Khảo sát các đột biến trên gen meca và meci ở một số chủng staphylococcus aureus đề kháng methicillin

Mục tiêu nghiên cứu của đề tài này để giải trình tự và xác định đột biến trên gen mecA, mecI của một số chủng MRSA phân lập trênbệnh nhân tại bệnh viện đa khoa Sóc Trăng. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khảo sát các đột biến trên gen meca và meci ở một số chủng staphylococcus aureus đề kháng methicillinNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011KHẢO SÁT CÁC ĐỘT BIẾN TRÊN GEN MECA VÀ MECI Ở MỘT SỐCHỦNG STAPHYLOCOCCUS AUREUS ĐỀ KHÁNG METHICILLINBùi Minh Giao Long*, Mạnh Trường Lâm**, Vũ Thanh Thảo***, Trần Cát Đông***TÓM TẮTMở đầu: Không phải tất cả các chủng Staphylococcus aureus mang gen mecA đều có kiểu hình đề khángmethicillin. Sự hiện diện của gen mecI với vai trò ức chế hoạt động gen mecA đã được tìm thấy ở một số chủng.Các đột biến trên hai gen này có thể ảnh hưởng kiểu hình đề kháng, do đó cần phải được xác định để giải thích rõhơn về cơ chế đề kháng của vi khuẩn.Mục tiêu: Giải trình tự và xác định đột biến trên gen mecA, mecI của một số chủng MRSA phân lập trênbệnh nhân tại bệnh viện đa khoa Sóc Trăng.Phương pháp: Phân lập và định danh các chủng S.aureus bằng phương pháp thường quy tại bệnh viện.Thử nghiệm kháng sinh đồ với oxacillin để xác định kiểu hình đề kháng. Chiết tách ADN, thực hiện PCR với cáccặp mồi mecA và mecI. Giải trình tự sản phẩm PCR. Dùng phần mềm ClusterX 2.0.1. để phát hiện các đột biếnbằng cách so sánh với trình tự chủng chuẩn.Kết quả: Phân lập được 33 chủng S. aureus trong đó có 10 chủng có kiểu hình đề kháng và PCR dương tínhvới mecA, 23 chủng còn lại nhạy cảm với oxacillin và PCR âm tính với mecA. Trong số 10 chủng mang genmecA, xác định được 4 chủng mang gen mecI. Xác định được đột biến trên gen mecA ở 4 chủng (7, 16, 28 và 30).Chỉ xác định đột biến trên gen mecI ở 1 chủng (28). Các dạng đột biến này đều là đột biến điểm và chưa thấyđược công bố trước đây ngoại trừ dạng đột biến trên gen mecI.Kết luận: Tất cả chủng MRSA có kiểu hình đề kháng đều mang gen mecA. Các đột biến xác định được trêngen mecA và mecI không làm thay đổi kiểu hình.Từ khóa: MRSA, mecA, mecI, đột biến, đề kháng kháng sinh.ABSTRACTMUTATIONS IN mecA AND mecI GENES OF SOME MRSA STRAINS(METHICILLIN-RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS)Bui Minh Giao Long, Manh Truong Lam, Vu Thanh Thao, Tran Cat Dong* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 - Supplement of No 1 - 2011: 170 - 174Background: Not all mecA-positive Staphylococcus aureus strains have phenotypic resistance to methicillin. Thepresence of mecI coding for mecA repressor was found in some strains. Mutations in both genes may affect phenotypes,therefore to understand more thoroughly about the resistance mechanism these mutations need to be identified.Objectives: Sequencing and identifying mutations in mecA and mecI genes of some MRSA strains isolatedfrom patients in Hospital of Soctrang Province.Methods: S. aureus strains were isolated and identified by using the routine methods of hospital. Oxacillindisk agar diffusion was used to screen for strains having the resistance phenotype. DNA of theses strains wasextracted and used as templates for PCR. The PCR products were sequenced. The ClusterX 2.0.1.1 software wasused to detect genetic mutation by aligning the sequences of examined genes with those of the control strain.Bộ môn Dược Lâm Sàng, Khoa Dược, Đại học Y Dược TP.HCMKhoa Dược, Bệnh viện Đa khoa Sóc Trăng*** Phòng thí nghiệm Vi Sinh Công Nghệ Dược, Khoa Dược, Đại học Y Dược TP.HCMTác giả liên lạc: PGS. TS Trần Cát ĐôngĐT: 08. 38295641 – 127Email: trancdong@gmail.com***170Chuyên Đề Dược KhoaY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011Nghiên cứu Y họcResults: 33 strains of S. aureus were isolated and identified, among them, there were 10 strains having bothphenotypic and genotypic resistance. The 23 others were sensitive to oxacillin and mecA negative as well. Mutations inmecA were found in 4 strains (7, 16, 28 and 30) only one mecI mutation was identified in one strain (28). Thesemutations are point mutations and have not been reported in previously except the mecI mutation.Conclusion: In this study, all MRSA phenotypic strains possessed mecA gene. Mutations in mecA andmecI genes detected did not change the phenotype.Keywords: MRSA, mecA , mecI, mutation, antibiotic resistant.Taq polymerase (BioLabs), kit tinh chế sản phẩmĐẶT VẤN ĐỀPCR (Wizard SV gel & PCR clean-up system)Hiện nay, Staphylococcus aureus đề kháng(Promega).methicillin (MRSA) là nguyên nhân phổ biếnTrang thiết bị: máy UV-vis Genquant 1300,trong nhiễm trùng bệnh viện làm gia tăng tỉ lệtủ ấm Shellab, máy li tâm Sigma 3 – 18, máy luântử vong vì chúng đề kháng với hầu hết khángnhiệt Techne TC - 3000 G, bộ điện di ngang Biosinh họ β-lactam(11). Cơ chế đề kháng khángrad Mini-sub cell GT.sinh nhóm β-lactam gồm khả năng sản xuất βPhân lập và định danhlactamase của vi khuẩn và sự hiện diện củaCác chủng Staphylococcus aureus được phângen mecA trong đó cơ chế đề kháng do genlậptừ mẫu bệnh phẩm trong thời gian từ thángđược xem là quan trọng hơn và được nghiên06/2010 đến tháng 08/2010 tại Bệnh viện Sóccứu bởi một số tác giả(7,10). Gen mecA mã hóa ...