khảo sát sự phát sinh chồi

Nhân giống cây trồng bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào invitro được gọi là vi nhân giống. Có nhiều phương pháp vi nhân giống khác nhau để tạo chồi từ đó tạo cây con invitro hoàn chỉnh.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
khảo sát sự phát sinh chồiKHẢO SÁT SỰ PHÁT SINHCHỒI TỪ CÁC BỘ PHẬNKHÁC NHAU CỦA CÂYTHUỐC LÁ1.GIỚI THIỆUNhân giống cây trồng bằng phương phápnuôi cấy mô tế bào invitro được gọi là vinhân giống. Có nhiều phương pháp vinhân giống khác nhau để tạo chồi từ đótạo cây con invitro hoàn chỉnh. Tuỳthuộc vào từng đối tượng khác nhau màsử dụng phương pháp phù hợp và tấtnhiên mỗi phương pháp sẽ có những ưuvà nhược điểm riêng* Vi nhân giống bằng phương pháp cắtđốt giâm cành- Hệ số nhân thấp- Thường ứng dụng ớcác đối tượng khótạo cụm chồi (ví dụ như lan sò…)* Vi nhân giống bằng cách tách chồi từcụm chồi- Hệ số nhân cao- Phức tạo hơn trong việc kích thích chồiphát triển cao thành cây con hoàn chỉnhCụm chồi có thể được hình thành từnhiều con đường khác nhau:- Tái sinh từ mô sẹo (khả năng đột biếncao hơn nên thường được sử dụng trongnuôi cấy chọn lọc giống mới)- Phát sinh chồi bất định từ các cơ quankhông sinh sản của cây như lóng thân, lá,cuống lá, rễ, trục phát hoa, lá đài, cánhhoa… (mẫu cấy trảI qua giai đoạn phảnphân hóa để tạo các tế bào sinh mô; tiếpđến là giai đoạn tạo cơ quan với giaiđoạn trung gian tạo mô sẹo mà ta có thểquan sát thấy hoặc không rồi từ đó mớiphát sinh chồi bất định)- Phá trạng thái tiềm sinh của các chồingủ ở mẫu cấy là 1 tổ chức như đốt thân,đỉnh sinh trưởng. Cần kiểm soát hormontăng trưởng để chặn đứng sự phát triểncủa chồi để tạo nhiều chồi (cụm chồi) Vềnguyên tắc có thể kích thích sự thành lậpchồi bất định từ tất cả các cơ quan khôngsinh sản của thực vật. Tuy nhiên trênthực tế thường chỉ thành công trên đốitượng là lá và cuống lá ngoại trừ ở mộtsố đối tượng kinh điển, dễ làm như thuốclá, cà chua… Hàm lượng và loại kíchthích tố bổ sung vào môi trường có ảnhhưởng quyết định đến sự thành lập chồi(thường sử dụng kích thích tố nhómcytokinin với nồng độ cao kếât hợp vớinhóm auxin có nồng độ thấp). Khả năngtái tạo chồi còn phụ thuộc vào kích thướccủa mẫu cấy. Mẫu cấy quá nhỏ có thểkhông đáp ứng được với các điều kiệnnuôi cấy và sẽ hoá nâu.2. THỰC HÀNH2.1. Mục đíchChứng minh nguyên tắc vi nhân giống vàkhả năng tái tạo chồi bất định từ các bộphận khác nhau của thực vật2.2. Vật liệu2.2.1 Môi trườngMS (20g/l đường) có bổ sung 10µM BA2.2.2 Nguyên liệu thực vậtCây con thuốc lá invitro2.2.3 Hoá chất và dụng cụ- Nước cất vô trùng- Dao cấy, kẹp, đĩa cấy và giấy cấy vôtrùng…2. 3. Các bước tiến hànhXử lý mẫu cấy tương tự bài 5 và cấy vàocác đĩa petri có chứa môi trường đãchuẩn bị (Rễ, Lóng thân, Phiến lá)4.Yêu cầu- Thực hiện tốt thao tác xử lý mẫu cấy- Lát cắt lóng thân cần mỏng đến kíchthước yêu cầu- Quan sát và ghi nhận kết quả về sựthành lập chồi , thời gian và số lượngchồi trên mỗi mẫu cấy.