Kỹ thuật Real time PCR chẩn đóan sớm HIV trên trẻ em

Tần suất nhiễm HIV: Người lớn ở độ tuổi từ 15-49: 1.9% (2003), Chủng lưu hành chủ yếu là HIV-1 CRF 01 AE, Phụ nữ mang thai: 2.8%. Đường lây từ mẹ sang con là một trong những đường lây quan trọng trong dịch bệnh. Nếu không có sự tầm sóat sớm nhiễm HIV ở trẻ, BS Nhi Khoa phải chờ đợi đến tháng thứ 15 để có thể biết tình trạng huyết thanh học thực sự của trẻ sinh ra từ bà mẹ HIV(+)
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Kỹ thuật Real time PCR chẩn đóan sớm HIV trên trẻ em Kỹ thuật Real time PCR chẩn đóan sớm HIV trên trẻ em Eric Nerrienet HIV/Hepatitis Laboratory IP Cambodia, Phnom Penh Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales Tình nhiễm HIV ở Campuchia • Tần suất nhiễm HIV: • Người lớn ở độ tuổi từ 15-49: 1.9% (2003) • Chủng lưu hành chủ yếu là HIV-1 CRF 01 AE • Phụ nữ mang thai: 2.8% • Đường lây từ mẹ sang con là một trong những đường lây quan trọng trong dịch bệnh 2 Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales 1 Vấn đề đặt ra Nếu không có sự tầm sóat sớm nhiễm HIV ở trẻ, BS Nhi Khoa phải chờ đợi đến tháng thứ 15 để có thể biết tình trạng huyết thanh học thực sự của trẻ sinh ra từ bà mẹ HIV(+) Nếu trẻ không được phát hiện sớm và điều trị thuốc kháng virus Trẻ có nguy cơ tử vong là 50% trong 02 năm đầu tiên của cuộc sống Kỹ thuật kinh điển trong chẩn đóan nhiễm HIV ở trẻ -RT PCR/b-DNA -Giá thành đắt -Nested-DNA PCR (gen: Gag, Pol và/hoặc Env) -Đắt, kỹ thuật phức tạp -Nuôi cấy và phân lập virus -Đắt, kỹ thuật phức tạp, mất nhiều thời gian -Cần labo an tòan mức độ 3 3 Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales Mục tiêu Xây dựng Chuẩn hóa Đánh giá Kỹ thuật real time PCR Để chẩn đoán sớm, giá thành thấp ở trẻ sinh ra từ mẹ nhiễm HIV 4 Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales 2 Kỹ thuật « Real-time PCR » có độ nhạy, đặc hiệu cao, giá thành thấp so với những kỹ thuật kinh điển, dùng để định tính hay định lượng RNA/DNA HIV 1.40E+00 Phân tích điểm cuối Huỳnh quang (delta Rn) 9.00E-01 4.00E-01 Phân tích theo thời gian thực 36 11 16 21 26 31 1 6 -1.00E-01 Số chu kỳ Ct Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales 2 106 cp/ml 2 105 2 104 2000 200 Chu kỳ ngưỡng:35 (17 000 cp/ml) Lượng virus dưới mức phát hiện 6 Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales 3 Kết quả • Xây dựng và chuẩn hóa kỹ thuật • Nhóm nghiên cứu ANRS (AC11/AC12) trong việc định lượng HIV ở các nước phía Nam bán cầu • Trê ...