Khảo sát giá trị trung vị của alpha fetoprotein (AFP) trong huyết thanh của thai phụ ở 3 tháng giữa thai kỳ

Sàng lọc và chẩn đoán trước sinh nhằm phát hiện các trường hợp di tật bẩm sinh ngày càng được quan tâm ở nhiều nước, đặc biệt ở các nước phát triển. Để góp phần tiến tới xây dựng chương trình sàng lọc trước sinh nhằm phát hiện sớm các thai phụ có nguy cơ sinh con bị các dị tật, chúng tôi khảo sát các giá trị trung vị của một số chỉ số sinh hoá như AFP, free beta hCG và uE3 trong huyết thanh thai phụ ở 3 tháng giữa của thai kỳ. Bước đầu thực hiện với 607 thai phụ có số tuần tuổi cuả thai nhi từ 14 tuần cho đến 22 tuần và xác định trung vị của AFP tại mỗi khoảng tuần tuổi của thai nhi.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khảo sát giá trị trung vị của alpha fetoprotein (AFP) trong huyết thanh của thai phụ ở 3 tháng giữa thai kỳ Nghieân cöùu Y hoïc Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005 KHAÛO SAÙT GIAÙ TRÒ TRUNG VÒ CUÛA ALPHA FETOPROTEIN (AFP) TRONG HUYEÁT THANH CUÛA THAI PHUÏ ÔÛ 3 THAÙNG GIÖÕA THAI KYØ Ñoã Thò Thanh Thuûy* TOÙM TAÉT Saøng loïc vaø chaån ñoaùn tröôùc sinh nhaèm phaùt hieän caùc tröôøng hôïp di taät baåm sinh ngaøy caøng ñöôïc quan taâm ôû nhieàu nöôùc, ñaëc bieät ôû caùc nöôùc phaùt trieån. Ñeå goùp phaàn tieán tôùi xaây döïng chöông trình saøng loïc tröôùc sinh nhaèm phaùt hieän sôùm caùc thai phuï coù nguy cô sinh con bò caùc dò taät, chuùng toâi khaûo saùt caùc giaù trò trung vò cuûa moät soá chæ soá sinh hoaù nhö AFP, free beta hCG vaø uE3 trong huyeát thanh thai phuï ôû 3 thaùng giöõa cuûa thai kyø. Böôùc ñaàu thöïc hieän vôùi 607 thai phuï coù soá tuaàn tuoåi cuaû thai nhi töø 14 tuaàn cho ñeán 22 tuaàn vaø xaùc ñònh trung vò cuûa AFP taïi moãi khoaûng tuaàn tuoåi cuûa thai nhi. SUMMARY STUDY ON MEDIAN OF ALPHA FETOPROTEIN IN PREGNANT WOMEN’SERA AT SECOND – TRIMESTER Do Thi Thanh Thuy * Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 9 * Supplement of No 1 * 2005: 179 – 182 Prenatal screening and diagnosis for detection of inherited informality is now concerned in many countries, especialy in the developed ones. For establishing a prenatal screening program, we have studied on median of AFP in 607 pregnant women’sera at second-trimester with gestational age from 14 to 22. ÑAËT VAÁN ÑEÀ Caùc phöông phaùp ñònh löôïng α fetoprotein (AFP) trong huyeát thanh cuûa thai phuï luoân ñöôïc coi nhö moät trong caùc xeùt nghieäm saøng loïc tröôùc sinh coù vai troø quan troïng trong vieäc phaùt hieän caùc dò taät baát thöôøng, chaúng haïn hoäi chöùng Down, khieám khuyeát oáng thaàn kinh trong 3 thaùng giöõa cuûa thai kyø(1,4).ø Trong hôn 2 thaäp nieân qua, taïi nhieàu nöôùc treân theá giôùi, ñaëc bieät ôû caùc nöôùc phaùt trieån nhö Anh vaø Hoa kyø, caùc loaïi xeùt nghieäm saøng loïc nhö AFP, double test, triple test vaø quadrupt test… ñöôïc söû duïng roäng raõi phuïc vuï chöông trình saøng loïc tröôùc sinh, nhôø vaäy maø tæ leä treû bò caùc dò taät baåm sinh nhö hoäi chöùng Down, nöùt ñoát soáng, voâ soï… khi sinh ra ñaõ giaûm haún nhôø caùc tieán boä trong chöông trình saøng loïc vaø chaån ñoaùn tröôùc sinh [3], [6]. ÔÛ Vieät Nam, hieän nay môùi chæ coù moät soá trung taâm y teá aùp duïng ñònh löôïng AFP trong huyeát thanh meï, tuy nhieân cuõng khoâng ñöa ra ñöôïc keát luaän veà nguy cô cuûa vieäc ñònh löôïng AFP. Ñeå tieán tôùi goùp phaàn vaøo vieäc xaây döïng chöông trình saøng loïc tröôùc sinh, chuùng toâi thöïc hieän böôùc ñaàu khaûo saùt trò soá AFP trong huyeát thanh thai phuï ôû moät soá tænh thaønh phía nam. Muïc tieâu nghieân cöùu - Khaûo saùt vaø xaùc ñònh giaù trò trung vò cuûa AFP trong huyeát thanh thai phuï ôû 3 thaùng giöõa thai kyø taïi moät soá tænh phía Nam PHÖÔNG PHAÙP NGHIEÂN CÖÙU Choïn maãu 607 phuï nöõ coù thai töø tuaàn tuoåi thöù 14 ñeán tuaàn thöù 22 thoûa maõn caùc yeâu caàu sau: 9ôû moïi löùa tuoåi 9Caân naëng töø 40kg ñeán 60kg 9Coù moät thai 9Khoâng coù tieàn söû nhö saåy thai lieân tieáp, ñaõ * Boä moân Sinh Hoùa - Ñaïi hoïc Y Döôïc TP. HCM 179 töøng sinh con bò hoäi chöùng Down, nöùt ñoát soáng... 9Khoâng bò tieåu ñöôøng. Phöông phaùp nghieân cöùu Laáy maùu choáng ñoâng, taùch huyeát thanh sau 2 ñeán 4h, caát giöõ maãu ôû –30oC. Tieán haønh ñònh löôïng AFP trong huyeát thanh baèng kyõ thuaät ELISA vôùi boä thuoác thöû cuûa haõng Gamma, Bæ. Nguyeân taéc ñònh löôïng AFP trong huyeát thanh cuûa thai phuï laø test ELISA keïp chaû (ELISA sandwich): Caùc gieáng ñöôïc phuû khaùng theå khaùng AFP baát ñoäng. sau khi uû vôùi huyeát thanh chöùa AFP vaø röûa caùc thaønh phaàn khoâng gaén vôùi khaùng theå khaùng AFP, theâm thaønh phaàn coäng hôïp goàm khaùng theå khaùng AFP ñôn doøng ñaëc hieäu vaø HRP, phöùc hôïp môùi taïo thaønh laø Anti-AFP IgG cuûa thoû *AFP* Coäng hôïp cuûa khaùng AFP cuûa chuoät vôùi peroxidase Caùch tieán haønh Huyeát thanh ñöôïc pha loaõng ½. Treân moät plate coù 96 gieáng ñaõ ñöôïc phuû khaùng theå khaùng AFP, cho 100μl caùc noàng ñoä hieäu chuaån khaùc nhau töø 0 cho ñeán 270 I.U/ml laàn löôït vaøo caùc gieáng töø B1 cho ñeán H1, gieáng A1 laøm oáng traéng (Blank). Sau ñoù cho 100μl caùc maãu huyeát thanh ñaõ pha loaõng vaøo caùc gieáng tieáp theo. Phuû plate baèng lôùp phim moûng, uû 1 giôø ôû 37oC, sau ñoù röûa toaøn boä caùc gieáng 4 laàn baèng dung ñòch röûa pha loaõng. Tieáp tuïc cho vaøo taát caû caùc gieáng 100μl coäng hôïp anti-AFP peroxidase ngoaïi tröø gieáng A1, uû 1 giôø trong 37oC vaø laïi röûa nhö treân sau 1 giôø uû. Cho 100 μl dung dòch TMP vaøo taát caû caùc gieáng, uû 10 phuùt ôû nhieät ñoä phoøng vaø cho theâm 100μl dung dòch ngöøng phaûn öùng. Ñoïc keát quaû Ño ñoä haáp thuï ôû böôùc soùng 450nm vaø böôùc soùng tham khaûo 690nm trong voøng 15 phuùt sau khi phaûn öùng ngöøng cuûa 7 noàng ñoä hieä ...