Nghiên cứu phân lập lycorin từ náng hoa trắng (crinum asiaticum roxb amaryllidaceae) làm chất chuẩn đối chiếu trong kiểm nghiệm

Đề tài được tiến hành để nghiên cứu chiết xuất và phân lập lycorin trong lá Náng hoa trắng làm chất chuẩn đối chiếu cho nghiên cứu định tính và định lượng lycorin trong dược liệu và chế phẩm chứa lycorin.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu phân lập lycorin từ náng hoa trắng (crinum asiaticum roxb amaryllidaceae) làm chất chuẩn đối chiếu trong kiểm nghiệmNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP LYCORIN TỪ NÁNG HOA TRẮNG(CRINUM ASIATICUM ROXB AMARYLLIDACEAE)LÀM CHẤT CHUẨN ĐỐI CHIẾU TRONG KIỂM NGHIỆMNguyễn Ngọc Quỳnh**, Nguyễn Hữu Phúc**, Trần Hùng*TÓM TẮTMục tiêu: Nghiên cứu chiết xuất và phân lập lycorin trong lá Náng hoa trắng làm chất chuẩn đối chiếu chonghiên cứu định tính và định lượng lycorin trong dược liệu và chế phẩm chứa lycorin.Phương pháp: Dược liệu được chiết bằng phương pháp ngấm kiệt với cồn 95% và bốc hơi dưới áp suấtgiảm thu được cao chiết. Cao chiết được chiết phân bố lỏng – lỏng với các dung môi có độ phân cực khác nhauthu được các cao phân đoạn. Các phân đoạn được tách và lập các chất tinh khiết bằng phương pháp sắc ký cột cổđiển. Chất tinh khiết được tinh chế bằng phương pháp kết tinh lại. Chất phân lập được, được xác định cấu trúcbằng các kỹ thuật phổ NMR và MS. Độ tinh khiết của lycorin được đánh giá bằng HPLC với detector UV.Kết quả: Đã phân lập được 3,5 g hợp chất tinh khiết, xác định cấu trúc là lycorin và kiểm tra độ tinh khiếtđạt 99 %.Kết luận: Đã phân lập được lycorin với độ tinh khiết có thể dùng làm chất chuẩn đối chiếu trong kiểmnghiệm dược liệu và chế phẩm có chứa lycorinTừ khóa: Náng hoa trắng, Crinum asiaticum, lycorin, phân lập, cấu trúc, HPLC-PDA.ABSTRACTISOLATION OF LYCORINE FROM CRINUM ASIATICUM ROXB AMARYLLIDACEAE – ORIENT ASREFERENCE SUBSTANCENguyen Ngoc Quynh, Nguyen Huu Phuc, Tran Hung* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 - Supplement of No 1 - 2011: 602 - 605Objectives: Extraction and isolation study of lycorine from Crinum asiaticum leaves for using as referencestandard for quality control of herbs and lycorine-containing preparations.Methods: leaves powder of Crinum asiaticum was percolated with 95% alcohol, percolate obtained wasevaporated under reduced pressure to give a liquid extract. The extract was fractionated by distribution withsolvents. The fractions were then chromatographed on silica gel 60 (0.40 – 0.063 mm). Lycorine was isolated,purified and elucidated by NMR spectra. The purity of lycorine was determined by HPLC-PDA.Results: 3 fractions (Q1, Q2, Q3) were obtained from alcoholic extract of Crinum asiaticum leaves. Lycorine(3.5 g) was isolated from fraction Q3 and its purity was detemined as pure as 99 %.Conclusions: Lycorine was isolated with the purity suitable for using as reference standard for qualitycontrol of herbs and lycorine-containing preparations.Key words: Crinum asiaticum, lycorine, isolation, structure, HPLC-PDA.đông và Đông nam Á, để điều trị các viêm khớpĐẶT VẤN ĐỀvà dùng làm thuốc kháng khuẩn(4,5). Náng hoaNáng hoa trắng được sử dụng trong y học cổtrắng được biết như một cây thuốc chứa nhiềutruyền và dân gian của Việt nam và một số nướcalkaloid và một số alkaloid trong nhóm này có*Đại học Y Dược TPHCM **Trường Đại học Y Dược Cần ThơTác giả liên hệ: PGS. TS. Trần Hùng ĐT: 0918057096Email: tranhung@uphcm.edu.com602Chuyên Đề Dược KhoaY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011tác dụng kháng viêm, kháng khối u, và cải thiệntrí nhớ tuổi già, tác dụng này được y học hiệnđại quan tâm đặc biệt(1,2,3,4). Đề tài được thực hiệnvới mục đích phân lập lycorin để sử dụng làmchất chuẩn đối chiếu cho việc xây dựng phươngpháp kiểm nghiệm dược liệu, các chế phẩmchứa lycorin và các nghiên cứu về tác dụng sinhhọc của lycorin sau này.NGUYÊN LIỆUNGHIÊN CỨU-PHƯƠNGPHÁPNguyên liệuĐối tượng là cây Náng hoa trắng được thuhái tại Tp. Cần Thơ (tháng 6/2008). Mẫu đượcđịnh danh và lưu mẫu tại Bộ môn Dược liệu,Khoa Dược, Đại học Y Dược TPHCM.Phương pháp nghiên cứuDược liệu được chiết bằng phương phápngấm kiệt với dung môi là cồn 95%.Cao chiếtđược tách thành các phân đoạn đơn giản hơnbằng cách chiết phân bố lỏng – lỏng. Sau đó cácphân đoạn được tách và phân lập các hợp chấtbằng phương pháp sắc ký cột cổ điển, chất tinhkhiết được tinh chế bằng phương pháp kết tinhlại. Cấu trúc của chất phân lập đã được xác địnhbằng phổ MS thực hiện trên máy Quattro MicroAPI, phổ NMR với máy Bruker Avance 500 sửdụng CDCl3. Chất phân lập được kiểm tra độtinh khiết bằng sắc ký lỏng áp sất cao, thực hiệnHPLC Hitachi L – 2000EZChrom Elite, đầu dò UV – Vis, với cáctrênmáyđiều kiện sắc ký như sau:Cột sắc ký: LiChro Cart RP C18 (250 mm x4,6 mm, 5μm)Pha động: Ammonium acetat 1% (kl/tt) pH8,0 – Acetonitril (90: 10).Tốc độ dòng: 1,5ml/phútThể tích tiêm mẫu: 20μlBước sóng phát hiện: 290nmNhiệt độ phân tích: nhiệt độ phòngThời gian phân tích: 18 phútChuyên Đề Dược KhoaNghiên cứu Y họcKẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬNChiết tách các hợp chất trong Náng hoatrắngBột dược liệu khô (12 kg) được làm ẩm bằngcồn 95% trong khoảng 1 giờ, vào bình ngấm kiệt,sau đó thêm dung môi ngập mặt dược liệukhoảng 2-3 cm. Ngâm tro ...