Khảo sát điều kiện nuôi cấy và thu nhận hoạt tính kháng candida albicans và MRSA từ các vi nấm nội sinh MĐ-TR1, MĐ-TR3 và trichoderma TT-L1

Nghiên cứu với mục tiêu nhằm khảo sát điều kiện nuôi cấy và thu nhận hoạt tính kháng candida albicans và MRSA từ các vi nấm MĐ-TR1, MĐ-TR3 và trichoderma TT-L1. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khảo sát điều kiện nuôi cấy và thu nhận hoạt tính kháng candida albicans và MRSA từ các vi nấm nội sinh MĐ-TR1, MĐ-TR3 và trichoderma TT-L1Nghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY VÀ THU NHẬN HOẠT TÍNHKHÁNG CANDIDA ALBICANS VÀ MRSA TỪ CÁC VI NẤM NỘI SINHMĐ-TR1, MĐ-TR3 VÀ TRICHODERMA TT-L1Nguyễn Văn Hải*, Nguyễn Đinh Nga*, Hà Vi*TÓM TẮTMục tiêu: Khảo sát điều kiện nuôi cấy và thu nhận hoạt tính kháng Candida albicans và MRSA từ các vinấm MĐ-TR1, MĐ-TR3 và Trichoderma TT-L1.Phương pháp: Khảo sát các điều kiện môi trường, thông khí, thời gian nuôi cấy thích hợp để các chủngnghiên cứu sản sinh hoạt chất tối đa. Chiết tách sản phẩm kháng khuẩn thô bằng cách lắc phân bố với các dungmôi có độ phân cực khác nhau và xác định MIC sản phẩm thô bằng phương pháp pha loãng. Bước đầu xác địnhđặc điểm của chất kháng khuẩn trên bảng mỏng sắc ký bằng kỷ thuật hiện hình sinh họcKết quả và bàn luận:Đã khảo sát và xác định điều kiện nuôi cấy cơ bản cho hai chủng Fusarium MD TR1, MD-TR3 đạt hiệu quảkháng vi sinh vật cao. Xác định được môi trường và điều kiện nuôi cấy tối ưu và tác động kháng khuẩn với phổtác động rộng của chiết xuất thô chiết từ môi trường nuôi cấy Trichoderma TT-L1.Từ khóa: Fusarium MD TR1, MD-TR3, Trichoderma TT-L1, Candida albicans, MRSAABSTRACTOPTIMIZATION OF CULTIVATION CONDITIONS OF FUSARIUM MĐ-TR1, MĐ-TR3AND TRICHODERMA TT-L1 TO PRODUCE ANTIMICROBIAL AGENTSAGAINST CANDIDA ALBICANS AND MRSANguyen Van Hai, Nguyen Dinh Nga, Ha Vi* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 - Supplement of No 2 - 2014: 246 - 250Objective: To optimize cultivation conditions of Fusarium MĐ-TR1, MĐ-TR3 and Trichoderma TT-L1 toproduce antimicrobial agents against Candida albicans and MRSAMethods: Study the best culturing conditions such as media, oxy concentration and time culturing ofendophytes in order to produce bioactivity compounds possesing high antimicrobial activities. Crudeantimicrobial extract was carried out by fractional distribution extract and determine MICs of the crudeantimicrobial products by the dilution method.Results: The cultural conditions of endophytes have been determined and the MICs of crude productsisolated from Trichoderma TT-L1 were studied. These products showed large spectrum activity against thestudied strains.Conclusion: The data suggest the further study of Trichoderma TT-L1 as a source that supplies newantimicrobial compounds.Key words: Fusarium MD TR1, MD-TR3, Trichoderma TT-L1, Candida albicans, MRSAtrong những nhóm vi sinh vật sống cộng sinhĐẶT VẤN ĐỀtrong mô sâu thực vật, các vi sinh vật nàyVi nấm nội sinh thực vật (VN-NS) là mộtthường được gọi bằng thuật ngữ endophyte(1).* Khoa Dược, Đại học Y Dược TP. Hồ Chí MinhTác giả liên lạc: ThS. Hà Vi ĐT: 0988344224Email: havikst@yahoo.com.vn246Chuyên Đề Dược HọcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014Một số vi sinh vật nội sinh thực vật có thể sảnxuất những chất biến dưỡng giúp cây chống lạicôn trùng và vi sinh vật gây hại. Nhiều tài liệunghiên cứu đã công bố về các chất biến dưỡngđã được ly trích từ vi sinh vật nội sinh cho cáctác động sinh học như kháng khuẩn, kháng nấm,kháng ký sinh trùng, kháng khối u và chống oxyhóa(3,5,2). Vì vậy, chúng đang là một trong cáchướng nghiên cứu chính giúp tìm các nhóm hợpchất mới có tác động sinh học.Từ 40 loài thực vật, thuộc 15 họ thực vật,bước đầu chúng tôi đã phân lập được các chủngMĐ-TR1; MĐ-TR3 và Trichoderma TT-L1 chohoạt tính kháng Candida albicans và MRSA(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus). Vìvậy trong phạm vi đề tài chúng tôi khảo sát cácđiều kiện nuôi cấy thích hợp để có thể thu đượchoạt chất cho tác động kháng khuẩn trên cácVẬT LIỆU -PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨUMãđềPhương pháp thử nghiệmChọn môi trường và điều kiện nuôi cấy cơ bảnCác chủng VNNS được nuôi cấy trên 3 môitrường cơ bản SDA, PDA, Czapek-Dox, ở cácđiều kiện lắc thông khí 150 v/phút hoặc tĩnh,khảo sát khả năng sản sinh hoạt chất kháng VSVtheo thời gian bằng phương pháp khuếch tán.Từ đó chọn môi trường và điều kiện nuôi cấy cơbản thích hợp.Khảo sát môi trường nuôi cấy tối ưuTrichoderma TT-L1Từ môi trường cơ bản Sabouraud, lần lượtthay đổi nguồn carbon, nguồn nitơ để cấu tạo lạimôi trường nuôi cấy cho lượng hoạt chất cao.được chiết xuất liên tục qua n-hexan vàChủng MĐ – TR1 và MĐ-TR3 được phân lậpcâynước cất ở nhiệt độ 121 oC trong 30 phút),..Chất kháng khuẩn có trong dịch nuôi cấyChủng vi nấm nội sinhrễđậu nành (100 g hạt đậu nành chiết xuất vớiChiết xuất và khảo sát tác động kháng VSVcủa chất chiết thô từ môi trường nuôi cấy.chủng VN-NS này.từNghiên cứu Y học(Plantagodichloromethan. Dịch chiết được bốc hơi ở nhiệtL.độ 50 oC đến cắn khô. Xác định nồng độ tối thiểuPlantaginaceae). MĐ-TR1 được định danh thuộcức chế MRSA (MIC) của chất chiết thô bằngchi Fusarium, được đặt tên là Fusarium MĐ-TR1.phương pháp pha l ...