Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nghiên cứu tạo dòng thuốc lá chuyển gen mang cấu trúc RNAi kháng đồng thời SMV và BYMV

Đề tài nghiên cứu tạo cây thuốc lá chuyển gen bằng kỹ thuật biến nạp cấu trúc RNAi vào mô lá cây thuốc lá C9-1 thông qua lây nhiễm A. tumefaciens tái tổ hợp; phân tích sự có mặt của đoạn gen chuyển trong cây chuyển gen bằng kỹ thuật PCR; nghiên cứ u lây nhiễm virus và phân tích số lượng bản sao virus SMV trong cây thuốc lá chuyển gen chứ a cấu trúc CPi (SMV-BYMV) bằng kỹ thuật Real time RT -PCR.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nghiên cứu tạo dòng thuốc lá chuyển gen mang cấu trúc RNAi kháng đồng thời SMV và BYMV i ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ PHƯƠNG NGÂNNGHIÊN CỨU TẠO DÒNG THUỐC LÁ CHUYỂN GEN MANG CẤU TRÚC RNAi KHÁNG ĐỒNG THỜI SMV VÀ BYMV LUẬN VĂN THẠC SỸ SINH HỌC Chuyên ngành: DI TRUYỀN HỌC Mã số: 60.42.01.21 Cán bộ hướng dẫn khoa học: GS.TS. Chu Hoàng Mậu Thái Nguyên - 4/2015 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn Thái Nguyên - 8/ 2014 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi được thực hiệndưới sự hướng dẫn của GS.TS. Chu Hoàng Mâ ̣u. Mọi trích dẫn trong luận vănđều ghi rõ nguồn gốc. Các số liệu, kết quả nghiên cứu trong luận văn là trungthực và chưa từng ai công bố trong một công trình nào khác. Thái Nguyên, ngày 10 tháng 4 năm 2015 Tác giả ̣ Nguyễn Thi Phương Ngân Ban chủ nhiê ̣m khoa Cán bộ hướng dẫn khoa học GS.TS. Chu Hoàng Mâ ̣u Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới GS.TS. Chu Hoàng Mậu đã tậntình hướng dẫn, chỉ bảo và tạo mọi điều kiện để tôi hoàn thành Bản luâ ̣n văntha ̣c si ̃ này. Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô Bộ môn Di truyền & Sinh họchiện đại, cảm ơn Ban chủ nhiê ̣m khoa và các thầy cô khoa Sinh - KTNN đãtạo điều kiện giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và hoàn thành đề tài luận văn. Tôi xin cảm ơn các cán bô ̣ Phòng ADN ứng du ̣ng, Phòng thí nghiệmTrọng điểm công nghệ gen, Viêṇ Công nghê ̣ sinh ho ̣c, Viêṇ Hàn lâm Khoahọc và Công nghê ̣ Viê ̣t Nam đã ta ̣o điề u kiêṇ và giúp đỡ tôi trong quá trìnhtiế n hành thí nghiê ̣m của đề tài. Tôi xin cảm ơn Tiến sỹ Lò Thị Mai Thu và Thạc sĩ Lê Thị Hồng đãgiúp đỡ tôi trong quá trình thực hiêṇ đề tài luận văn. Đề tài luận văn thuộc chương trình đào tạo nghiên cứu sinh và cao họccủa Bộ môn Di truyề n & Sinh học hiê ̣n đại, khoa Sinh-Kỹ thuật nông nghiê ̣p,trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên. Tác giả Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iii MỤC LỤC TrangLỜI CAM ĐOAN…………………………………………………….. iLỜI CẢM ƠN........................................................................................ iiMỤC LỤC............................................................................................. iiiDANH MỤC CHỮ CÁI VIẾT TẮT..................................................... ivDANH MỤC CÁC BẢNG ................................................................... vDANH MỤC CÁC HÌNH .................................................................... viiMỞ ĐẦU……………………………………………………………... 1Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU…………………………......... 41.1. SOYBEAN MOSAIC VIRUS VÀ BEAN YELLOW MOSAICVIRUS........................................................................................................ 41.1.1. Bệnh khảm ở cây đậu tương........................................................ 41.1.2. Hệ gen của SMV, BYMV và Potyvirrus .................................... 81.2. ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RNAi TRONG TẠO CÂY THUỐC LÁCHUYỂN GEN KHÁNG VIRUS............................................................. 111.2.1. Cây thuốc lá và bệnh virus trên cây thuốc lá............................... 111.2.2. Cơ chế RNA interference (RNAi)............................................... 141.2.3. Ứng dụng kỹ thuật RNAi tạo cây trồng chuyển gen kháng 16virus.......................................................................................................1.3. ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PHÂN TỬ TRONG PHÂN TÍ CH CÂY 18CHUYỂN GEN .................................. ...