Kỹ thuật khảo sát trực tiếp

Soi tươi không nền: Mục đích: Quan sát di động của vi khuẩn, Phát hiện phẩy khuẩn tả. Phương pháp: Huyền dịch (vi khuẩn, bệnh phẩm). Soi tươi có nền: Mục đích: phát hiện vi khuẩn, ký sinh trùng, hồng cầu bạch cầu trong dịch não tủy, phân...Phương pháp: huyền dịch (vi khuẩn, bệnh phẩm)
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Kỹ thuật khảo sát trực tiếp KYÕ THUAÄTKHAÛO SAÙT TRÖÏC TIEÁP Phaïm Thaùi Bình KYÕ THUAÄT SOI TÖÔI 1 Soi töôi khoâng neàn Muïc ñích ð Quan saùt di ñoäng cuûa vi khuaån. ð Phaùt hieän phaåy khuaån taû. Phöông phaùpHuyeàn dòch (vi khuaån,beänh phaåm) Haï tuï quang, quan saùt ôû ´40 Soi töôi coù neàn Muïc ñích ð Phaùt hieän vi khuaån, vi naám, kyù sinh truøng, hoàng caàu baïch caàu trong dòch naõo tuûy, phaân... C. neoformans C. meningitidis Phöông phaùp (nigrosin) (nigrosin)Huyeàn dòch (vi khuaån,beänh phaåm) Haï tuï quang, Nigrosin (2%) quan saùt ôû ´40 Methylen blue (0.001%) 2 KYÕ THUAÄT CHUAÅN BÒ PHEÁT NHUOÄMChuaån bò pheát nhuoäm khi thöïc hieän: ð Nhuoäm Gram (Gram stain). ð Nhuoäm khaùng acid (Acid fast stain). ð Nhuoäm ñôn (simple stain).Khi laøm pheát nhuoäm caàn löu yù: ð Phaûi daøn ñeàu pheát nhuoäm treân lame ð Phaûi ñeå pheát nhuoäm khoâ töï nhieân. ð Phaûi coá ñònh pheát nhuoäm baèng caùch hô nheï qua ngoïn löûa ñeøn coàn. ð Khoâng ñöôïc nöôùng pheát nhuoäm 3 KYÕ THUAÄT NHUOÄM GRAM Hans Christian Gram Nguyeân taécVaùch cuûa teá baøo vi khuaån Gram (+) giöõ ñöôïc maøu cuûa phöùc hôïpCrystal violet-Iodine khi bò taåy baèng alcohol 4 Dung dòch Crystal violet Thuoác nhuoäm ð Hoøa tan amonium oxalate (0.8g) trong nöôùc caát (80ml). ð Nghieàn crystal violet (2g) trong coái vaø cho töø töø ethanol 95% (20ml) vaøo ñeå laøm tan hoaøn toaøn crystal violet. ð Troän ñeàu hai dung dòch vôùi nhau. ð Baûo quaûn traùnh aùnh saùng. Dung dòch Lugol ð Nghieàn iodine (1g) vaø potassium iodine (3g) trong coái vôùi nöôùc caát Dung dòch Safranine (100ml) cho tan hoaøn toaøn. ð Nghieàn safranine O (0.25g) vôùi ð Baûo quaûn traùnh aùnh saùng. ethanol 95% (10ml) trong coái cho tan hoaøn toaøn. Dung dòch Alcohol ð Theâm vaøo 90ml nöôùc caát, troän ñeàu. ð Duøng alcohol 96% ð Baûo quaûn traùnh aùnh saùng. Phöông phaùp thöïc hieän Pheát nhuoäm ñöôïc coá ñònh treân lamePhuû Crystal violet Röûa baèng nöôùc Phuû Lugol leân Röûa baèng nöôùc Taåy maøu baèngleân pheát nhuoäm cho saïch thuoác pheát nhuoäm trong cho saïch thuoác alcoholtrong 1 phuùt nhuoäm 1 phuùt nhuoäm Röûa baèng nöôùc Phuû Safranine leân Röûa baèng nöôùc Quan saùt ôû Thaám khoâ pheát cho saïch thuoác pheát nhuoäm trong vaät kính daàu nhuoäm nhuoäm 1 phuùt 5 Heä thoáng nhuoäm Gram töï ñoäng Wescor Model 7320 Aerospray® Quick Slide AGS-1000 Bieän luaän keát quaûTính chaát Gram ð Vi khuaån Gram (-): baét maøu hoàng ð Vi khuaån Gram (+): baét maøu tímHình daïng ð Caàu khuaån: vi khuaån hình caàu ð Tröïc khuaån: vi khuaån hình que Caùc tính chaát khaùcCaùch saép xeáp ð Soá löôïng. ð Xeáp chuøm ð Taïo baøo töû. ð Xeáp chuoãi ð Hình daïng hoaëc caùch saép xeáp ñaëc bieät (phaåy khuaån, ð Xeáp ñoâi xoaén khuaån, xeáp hình chöõ ð Xeáp rôøi raïc nho, daïng caàu tröïc khuaån...) ...