dòch nghieàn cho vaøo eppendorf 1,5ml vaø ñem uû ôûû 55oC trong moät giôø. - Böôùc 4: ly taâm ôû 6000 voøng trong 10 phuùt ôû nhieät ñoä 10oC. - Böôùc 5: huùt phaàn dòch loûng ph ...