Nghiên cứu khả năng truyền đặc điểm đề kháng kháng sinh của probiotic sang vi khuẩn khác trong điều kiện in vitro

Một số chủng probiotic chứa gen kháng kháng sinh trên nhiễm sắc thể, có thể tiềm ẩn nguy cơ truyền gen này sang vi sinh vật khác, đặc biệt là vi sinh vật gây bệnh bằng phương thức chuyển gen theo chiều ngang. Bài viết trình bày việc kiểm tra khả năng truyền gen đề kháng kháng sinh từ probiotic sang Bacillus subtilis PY79 in vitro.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu khả năng truyền đặc điểm đề kháng kháng sinh của probiotic sang vi khuẩn khác trong điều kiện in vitroY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số 4 * 2021 Nghiên cứu NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TRUYỀN ĐẶC ĐIỂM ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA PROBIOTIC SANG VI KHUẨN KHÁC TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO Lê Văn Hoài Trân1, Vũ Thanh Thảo1, Trần Cát Đông1TÓM TẮT Đặt vấn đề: Một số chủng probiotic chứa gen kháng kháng sinh trên nhiễm sắc thể, có thể tiềm ẩnnguy cơ truyền gen này sang vi sinh vật khác, đặc biệt là vi sinh vật gây bệnh bằng phương thức chuyểngen theo chiều ngang. Mục tiêu: Kiểm tra khả năng truyền gen đề kháng kháng sinh từ probiotic sang Bacillus subtilis PY79 in vitro. Đối tượng và phương pháp: MIC của vi khuẩn probiotic và B. subtilis PY79 được xác định bằng phươngpháp pha loãng kháng sinh trong thạch. ADN nhiễm sắc thể của probiotic được chiết và biến nạp vào B. subtilisPY79 bằng hóa biến nạp. Thể biến nạp được khảo sát hình thái khuẩn lạc, nhuộm Gram, xác định MIC và kiểugen bằng rep-PCR. Kết quả: Khi chuyển gen của vi khuẩn probiotic vào B. subtilis PY79 thu được 12 thể biến nạp có MIC vớichloramphenicol cao gấp 4-32 lần so với MIC của B. subtilis PY79; 10 thể biến nạp có MIC với tetracyclin caohơn MIC của B. subtilis PY79. Trong số 22 thể biến nạp, 4 chủng có kiểu gen tương đồng khoảng 80% với B.subtilis PY79, không có chủng nào có kiểu gen tương đồng 100% với B. subtilis PY79, chứng tỏ kiểu gen của cácthể biến nạp đã thay đổi. Kết luận: Quá trình chuyển gen đề kháng kháng sinh theo chiều ngang có thể xảy ra từ probiotic sang B.subtilis PY79 qua biến nạp in vitro. Từ khóa: Đề kháng kháng sinh, Bacillus, probiotic, biến nạp, chuyển gen theo chiều ngangABSTRACT STUDY ON TRANSFER OF ANTIBIOTIC-RESISTANCE CHARACTERISTIC FROM PROBIOTICS TO OTHER BACTERIAL SPECIES IN VITRO Le Van Hoai Tran, Vu Thanh Thao, Tran Cat Dong * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol. 25 - No. 4 - 2021: 77 - 83 Background: Some probiotic strains possess intrinsic antibiotic-resistance genes have potential risk ofspreading these genes to other bacterial species, especially in case of pathogenic bacteria by horizontal gene transfer. Objectives: Investigate the possibility of transformation antibiotic-resistance genes from probiotics toBacillus subtilis PY79 in vitro. Methods: Minimal inhibitory concentration (MIC) of probiotics and B. subtilis PY79 were determined.using agar dilution method. Genomic DNA of probiotic strains was extracted and transformed to B. subtilisPY79 via chemical transformation. Transformants were characterized colony morphology, Gram stain,determined MIC and genotype by rep-PCR. Results: Transfer of probiotic’s DNA to B. subtilis PY79 yield 12 transformants that showed MIC value forchloramphenicol 4 to 32 times higher than the value of B. subtilis PY79, 10 transformants had MIC value fortetracyclin higher than B. subtilis PY79. Among 22 transformants, there were 4 strains had approximately 80%genotype similarity to B. subtilis PY79, none of these strains showed 100% genotype similarity to B. subtilis Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh 1 Tác giả liên lạc: DS. Lê Văn Hoài Trân ĐT: 0387861271 Email: lvhtran@ump.edu.vnB - Khoa học Dược 77Nghiên cứu Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số 4 * 2021PY79, indicated that genotype of transformants have changed. Conclusions: Horizontal transfer of antibiotic-resistance genes is possible from probiotic strains to B.subtilis PY79 through in vitro transformation. Keywords: antibiotic-resistance, Bacillus, probiotic, transformation, horizontal gene transferĐẶT VẤNĐỀ gen đề kháng kháng sinh có nguồn gốc từ ADN Probiotic và sản phẩm có chứa probiotic như nhiễm sắc thể của probiotic qua con đường biếnmen vi sinh hỗ trợ tiêu hóa hay sản phẩm lên nạp hoặc tiếp hợp. Jose và cộng sự cho rằng cácmen từ sữa... được chứng minh có nhiều tác gen này không thể truyền theo chiều ngang chođộng có lợi cho người sử dụng như tái cân bằng các loài khác(7), Bozdogan và cộng sự(12) khônghệ vi sinh vật đường ruột, kích thích hệ thống thực hiện thành công việc chuyển gen khángmiễn dịch của cơ thể(1). Tác động có lợi của macrolid trên ADN của Bacillus clausii sangprobiotic đối với vật chủ thông qua nhiều cơ chế Enterococcus faecalis JH2-2, E. faecium HM1070 vàkhác nhau như sự cạnh tranh bám dính lên B. subtilis UCN19 trên in vitro.đường tiêu hóa, điều hòa miễn dịch và khả năng Nghiên cứu này nhằm kiểm tra rằng đặc tínhtiết ra các chất kháng khuẩn kìm hãm sự phát đề kháng kháng sinh từ probiotic Bacillus clausiitriển của các vi sinh vật khác(2,3). Nhóm vi khuẩn và Enterococcus faecalis Có khả năng truyền cho B.lactic (Lactic Acid Bacteria-LAB) biểu hiện nhiều subtilis PY79 thông qua biến nạp ở điều kiện inloại protein màng ngoài với vai trò trung gianh vitro hay không.bám dính lên chất nhầy và tế bào biểu mô ruột(4). ĐỐI TƯỢNG- PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨUTương tác giữa vi khuẩn và tế bào biểu mô ruột Vật liệulàm tăng khả năng bám dính của chúng đồng Chủng vi sinh vậtthời cũng tăng thải loại các vi khuẩn gây bệnh rakhỏi đường tiêu hóa(5). Một số vi khuẩn thuộc chi Bacillus subtilis PY79 ...